GuruHealthInfo.com

Medicinsko pravo: pravo, dokumente, odgovornosti, pravila, akti.




zdravstvena zakonodaja


Priloga N 6UTVERZhDENOPrikaz MZ Rossiiot od 1998/09/01 N 2INSTRUKTSIYAPO ODVZEM iz seruma ANTIREZUSANTITEL DRUGIH SPETsIFIChNOSTIObschie About praktično delo po definiciji RH prinadlezhnostikrovi največje udobje je uporaba syvorotokantirezus krvna skupina AB (IV), so bili nesoderzhaschihgruppovyhagglyutininov alfaibeta.Takiesyvorotkiyavlyayutsyauniversalnymi mogoče ugotoviti Rh prinadlezhnostv krvna skupina na kateri koli sistem AVO.Syvorotki antirezus pripadajo skupini G (I), (II) in B (III), prav tako mo Gut, ki se pretvori v univerzalnih putemabsorbtsii ali jih alfa aglutinin skupina ibeta.Pomimo gruppovyhagglyutininovispolzovaniyusyvorotkiantirezus nevtralizacijo posega na voljo tudi v nekaterih primerih izoimmunnyeantitela druge posebnosti, najbolj anti-C in anti-E. Eslieti imajo nizke titrne protitelesa, ki jih lahko odstranimo z razredčenjem ali pomoschiabsorbtsii syvorotki.Ispolzovanie Universal serumov antirezus uproschaetrabotu, povečuje učinkovitost laboratorijskih storitev in isklyuchaetpoluchenie do napačnih rezultatov zaradi neusklajenost gruppysyvorotki antirezus in raziskali eritrotsitov.Dlya serumskega sproščanja aglutinacijskim antirezus alfa, beta in protitelesa iz anti-C in anti-E lahko uporabijo različne metode: a) nevtraliziranje alfa aglutinin skupino in skupino betasootvetstvuyuschim m jih vsebujejo amnioticheskoyzhidkosti (glej. str. 1) -b) nevtraliziranje alfa aglutinin skupino betaestestvennym skupino in A in B snov (snovi Vitebsk) (glej. str. 2) -c) absorbtsiyugruppovyhagglyutininovalfai betarezus-negativne eritrocitov nahaja Konvolucijski kroviposle jih vzeli iz seruma (glej. str. 3) do d) nevtraliziranje skupino aglutinini alfa in beta putemrazvedeniya serumu (gl. str. 4) do e) absorpcija anti-C in anti-E etoyspetsifichnosti eritrocitov (glej. str. 5) do e) nevtralizacijskih protiteles proti C in anti-E s razvedeniyasyvorotki (gl. str. 6) .1. Nevtralizacija filter aglutinini alfa in beta na pomoschiamnioticheskoy tekočine *>Amnijske soderzhitrastvorennuyugruppovuyusubstantsiyu tekočina ustreza fetalni krvni skupini. Lahko bytispolzovana tako v nativni obliki in pre vysushennayai nato raztopimo v destilirani vodi (priprava tekočega in obrabotkuamnioticheskoy cm. Str 8) .---------------------- ---------- *> - amnijske tekočine in nevtralizira alfa betaantitela spada v razred LGM in delno alfa betaantitela spada v razred IgG, brez nevtralizacije neytralizuyutsya.Dlya aglutinini alfa in beta skupine beta Oalfa syvorotkeantirezus (I) z uporabo amnionskih zhidkostgruppy AB (IV) ali zmes plodovnica vzorci filter (ii) in (III). Za nevtralizacijo aglutinin beta syvorotkegruppy v Abeta (II) z uporabo plodovnice iz B (III) .Za nevtralizacijo v serumu aglutinini alfa antirezus gruppyValfa (III) z uporabo plodovnice od A (II) .Za popolnega izčrpanja v filter aglutinin iskhodnoysyvorotke antirezus izvedemo optimalno izbiro sootnosheniyaamnioticheskoy tekočine in seruma nevtraliziramo antirezus, dlyachego: - stojalo dvižno pet cevke simboli 1: 2,1: 3, 1: 4, 1: 5, 1: 6, vse cevi 2 za izdelavo tekoče kapliamnioticheskoy TI - poslevysushivaniya-- nativne ali raztopljen v prvi epruveti dodamo 4 kapljice neytralizuemoysyvorotki, 6 kapljic v drugi, tretji - 8 kapljic, četrti -10 kapljic v peti - bilo 12 kapel-- vsebnosti mešamo in pustimo 10 minut prikomnatnoy temperaturi - po izpostavitvi 10 min zmesi za vsako probirkikontroliruyut ravnini napolnotu neytralizatsiisostandartnymi Rh negativne Eritrociti soderzhaschimiantigen ustreznega nevtraliziramo agglyutininam-- zadnjo razredčitev v katerih nobena prir yutinatsiya (čas opazovanja 5 minut) je bil sprejet za optimalno sootnoshenieamnioticheskoy tekočine in nevtraliziramo syvorotki-- če nobena aglutinacije na vse razredčine gotovyatrazvedeniya 1: 7, 1: 8, 1: 9 in nadaljevali raziskavo kot skazanovyshe-- po izbran optimalno razmerje do osnovnomuobemu serumu antirezus dodamo kolichestvoamnioticheskoy ustreza tekočino in jih mešali. Po 10-20 minutah posleperemeshivaniya ponovno preveri v serumu absorbance popolnosti naploskosti z vzorci 6-8 Rh-negativne eritrocitov gruppyA (ii) in (III) - v nadaljevanju seruma preučil in obdelamo v skladu s"Navodila za izdelavo standardnih serumov in reagentaantirezus".Opomba: Da bi olajšali pridobivanje univerzalne sera izsyvorotok antirezus skupino Abeta (II) in Valfa (III) njihova mozhnopredvaritelnosmeshivat, chtopozvolyaetneytralizovatodnomomentno aglutinini alfa in beta amnionskih zhidkostyugruppy AB (IV) ali zmes amnijske tekočine od A (II) igruppyV (III). Mešalne syvorotkiprotivopolozhnyh skupine tudi priporočljivo, ker ko etomproiskhoditchastichnayavzaimnayaneytralizatsiya gruppovyhagglyutininov ki zmanjšuje količino amnijske tekočine potreben za popolno nevtralizacijo in zato redčenje snizhaetsyastepen absorpcijske syvorotki.Ispolzovanie posušimo amniotska zhidkostiPri nizek titer seruma antirezus, omejuje eerazvedenie za suhi prašek neytralizatsiiagglyutininovtselesoobraznoispolzovat . Za nevtralizacijo nadaljuje na enak način - sopredeleniya optimalno razmerje in serum antirezus suhogoporoshka pridobljen iz amnijske tekočine, kot sledi: - stojalo dvižno štiri cevi oštevilčene, h kateri bi 0,5 ml seruma antirezus-- je prva cev dodamo 2 mg posušenih amnioticheskoyzhidkosti, drugi - 4 mg, v tretjem - 8 mg in v četrtem - 16 mg.Soderzhimoe cevi mešamo do popolne raztopitve praška pri sobni iostavlyayut temperature-- po 10 minutah se izvaja na preskus ravnini polnotune je ytralizatsii s skupinami eritrocitov A (ii) in (III), in je razmerje vybirayutoptimalnoe ingredientov-- izbranim razmerjem se uporablja za izdelavo osnovnogoobema syvorotki-- nadalje preučiti seruma obdelamo v skladu s"Navodila za izdelavo serumu in reagent antirezus dne"0,2. Nevtralizacija skupina alfa aglutinin in specifičnost betaestestvennymi snovi iz skupine A in B (snov Vitebsk) vozila spetsificheskieveschestvaAiVyavlyayutsyavysokomolekulyarnymi polisaharidi pripravimo vproizvodstvennyh pogoje iz prašičjega sluznico in njihovo loshadinyhzheludkov z encimsko razgradnjo in čiščenje posleduyuschimosazhdeniem z organskimi topili. Kolichestvogruppovogo zlasti snov potrebna za neytralizatsiiantitel seruma je odvisna od aktivnosti snovi. Dlyaneytralizatsii filter na serumske aglutinini antirezusdobavlyayut filter specifično snov iz izračuna: - za 1000 ml seruma antirezus G (i) - 0,1 g gruppovogoveschestva A in 0,1 g - filter snov V- do 1000 ml seruma antirezus skupine A (II ) - 0,1 ggruppovogo snov B do 1000 ml seruma antirezus skupine B (III) - 0,1 g gruppovogoveschestva snovi A.Dlya raztapljanja filter potrebi pa kolichestvosnachala trituriramo s stekleno paličico v epruveti ali chasovomstekle z majhno količino (1 ml) serumi antirezus, ogrevano 37sh do C, nato pa je ta skupina pribitki snov preneseni znesek v serumu antirezus previdno večkrat smyvayaego serum iz stekla. Serum smo mešali antirezus sgruppovym snov in nameščene v inkubator za 3 ure peremeshivayakazhdye je 30 minut.Posle Serum dani v hladilniku pri 4sh C nemenee kot tri dni, nato pa pregledanih za aglutinacijo plošče nasoderzhanie skupino z 6-8 obraztsamirezus-negativna krvna skupina A (ii) in (III) .Otsutstvie aglutinacijo pomeni, da agglyutininypolnostyu skupina nevtraliziramo. Prisotnost aglutinacije kaže nepolnuyuneytralizatsiyu gruppovyhagglyutininov.Vsluchae nepolnoyneytralizatsii skupine v serumu aglutinini ponovno dobavlyayuttakoe enaka ali večja (0,5 g) znesek postopku snov filter ivsya povtoryaetsya.Pri popolna nevtralizacija skupine aglutinin syvorotkuissleduyut in nadalje obdelamo v skladu z "Navodila poizgotovleniyu standardni serum in reakcijske antirezus"0,3. Absorpcija skupinskega aglutinin RH otritsatelnymieritrotsitami pregibi na krvno skupino AB (IV) Konvolucija Neopren krvna skupina AB (IV), preostali serumu posleotsasyvaniya antirezus dovoljena 4-8sh shranimo pri 1-2 C vtechenie sutok.Dlya absorpcije hlajenih pregibi zdrobimo z pomoschisteklyannoy palicami dodamo in ohladimo syvorotkuantirezus v količini 1 / 6-1 / 3 volumna glede na volumen, ki ga zdrobljenega snop (zasedeni s 300 ml konvolucija prilivayut50-100 ml seruma absorbira, odvisno od aktivnostigruppovyh mravlje ITEL). Serum smo previdno pomešamo s paketom, pustimo stati 18-20 ur pri 4-8sh C, nato ločimo s otsvertka tsentrifugirovaniya.Dalee seruma se preverja na ravnini z vzorci 6-8 Rh negativna števila rdečih krvnih celic in v primeru popolne absorpcije gruppovyhagglyutininov nadalje obdelamo in preizkušeni v skladu s"Navodila za izdelavo serumu in reagent antirezus dne"0,4. Nevtralizacija skupina alfa aglutinin in razredčitve seruma betapri pomoč nevtralizirajočih syvorotkiDlya antirezus izotonicheskimrastvorom NaCl razredčen serum, posebej izbrana skupina AB (IV) ilistandartnym protitelesa filter razvoditelem.Neytralizatsiya pomočjo razredčitve vozmozhnatolko šele, ko velika razlika titer skupino in Rh antitel.Naprimer če protitelo titer filter 1: 8 serumu sleduetrazvesti najmanj 16-krat, kar je možno le, če titer protiteles pri rhesus nadaljuje po razredčenju nizhetrebovany niso prikazani standardnemu serumu antirezus.V med delovanjem na začetku je treba pripraviti probnyerazvedeniya antirezus serumski titer in preveri, Rh protitelesa stopnjo nevtralizacije atakzhe skupine z 6-8 obraztsamirezus protiteles negativnih eritrocitih skupine A (ii) in (III). z vzdrževanjem zadostnega titer protiteles in rhesus protiteles polnoteabsorbtsii skupini razredčimo primarna volumen syvorotkiantirezus nadalje raziskovali in ga obdelamo v skladu s"Navodila za izdelavo serumu in reagent antirezus dne"0,5. Odstranitev serumskih antirezus spremljajo antitelanti-C in anti-EEsli kateremkoli koraku seruma zdravljenja antirezus Dvyyasnitsya, da vsebuje tudi druge protitelesa antirezus, slednji lahko odstranimo z absorpcijo ali razvedeniyasyvorotki.Absorbtsiya izvedemo trikrat izperemo eritrocitov v vzyatymipriblizitelno pol količina glede na serum. Esliv serumu zmes ima anti-S protitelesi za fenotip eritrocite absorbtsiiprimenyayutsya Ccddee, in če primesanti-E, rdeče krvne celice fenotip ccddEe. Absorpcija poteka vtechenie 2-3 ur. pri 37sh C ob mešanju preskusom sposleduyuschey serumu za specifičnost in aktivnost.Esli sorodnih protiteles ni odstranjena, sorpcijo lahko povtorit.Razvedenie serumu antirezus Odstranitev soputstvuyuschihantitel mogoče izvesti na titer protiteles anti-D ni nižja chem1: 128-1: 256 titer sorodnih protiteles ni višje od 1: 2.Syvorotku antirezus razredčen z izotonično NaCl, serumski - razvoditelem ali standardni razvoditelem.V začni naj bi ugotovitve, da issledovatna popolnost nevtralizacijo soputst uyuschih sohrannostdostatochnogo protitelesa in titer protiteles Rhesus D. Ko se v velikem obsegu rezultaterazvodyat pozitivnim serumom. Po absorpciji, tako iposle razredčitve seruma količina primarnega njegovega ponovnega obrabatyvayuti nadalje raziskati v skladu z "Navodila za izgotovleniyustandartnyh serumu in reagenta antirezus"0,6. Priprava plodovnice in njegovo predelavo v proizvodnjo dlyaispolzovaniya sera antirezusAmnioticheskuyu tekočine, zbranih v bolnišnicah od kazhdoyrozhenitsy posamično v čistih vial. Iz nosečnici lahko bytpolucheno od 100 do 1500 ml. Na nalepki na steklenici kaže familiyurozhenitsy, datum zajemanja in število možnih skupine pripadnosti sootvetstvuetgruppe krovinovorozhdennogo.Gruppovaya plodovnica transfuzijske novorozhdennogo.Oplata zasboramnioticheskoyzhidkostiproizvoditsyauchrezhdeniyami krvi storitev je podobna plačila za retroplatsentarnuyukrov sredstev za nabavo plodovnice do krovi.Podgotovka ispolzovaniyuGruppovuyu pripadnost amnijske ustanavlivayutputem tekočine, ki določa članstvo v skupini krvi novorozhdennogoi Ali metodomistoscheniyaagglyutininovalfaibeta skupine O vgemagglyutiniruyuschey seruma (I). Za to probirkesmeshivayut enakim volumnom (1 ml) s standardnim gemagglyutiniruyuscheysyvorotki 1:32 testnega Titer amnijske tekočine. Zmes mešamo in pustimo stati 10 minut. pri sobni temperature.Zatem zmesi seruma in amnijske naploskosti tekočin pregledane s standardnimi eritrocitih skupine A (ii) in (III) iz usklajuje eritrocitov in zmes mora ustrezati primerno1 10, izpostavljenost minut.Traktovka 5-7 na rezultatih Prisotnost aglutinacijo v kapljice s eritrocite skupine a (II) v igruppy (III) označuje odsotnost amnijske zhidkostigruppovyh antigeni A in B, t.j. njegova pripadnost gruppeO (I). Taka plodovnica ni primeren za neytralizatsiigruppovyh agglyutininov.- odsotnosti aglutinacijo s eritrocitov v kapljico (II) in prisotnosti aglutinacijo s eritrocitov pri padcu skupini (III) označuje plodovnice pripada skupini A (II) .- odsotnosti aglutinacije na padec z eritrocitov skupine B (III) in njihovo prisotnost z eritrocitih skupine A (II) označuje naprinadlezhnost plodovnice v skupino B (III) .- odsotnost aglutinacijo s eritrocitov kot kapljice gruppyA (II), in skupine B (III) kaže prinadlezhnostamni CAL tekočine v skupino AB (IV) .Gruppovuyu pribor zapiše na nalepki na viali z kotoruyunakleivayut zhidkostyu.Kontrol amnijske tekočine v amnijske spetsifichnostSleduet preuči možnost vdorom krvi amnioticheskuyuzhidkost parturient, in s tem, da je treba issledovatkazhdy amnijske vzorcu tekočine na prisotnost amnijske gruppovyhagglyutininov.Issledovanie tekočina z eritrocitov gruppyA (ii) in (III) izvedemo analogno HD gruppovoyprinadlezhnosti krovi.Nalichie aglutinacijskim OZNA izpira prisotnost amnijske zhidkostigruppovyh krvi aglutinacije mater. Tak vzorec neprigodendlya raboty.Filtratsiya konzerv amnionskih zhidkostiPosle določiti pripadnost skupini in nadzor naspetsifichnost plodovnica filtriramo skozi filter ali obychnyybumazhny pod vakuumom preko porcelana Buchnerjev lij, na kateri je postavljen filter papir razrezane tolschinoy5-7 mm. Po filtriranju plodovnica stanovitsyaprozrachnoy.Konservirovanie iz borove kisline na osnovi 2 gRNA 100 ml ali 1 g natrijevega azida na 1000 ml.Srok shranjevanja amnijske tekočine po 12 mesecih 4-8sh S.Vysushivanie amnijske zhidkostiS bi podaljšale polica življenjsko amniotska zhidkostvysushivayut 150-200 ml viale zmogljivost 250-500 ml. Naflakony lepljen oznako, amnioticheskoyzhidkosti skupino ABO sistem, prvotno višino in datyvysushivaniya.Vysushennuyu plodovnice smo shranili pri komnatnoytemperature. Rok trajanja 5 let. Amnioticheskuyuzhidkost posušimo pred uporabo razredčimo z destilirano prostornino vode doiskhodnogo. Po raztapljanju uporabi priporočil analogichnonativnoy.Metodicheskie "Odstranitev sirotka antirezusantitel drugoyspetsifichnosti"Odobreni Ministerstvomzdravoohraneniya ZSSR November 27, 1990 N 10-11 / 136, schitatutrativshimi silo od datuma odobritve teh instruktsii.Nachalnik Upravleniyaorganizatsii meditsinskoypomoschi naseleniyuMinzdrava RFA.I.VYaLKOVPrilozhenie N 7UTVERZhDENOPrikaz Rossiiot Ministrstvo za zdravje 09.01.1998, N 2INSTRUKTSIYAPO DOLOČITEV Rh PRIBOR KROVII. VVEDENIEOpredelenie Rh dodatki je identificirati ljudi veritrotsitah antigena Rhesus D sistem Rezus.V sistem obsega šest antigene: D, D, C, C, E, E, ki je določena z ustreznim antisyvorotok.Antigen d serološko ni zaznana. Tukaj takzheraznovidnosti Rh antigene: Du, Cw, cv, cx in drugie.Antigeny Rhesus naleteli z naslednjo pogostostjo: D - 85% C - 70% C - 80% E - 30% E - 97,5% Rhesus antigenov imajo sposobnostyuvyzyvatobrazovanie izoimunske antitel.Naibolee aktiven v tem pogledu je antigen D, kotoryyi pomeni Rh. To pomanjkanje antigen D nalichiyuili vsi ljudje so razdeljene v Rh-RH polozhitelnyhi otritsatelnyh.Razlichnye kombinacije antigenov krvnih skupin Rhesus izbrano lyudeysostavlyayut 28 Rhesus (Tab. 1). Štirinajst nihsoderzhitsya antigen D - so Rh-pozitivnih in drugiechetyrnadtsat ne vsebujejo antigen D (spodnji del tabele) - ihotnosyat da otritsatelnym.Tablitsa 1SISTEMA Rh Rh + ----- + --------- -------------------------------------------------- - + | N | Rhesus pozitiven || + ---------------------- + ------------- + ---------- + - ----------- + | p / p | fenotip | v% Pogostost | Genotip | pojavnosti% | + ----- + ---------------------- + ------------- + ---------- + ------------ + | 1-2 | CCDEE CwCDEe | 0.00 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 3 | SSDEe | 0,07 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 4 | CcDEE | 0035 | CDE / CDE | 0006 || | | | CDE / CDE | 0029 | + ----- + ---------------------- + ------------- + ---------- + ------------ + | 5 | CcDEe | 13,69 | CDE / CDE | 12,24 || | | | CDE / CDE | 0,01 || | | | CDE / CDE | 0,97 || | | | CDE / CDE | 0,27 || | | | CDE / CDE | 0,19 || | | | CDE / CDE | 0006 | + ----- + ---------------------- + ------------- + ---------- + ------------ + | 6 | CwcDEe | 1.23 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 7 | ccDEe | 11.82 | CDE / CDE | 10.04 || | | | CDE / CDE | 0,72 || | | | CDE / CDE | 0,06 | + ----- + ---------------------- + ------------ - + ---------- + ------------ + | 8 | ccDEE | 2,49 | CDE / CDE | 2,16 || | | | CDE / CDE | 0,33 | + ----- + ---------------------- + ------------ - + ---------- + ------------ + | 9 | CcDee | 31,93 | CDE / CDE | 29,90 || | | | CDE / CDE | 1,98 || | | | CDE / CDE | 0,05 | + ----- + ---------------------- + ------------- + - -------- + ------------ + | 10 | CwcDee | 2,38 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 11 | CCDee | 16.81 | CDE / CDE | 16,01 || | | | CDE / CDE | 0,80 | + ----- + ---------------------- + ------------- + - -------- + ------------ + | 12 | CwCDee | 2,60 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 13 | CwCwDe | 0,00 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 14 | ccDee | 2,21 | SDE / CDE | 2,10 || | | | CDE / CDE | 0,11 | + ----- + ---------------------- + ------------- + - -------- + ------------ + | Rh-negativna | + ----- + ---------------------- + ------------- + - -------- + ------------ + | 15 | ccddee | 12.71 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 16 | Ccddee | 1,54 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 17 | CCddee | 0,03 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 18 | Cwcddee | 0035 | Cwde / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 19 | ccddEe | 0070 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 20 | CcddEe | 0,35 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 21-28 | CwCddee CwCwddee | | ||| | ccddEECcddEE | 0,00 | ||| | CCddEECCddEe | | ||| | CcddEeCwCddEe | | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + II. Splošne ugotovitve 1. Ugotavljanje Rh Rh prinadlezhnosti.Opredelenie dobav, ki jih oseba, ki ima posebno podgotovku.Opredelenie Rh prinadlezhnostiretsipientov proizvoditsyastandartnoy serum anti-D, zaradi česar je mogoče razdeliti, se ob Rh pozitivna (Rh +) in Rh-negativne (rh -). V nasprotju s prejemnikom opredelitev rhesus prinadlezhnostikrovi darovalca poteka v dveh fazah: prva kri donorovissleduetsya standardni serum anti-D, nato krvodajalci, ki je negativno reakcijo s serumom anti-D, preiskav uyutdopolnitelno standardnih serumov antirezus, soderzhaschimiantitela anti-C in anti-E. Anti-C in anti-E lahko vsyvorotke tako v čisti obliki ali v kombinaciji z antitelamianti-D, na primer anti-D + C, anti-D + E ali anti-D + C + E.V število Rh HBeAg negativnih donatorji je zaslužen le tistemu, čigar kri daje negativno reakcijo z vsemi serumi, tj. ne vsebuje nobene od treh antigenov Rhesus D, C, je potrebno E.Inogda takšne dodatne raziskave za izvedbo yu drugim - pri bolnikih s sumom izosensibilizatsiyu in uberemennyh zhenschin.Rezultat krvi Rh oprema donorovzapisyvaetsya v posebnih seznamih ali revije in knjige listedonorskogo revije (kartice) z datumom in oseb, ki izvajajo opredelenie.Rezultat določitev potrebščine krvi Rh bolnikov tudidrugih osebe, ki so zapisani v poseben register, in tvori sukazaniem itd podpisana ti in podpisan s strani stranke, ki je sprejeta odločitev. Etotblank prilepljena v zgodovini, poleg tega pa je rezultat prikazan v tej obliki zabeležili lečeči zdravnik pravomverhnem kota obraza stanja in zapečatena anamneze kaže egopodpisyu daty.2. sirotke dodatki računovodstvo Skupine antirezus.Syvorotki antirezusizgotavlivayutsyaobychnov oblika"univerzalna", Ie odvzeta protiteles anti-A in anti-filter-V.Takie seruma, primernih za določanje Rh prinadlezhnostikrovi katerokoli skupino ljudi AVO.Odnako sistema ali proizvedeni v serumu antirezus drug gruppposisteme ABO V teh primerih je treba opredeleniirezus skupina pripadnost šteje spetsifichnostsyvorotki. Serum antirezus G (I), ki spada opredelyaetsyarezus samo skupino O eritrocitov (I) - syvorotkoyantirezus skupine A (II) - samo v eritrocitih skupinah G (I) in A (II) -syvorotkoy antirezus skupine B (III) - le eritrociti skupine (I), (III) - v serumu antirezus skupino AB (IV) in spetsialnoprigotovlennoy "univerzalna" Rh-pripadnost opredeljujejo veritrotsitah skupino AB (IV) in druge skupine krovi.3. Nadzor issledovaniya.Pri vsaka študija ali izvedla vrsto issledovaniyneobhodimo preveriti specifičnost in dejavnost syvorotkiantirezus dal nadzor. Uporabljati nadzorne standartnyerezus-pozitivnih eritrocitov G (I) ali isto skupino kot preiskovanega chtoi krvi in ​​standardni Rh-negativnih eritrocitov eritrotsity.O standardne cm. "Navodila za jemanje in uchetukrovi pridobiti od dajalcev pri majhnih odmerkih za eritrocitov prigotovleniyastandartnyh"0,4. Lastnosti standardnih serumov za določanje serumskega antirezus.Standartnye Rh prinadlezhnostimogut vsebuje Rh protitelesa različne oblike - polni inepolnye (glej. "Navodila za protitelesa študija serumu nalichierezus"). Vsaka od teh protiteles delujejo le osobyhusloviyah tako naprej, ki so tehniko za določanje Rh prinadlezhnostizavisit Rh protitelesa standartnoysyvorotke.Metod Uporaba po vsakem od standardnega seruma antirezusukazyvaetsya spremnega instruktsii.III. Različne metode za določanje definicijo Rh Rh PRINADLEZhNOSTIMetod odvisna od dodatkov formyantitel standardnega seruma in način izgotovleniya.Pri vprašanje serum je antirezus pripisuje navodila kratkayasoprovoditelnaya opisujejo metodo za kotorogoprednaznachena te serije izdano syvorotki.1. Ugotavljanje Rh toaletni Reakcijsko conglutination sprimeneniem želatina vitro segrevali 46-48sh ersed) Posebno osnaschenie.Standartnaya antirezus seruma anti-D z delnimi antitelami.Standartnye Rh + eritrocitov in Rh za kontrolya.Tsentrifuzhnye ali druge cevi s kapaciteto 10 ml.Vodyanaya kopel 46-48sh C. Kemično zračno termostata 46-48sh C.10 raztopina% želatine. (Se želatina lahko shranjen z natrijevim konservantom- sulfatsilom (Albucidum) - hitrost 100 mg Albucidum s 10 ml 10% raztopine želatine) z .Lupa 2-4 krat uvelicheniem.b) predhodna obdelava testnega krvi in ​​standartnyheritrotsitov. Kri za študij je treba upoštevati kolichestve5-8 mililitrsko stekleničko brez stabilizatorja. Na nadpisatfamiliyu vitro, začetnice in krvne skupine osebe, od katere krov.Obychno sprejeta po strjevanju krvi na dnu števila cevi ostaetsyanebolshoe prostih rdečih krvnih celic, ki sleduetupotreblyat za raziskave. Če dovolj teh eritrocitov treba pretresti ločiti večje pregibi kolichestvaeritrotsitov.Dopustimo shranjevanje krvi za 2-3 dni pri + 4-8sh S.Mozhno vzeli kri s fiziološko raztopino ali drugo limonnokislogonatriya stabilizatorja (0,25 ml na 1 ml krvi) . V etomsluchae eritrociti treba oprati, pri čemer se za cevi dolitdoverhu izotonična NaCl, premešamo z vsebino svoje itsentrifugirovat. Otmytyeeritrotsityispolzovatdlyaissledovaniya.Neposredstvenno pred testiranjem krvi lahko jemljejo Izmest'ev zabode prst s stekleno paličico in takoj postavi v vnaprej vnesenega iz vprobirku seruma antirezus mešani szhelatinom 1: 2.c) določanje tehniko. Stanje določa dve ryadaprobirok s številom preiskanih vzorcev rdečih krvnih celic v vsaki vrstici cevi ipodve standardnih Rh-pozitivnih irezus-negativna števila rdečih krvnih celic. Za vsak dva priimka probirkahnadpisyvayut in inicialkami osebe, katerih krvni budetissledovatsya. Epruvete smo oštevilčeni. V istem oboznachennyeprobirki (v dveh vrstah) damo 1 kapljico (0,05 ml) issleduemyheritrotsitov in kontrolno - kapljica (0,05 ml) in Rh + standardno Rh eritrotsitov.Vo dodamo vse cevi prve vrste kapljico ( 0,05ml) v serumu antirezus.Vo vse cevi (v dveh vrstah) dodamo dve kapljici (0,1 ml), 10% raztopino želatine, predhodno segreje ne več razzhizheniya.Vtoroy krmili, da se prepreči vozmozhnogonespetsificheskogo skleivaniyaissleduemyh eritrocitov (pryamayazhelatinovaya vzorec) .Soderzhimoe mešamo cevke vrtinčimo IEM sprobirkami stojalo in ga damo v vodno kopel pri 46-48sh C 15 minut ali vsuhovozdushny termostat 25-30 minut.Pri pridobivanja cevi iz vodne kopeli ali termostatadolivayut njem 5-8 ml izotonične raztopine NaCl in peremeshivayutsoderzhimoe za 1-2-krat obračanjem probirok.g) interpretacijo rezultatov. Cevi so brskalnika na svetnevooruzhennym očesom ali skozi lupu.Rezultat zaradi prisotnosti ali odsotnosti Aglutinira agglyutinatsiieritrotsitov.Pri pozitiven rezultat, je težko razumeti, zaradi rdečih grudic na pregleden, skoraj beljene zhidkosti.Pri negativnega rezultata v epruveti ravnomernookrashennaya je vidnih v svetlo rdečo barvo razlagati, opalescentna zhidkost.Obraztsy eritrociti dvoma aglutinacijo s seruma anti-D, sta Rh-pozitivne (Rh +). Vzorci eritrocitov Ned aglutinacijo s seruma anti-D, - Rhesus negativni (Rh). Vendar pa rezultati upoštevajo, kot velja po proverkikontrolnyh vzorcev, ki potrjuje specifičnost in aktivnostsyvorotki antirezus, tj v odsotnosti aglutinacije sostandartnymi Rh-negativne eritrocitov istoimenski gruppyi prisotnosti aglutinacijo s standardnim Rh polozhitelnymieritrotsitami istoimenski skupina ali skupina O (I). V probirkahvtorogo (kontrola) številnih aglutinacije aglutinacije dolzhno.Nalichie v katerem koli od številnih nadzor cevi (zračna želatina vzorec pozitiven) označuje nespetsifichnostireaktsii. Pod temi pogoji, pozitiven rezultat z syvorotkoyantirezus ni mogoče šteti kot pravi. V takih sluchayahrekomenduetsya speremo eritrocitov raziskovali toplo izotonicheskimrastvorom NaCl za elucije od njih in povtoritissledovanie avtoprotitelesi. Prisomnitelnom rezultat opredeleniyarezus-pripomočkov, je treba uporabiti metodo aglutinacijo vsolevoy okolja z uporabo sera antirezus, soderzhaschihpolnye antitela.2. Ugotavljanje Rh dodatki, ki z standartnogouniversalnogo reagenta (v epruvete brez ogrevanja) .Spetsialnoe osnaschenie.standartny univerzalne reagenta antirezus - anti-D-33% -ne raztopine poliglyukina standardno Rh + eritrocitov in Rh za nadzor-epruvete ali drugih kapaciteto 10 ml lupe 2-4 krat uvelicheniem.Predvaritelnaya študija zdravljenje krvnega trebuetsya.Mozhet ne uporablja kri vzeta neposredno iz peredissledovaniem prsta na mestu injiciranja iosadok konzervirane krvi eritrocitov in vitro , Po tvorbi konvolucijo krvi, odvzetega brez stabilizatora.Dopustimo shranjevanje krvi za 2-3 dni pri 4-8sh S.Tehnika reakcijske stojalo dvižno dve vrsti cevi števila rdečih krvnih celic issleduemyhobraztsov v vsaki vrsti in dveh cevi dlyastandartnyh Rh-pozitivnih in Rh-negativne eritrotsitov.Na cevi vpisujejo ime in začetnice osebe, kri kotorogoissleduetsya.Vo vse cevi prve vrste dajemo 2 kapljici (0,1 ml) standardne univerzalne reagentom antirezus.Vo vse cevi drugega (kontrola) dajemo s številnimi 2 kapljic (0,1 ml) izotonične raztopine NaCl in 1 kapljica (0,05 ml), 33% raztopino poliglyukina.V vsak par identično označenih ceveh soglasnomarkirovke dajemo pripravek 1 kapljico (0,05 ml) krvi preučujejo. Epruvete za obvladovanje uvedena standartnyerezus pozitivnimi ali Rh-negativne eritrotsity.Soderzhimoe cevi in ​​mešamo z zatemmedlenno stresanjem vrti okoli osi zelo blizu gorizontalnogopolozheniya nagibanje, tako da je vsebina teče preko njenih sten. Takoerastekanie kri na stenah cevi prodira reakcijske boleevyrazhennoy. Značilno je, da aglutinacije pojavlja že techeniepervoy minuto, ampak da se tvori stabilen kompleksaantigen-protitelo reakcije in prepoznavna, pa tudi v viduvozmozhnosti zamedlennoyreaktsiiprislabovyrazhennoyagglyutinabelnosti eritrocitov, eritrocitov stiku z reagentompri struženje cevi 3 izvedemo vsaj 3 minute v min.Cherez cev dodamo 2- 3 ml izotonicheskogo0,85% raztopino NaCl in mešamo vsebina epruvete 2-3 kratnymperevertyvaniem ne brskanje vstryahivaya.Traktovka rezultatov.Probirki na svetlobni nevoor oko-adjoint ali cherezlupu. Rezultat je razlaga prisotnosti ali odsotnosti aglutinacije agglyutinatsiieritrotsitov.Pri na voljo v obliki velike kepe ali hlopeviz skleennyheritrotsitov v luči razsvetljenega zhidkostiissleduemuyu krvi velja Rh pozitiven (Rh +). Priotsutstvii aglutinacijo (vitro obdrži gomogennoeokrashivanie) preučevali krvnega treba upoštevati Rh-negativne (Rh) . Vendar pa je treba te rezultate treba obravnavati kot prave kontrolnih vzorcev preizkus tolkoposle, tj ko polozhitelnoyreaktsii sostandartnymirezus pozitivne rdečih krvnih celic, negativno - z Rh-negativna, in po prosmotrarezultatov v drugem nadzoru ryadu.Vo vse cevi 2. nadzor številnih aglutininov lahko nedolzhno.Nalichie aglutinacijo v epruveti nadzor ryadaukazyvaet nanespetsificheskoeskleivanieeritrotsitovi zato, ne dovoli, da se upošteva rezultate raziskav kakistinnyy.V tem primeru je priporočljivo, da opere raziskati eritrotsityteplym izotonično NaCl elucijo z n hautoantitel issledovanie.V in ponovite dvomljivosti, da določi Rh prinadlezhnostisleduet uporablja metodo aglutinacijskim v okolju soli, s polnim ispolzuyasyvorotku antitelami.3. Ugotavljanje Rh dodatki conglutination vsyvorotochnoy reakcijski medij v ravnini z podogrevom.Spetsialnoe Oprema: Standardna antirezus serum anti-D z delnim standardno protitelesa in Rh + eritrocitov nadzor RH - Plošča iz umetnega materiala na vodni kopeli 46-48sh S.Predvaritelnaya obdelavo krvi in ​​raziskali standartnyheritrotsitov.Krov za študij delo v količini 3-5 ml na obychnyeprobirki brez stabilizatorja. Na vitro vpišite ime, začetnice in krvno skupino osebe, od katere je bila sprejeta v krvi. Obychnoposle strjevanje krvi na dnu cevi ostane nebolshoekolichestvo rdečih krvnih celic, ki jih je treba uporabiti za te reaktsii.Esli zadostnega števila rdečih krvnih celic, je potrebno ločiti intenzivno vstryahnutsvertok več eritrotsitov.Eritrotsity uporabljeni za raziskave v obliki 5-10% suspenzija vsobstvennoy seruma. Suspenzijo pripravimo v oko nanese 1 bolshoykaple (0,1 ml) antirezus seruma v treh vrstah enaka probirkahputem stresanjem soderzhimogo.Dopustimo kri shranjenimi 2-3 dni pri 4-8sh S.Tehnika opredeleniya.Na plastičnem pladnju, v notaciji vodoravno Samo 6 točk (3 - ene serije serumov in 3 - druge). Krometogo, nanese na eno točko večji padec (0.1 ml) standartnoysyvorotki skupino AB (IV), ki ne vsebuje Rh protitelesa (kontrola nanespetsificheskuyu aglutinacijskim) .K prvo kapljico vsako serijo seruma dodamo eno kapljico (0,05 ml) suspenzije eritrocitov preiskovanega na drugi padec kazhdoyserii - 1 kapljica (0,05 ml) za uravnavanje rezus pozitivnega krvi bolnika z istim imenom ali skupino G (I) in treteykaple kazhdoyserii1kaplyu (0,05ml) kontrolnyhrezus-negativne eritrocite nujno z istim imenom gruppoykrovi pacienta ABO sistem. Kontrola kapljic syvorotkoygruppy AB (IV), ali ne vsebuje Rh protitelesa dodamo 1 kapljico (0,05 ml) preskusnega eritrocitov. Kapljice mešali steklyannoypalochkoy ploščo in potopimo v vodno kopel pri 46-48sh C brskanje 10minut.Traktovka rezultatov.Rezultaty študijah z rahlim pokachivaniiplastiny in razlagajo prisotnost ali odsotnost aglutinira agglyutinatsiieritrotsitov.Pri pozitiven rezultat, zlahka razlikovati napochti beljene ozadje zhidkosti.Pri negativen rezultat ostane kapljica ravnomernookrashennoy rdeče tsvet.Obraztsy eritrocitov dvoma aglutinacijo s seruma anti-D, sta Rh-pozitivne (Rh +). Vzorci policitemija Ne aglutinacijo s dala syvorotkoyanti-D, yavlyayutsyarezus negativni (Rh-). Vendar etirezultaty obravnavati kot velja samo takrat, ko naključje njihove obeihseriyah serumu antirezus in po preverjanju nadzor obraztsoveritrotsitov potrjuje specifičnost in aktivnosti syvorotkiantirezus, tj v odsotnosti aglutinacijo s eritrocitov standartnymirezus-negativne istoimenski skupini in nalichiiagglyutinatsii standardno Rhesus pozitiven eritrotsitamiodnoimennoy skupino ali skupino G (I), kot tudi v kontrolni otritsatelnomrezultate po kapljicah s skupino AB serumom (IV), nesoderzhaschey Rh protitelesa. Prisotnost aglutinacije v tem kaplegovorit za nespecifične vezave rdečih krvnih celic in zato pozitiven rezultat pri serum antirezus uchtenkak ne more biti res. V teh primerih, Rh pripadnost sleduetopredelyat z drugimi metodami issledovaniya.4. Ugotavljanje Rh v toaletnimi reaktsieyagglyutinatsii antirezus anti-D sol sredeSpetsialnoe osnaschenie.standartnye serumskih protiteles s polno standardno Rh + eritrocitov in Rh za nadzor cevjo višini 1,5-2,0 cm in s premerom 0,5-0,6 cm gladkimdnom zaobljeni ali plošče za imunološke reakcije suglubleniyami enako konfiguracijo in volumenska povečevalno s 2-4-kratno povečanje termostatom 37sh S.Predvaritelnaya obdelavo krvi in ​​preiskali za študij standartnyheritrotsitov.Krov uporabljajo v količini 0,5-1 ml na obychnyeprobirki, z dobil 0,25 ml (5 kapljic) izotonično natrijev rastvoralimonnokislogo ali drug stabilizator. Na probirkenadpisyvayut imena, začetnice in krvne skupine osebe iz kotorogovzyata krvi. Eritrocitov je treba oprati, ki je v probirkidolivayut robni izotonični NaCl, in vsebina ihperemeshivayut tsentrifugiruyut.Mozhno vzeli kri brez stabilizatorja. V tem primeru je v krvi običajno poslesvertyvaniya se in vitro a kolichestvosvobodnyh eritrocitov. Če to ni dovolj rdečih krvnih celic, sleduetintensivno tresenja sveženj za ločevanje več kolichestvaeritrotsitov. Tako dobljene eritrocitov speremo, kakskazano vyshe.Iz izperemo eritrocitov pripravimo 2% gošče na katerega 1kaplyu eritrotsitovperenosyat v oboznachennuyuprobirku katerih vsaka vsebuje 49 kapljic izotonično raztopino NaCl.2% eritrocitov suspenzijo za uporabo issledovaniya.Dopustimo shranjevanje krvi za 2-3 dni pri 4-8sh S.Tehnika opredeleniya.V stojalo dvižno dve vrsti cevi števila rdečih krvnih celic issleduemyhobraztsov v vsaki vrstici in dva - za kontroley.Predvaritelno stojalo prekrita z listom papirja. To slegkanakalyvayut odprtine, skozi katere in iz probirki.Protiv vsak par cevi vpisujejo na papirju iinitsialy ime osebe, katerih krvni bo issledovatsya.Vo vse cevi (dobro plošča) uvedemo pri prvi seriji 1kaple (0,05 ml) v serumu antirezus eni seriji, vse cevi (vrtin) v drugi vrsti - 1 kapljica (0,05 ml) v serumu antirezusdrugoy seriii vse cevi (vrtin) obeh vrstah 1 kapleizotonicheskogo raztopina NaCl.V vsakokrat določen par cevi (mikrotitrske plošče) dodamo kapljico (0 , 05 ml) v 2% weighi ispytuemyheritrotsitov ESI in nadzor - ena kapljica (0,05 ml) z 2% vzvesikontrolnyh (standard) Rh-pozitivni negativni irezus eritrotsitov.Soderzhimoe temeljito zmešamo z vrtinčenjem in postavljen na vtermostat 37sh C 1 uro. Lahko pa zapusti cev Nastola pri sobni temperaturi 1,5-2 ure pred takrat uchetarezultata.Za eritrocitov posedejo na dno, po stiku z serumu voydyav antirezus.Traktovka rezultatov.Probirki (tablete) je treba upoštevati glede na vir svetlobe vzdolžna osinad zaprta mat steklom.Rezultat razlagajo prisotnost ali odsotnost agglyutinatsiieritrotsitov, ki je izražena v drugačni obliki oborine na pozitivno dne.Pri Nastalo oborino eritrocitov raspolagaetsyana neenakomerno spodnji sloj. Vidno hrapavost, gobasto ilizernistost njeno strukturo. Robovi blata niso nikoli enake, ukrivljeni, včasih zavit v notranjosti. V nekaterih sluchayaheritrotsity razporejena kot obroba cigare-vžigalnik valovitega centralni chasti.Pri negativen rezultat eritrocitov Pelet raspolagaetsyaravnomernym plasti brez hrapavost in neravnine, včasih z majhno razdaljo srca. Njene meje so razmejene soboypravilno krug.Diametr oborine pri negativnem rezultatu vedno manjša, kot če polozhitelnom.Obraztsy eritrocitov dvoma aglutinacijo s serumom anti-D, sta Rh-pozitivne (Rh +), vzorci eritrocitov Ned aglutinacijo s seruma anti-D, - rhesus negativne (RH -). Vendar pa so rezultati štejejo kot velja na naključju njihovi serumskega antirezus vobeih serijo po preverjanju kontrolnyhobraztsov potrjuje specifičnost in aktivnosti syvorotkiantirezus, t.j. v odsotnosti aglutinacijo s eritrocitov standartnymirezus-negativne istoimenski skupini in nalichiiagglyutinatsii standardno Rhesus pozitiven eritrotsitamiodnoimennoy skupino ali skupine O (I) .Opomba. Cela protitelesa ne zaznajo šibko antigen Du.Povtornoe syvorotki.Posleopredeleniyarezus rabo dodatki iz vseh cevi obzirno otsasyvayutsyvorotku (rdeče krvne celice ostanejo na dnu) in ga prenesemo v probirku.Etu serumu se lahko ponovno uporabljene večkrat dlyaopredeleniya Rhesus zavarovanja, dokler se njegova aktivnost izčrpana, tj saj bo dala jasen aglutinacijo s standartnymirezus pozitivnih rdečih krvnih celic in negativno reakcijo - sostandartnymi Rh-negativne eritrotsitami.IV. SPLOŠNO PRIMECHANIYA1. Pri določanju dodatki Rh metodaopredeleniya ne glede na rezultat se zabeleži kot velja po vzorcih proverkikontrolnyh, potrjuje specifičnost in aktivnostkazhdoy serije antirezus serum, tj при отсутствии агглютинациисо стандартными резус-отрицательными эритроцитами одноименнойгруппы и наличии агглютинации со стандартными резус-положительнымиэритроцитами одноименной группы или группы О(I) и в другихконтрольных пробах, применяемых для каждого метода.2. Если при определении резус-принадлежности наблюдаетсяслабая или сомнительная реакция, то следует повторно исследоватькровь данного лица другими сериями сывороток антирезус и другимиметодами, включая метод агглютинации в солевой среде ссыворотками, содержащими полные антитела.Если при этом все серии сывороток, содержащих неполныеантитела, дадут также слабую или сомнительную реакцию, а с полнымиантителами реакция будет отрицательная, это значит, что эритроцитысодержат слабую разновидность антигена резус, так называемыйантиген Du, час тота которого около 1%. В этих случаяхрезус-принадлежность крови больного или беременной женщиныуказывают как резус-отрицательную (rh-), а резус-принадлежностькрови донора как резус-положительную (Rh+), не допуская такимобразом, переливания его крови резус-отрицательным реципиентам.V. ИССЛЕДОВАНИЕ ДРУГИХ АНТИГЕНОВ СИСТЕМЫ РЕЗУСПри использовании сывороток, содержащих антитела анти-С,анти-Е, анти-с, анти-е, анти-Сw в чистом виде, а также в сочетаниис анти-D, например D+C- D+E- D+C+E, применяются те же методы, чтои при использовании сыворотки антирезус анти-D. При этомучитывается форма антител.В качестве контролей используют эритроциты, содержащие и несодержащие соответствующий антиген."Navodila za določanje Rh prinadlezhnostikrovi", Odobreno s strani ZSSR Ministrstvo za zdravje septembra 7 1990goda N 05-14 / 29, se šteje za nično, od trenutka, ko utverzhdeniyadannoy instruktsii.Nachalnik Upravleniyaorganizatsii meditsinskoypomoschi naseleniyuMinzdrava RFA.I.VYaLKOVPrilozhenie N 8UTVERZhDENOPrikaz Rossiiot Ministrstvo za zdravje 09.01.1998, N 2INSTRUKTSIYAPO DOLOČITEV Rh OPREMA Kroviniu ravnini brez OGREVANJE in na IZGOTOVLENIYUSTANDARTNOY serumu in reagenti ANTIREZUS namenjena za to TsELIObschie svedeniyaMetody določanje Rh dobave na letalo bezpodogreva OAPC na olyayut hitro izvajanje raziskav brez primeneniyaosobogo laboratorijske opreme neposredno od postelibolnogo in donatorji, tako v posameznih primerih in primassovyh obsledovaniyah.Metody syvorotokantirezus na podlagi uporabe v povezavi z koloidnih raztopin (albumin, polyglukin), v prisotnosti katere je nepopolna Rh antitelapriobretayut sposobnost agglyutinirovatrezus polozhitelnyeeritrotsity ravnine pri sobni temperaturi, analogichnoreaktsii določiti krvno skupino AVO.Naibole E primeren za prakso so metode za določanje naploskosti uporabo nesegrete serumu antirezus narejene v povezavi z albumin in uporabo reaktivaantirezus narejene iz seruma v kombinaciji antirezus ssuhim polyglucin in albuminom.1. Ugotavljanje Rh dodatki na ploskostibez ogrevanje uporabljajo v serumu antirezus pripravljene z albumin (priložen pri izdajanju serum) pa ima: a) posebej pripravljen univerzalni serumski antirezusanti-R, skupaj z kontrolnega seruma, b) bela plošča S na površino v stiku z medijem) izotonična NaCl-g) študije stekla palochki.Dlya uporabljajo krvi, dobljenega iz prsta neposredstvennoiz prosto ali prej sprejeti v cevi pomožnih stabilizatorjev, vendar ne več kot 2 dni skladiščenja v 4-8sh S.Tehn ika reaktsii.Na ime tablica zapisal in začetnice osebe, krovkotorogo raziskati, in s tem ustrezen zapis se uporablja, da ga v dveh točkah: z leve strani z 2 kapljici seruma antirezus popraviti 2 kapljici kontrolne serume. Poleg teh kaplyaminanosyat 1 kapljico krvi preučujejo. Kri ssyvorotkoy temeljito zmešamo s stekleno paličico in brisa na ploščo dopolucheniya tankem sloju. Nato plošča pretresli periodično vtechenie 4-5 minut in dodamo k mešanici obeh 1 kapleizotonicheskogo raztopino NaCl za odstranjevanje čim nespetsificheskoyagglyutinatsii. Spremljanje napredka reakcije se nadaljuje, dokler istecheniya5 minut, nato upošteva rezultat.Traktovka rezultata.Esli levo, tj serumu antirezus, proizoshlaagglyutinatsiya rdečih krvnih celic, in na desni strani (nadzor) ni - krovostaetsya enakomerno obarvana, brez znakov aglutinacije etoznachit da testirali kri Rh pozitiven (Rh +) Če se dve kapljici aglutinacije odsoten, to pomeni chtoissleduemaya krvi Rh-negativnih (RH -) .. v prisotnosti aglutinacije pri padcu kontrolnega mozhetproizoyti v nekatere bolezni, nap Emer, zaschetautoantitel treba raziskati ponovno drugimimetodami kri, po možnosti v laboratorijskem usloviyah.2. Ugotavljanje Rh dodatki v pomoschireaktiva antirezus narejenih s ispolzovaniemsuhogo poliglyukina (vezan na dostavno reagenta) pa ima: a) posebej pripravljen reagent antirezus anti-D vkomplekte s kontrolnim reagentom, b) bela plošča z navlaženem površino, c) izotonična raztopina NaCl-g) študije stekla palochki.Dlya uporabljajo krvi, dobljenega iz prsta neposredstvennoiz prosto ali prej sprejeti v cev costabilizers največ 2 dni pred študijo. Krovhranyat na 4-8sh S.Tehnika reaktsii.Na ploščo vpišite ime in začetnice osebe, krovkotorogo raziskati, in s tem ustrezen zapis, ki se uporabljajo za njeno levo 1 kapljico reagenta antirezus in desno - 1 kaplyukontrolnogo reagenta se nato doda reagenta in antirezus in kkontrolnomu reagenta 1 kapljico debel brozgo krovi.Krov raziskali temeljito pomešali z reagentom in brisa poplastinke stekleno paličico tankem sloju. Potem plastinkuperiodicheski stresamo 3-4 minut in dodamo k obesmesi za preprečevanje nespecifične aglutinacijo 5-8 kapelizotonicheskogo NaCl.Nablyudenie raztopine reakcijo nadaljujemo, dokler 5 minut po katerem menijo rezultat.Traktovka rezultata.Esli levo, t.j. reagent antirezus, proizoshlaagglyutinatsiya rdečih krvnih celic, in na desni strani (pri nadzoru), pa ni - etoznachit, ki so raziskovali krvi Rh-pozitiven (Rh +) Če se dve kapljici seruma odsoten, to pomeni, chtoissleduemaya krvi Rh-negativna (od Rh -). o. Nako rezultat šteje kot velja samo, če otsutstviiagglyutinatsii kontrole.Pri v prisotnosti aglutinacije pri nadzoru da prinekotoryh lahko pojavijo bolezni, npr zaradi avtoprotiteles krovneobhodimo reassayed druge metode, je zaželeno vlaboratornyh usloviyah.3. Universal predelovalnih antirezus seruma anti-Dv kombinaciji z albumina za določitev Rh prinadlezhnostina ravnino brez podogrevaSyvorotka antirezus vsebuje nepopolne protitelesa proti D.Vypuskaetsya, skupaj z kontrolnega seruma, ne soderzhascheyrezus protitelesa. Serum namenjen D.Materialom opredeleniyarezus antigena za izdelavo sirotke antirezus kombiniranega salbuminom služi skupino humani serumski AB (IV) pripravimo ilispetsialno - Univerzalna s titrom protiteles anti-D nepolnyhrezus ni nižja od 1:64 - 1: 128 v posrednem Coombs .Syvorotka treba predhodno raziskati in priznanagodnoy kot standardni serum antirezus v skladu z"Navodila za izdelavo standardnih serumov in reagentaantirezus".Materialom za izdelavo sluzhitsyvorotka človeškega kontrolni krvni serum skupino AB (IV), t.j. kakrezus ne vsebuje protitelesa in aglutinini skupine alfa in beta.Kontrolnaya serum mora izpolnjevati zahteve standarda izogemagglyutiniruyuschim syvorotkamsistemy AVO.Pri proizvodnjo serumov antirezus albuminomneobhodimy v kombinaciji z: - 20-30% raztopine albumina, pridobljenega iz plazme krovicheloveka-- vzorci rezus pozitivna in Rh-negativne krvi vzame geparine-- geparin-- izotonična NaCl.Rabotu izdelavo seruma spodboraoptimalnogo začeti razmerje in serum tirezus in albumin. Podbormozhno opravi na dva načina: a) Z uporabo istega serumskega antirezus, testiranje z vzorci neyraznye (serija) albumin in s čimer izberemo obrazetsalbumina visoko konglyutinatsionnoy aktivnosti-b) z uporabo enega in istega vzorca (serija) albumin, je testiranje z različnih vzorcih seruma albumina antirezus.Vybor visoko konglyutinatsionnoy aktivnostyu.Syvorotku antirezus nepopolnih protitelesa s titrom 1:64 - 1: 128razvodyat v ceveh 2-4 krat ločeno z različnimi obraztsamirastvora albumina.Raznye zmesi s serumsko antirezus albumina naplastinke testirali z vzorci 5-6 (RH +) z vzorci 5-6 krvi ccddee, atakzhe krvi Ccddee fenotip in ccddEe.Syvorotku antirezus zmešamo s albumina smo prenesli v 2tochki 2 kapljicah (0.1 ml) na ploščo, dodamo na 1 kapljico (0,05 ml) in Rh pozitivnim Rh-negativne krvi. Kapliperemeshivayut in bris na plošči, da dobimo tanko vodstvo sloya.Nablyudenie do 5 minut pod tresenje plastinki.Uchet in ocenjevanja rezultata.Rezultat upoštevati stopnjo nastopom in velichineagglyutinatov Rh polozhitelnyheritrotsitoviotsutstviiagglyutinatsii z Rh-negativnih eritrocitov. Na osnovaniietogo vzorcev albumina se uporabljajo sprejete kasneje najbolj prigodnyedlyaispolzovaniya.Dlya vzorci albumin, ki, kadar se preskuša aglutinacijskim Rhesus pozitiven eritrotsitovpoyavlyaetsya v prvih 20-30 sekundah in nespetsificheskayaaggregatsiya Rh otritsatelnyheritrotsitovotsutstvuetdoistecheniya 10 minut.Podbor serumu antirezus visoko konglyutinatsionnoyaktivnostyu sredeNeskolko albumina v različnih vzorcih Serum antirezus nanosyatotdelno 2 točki in 1 kapljica (0,05 ml) na ploščo in bavlyayut knim kapljicah (0,05 ml), 20-30% albumina.Syvorotku temeljito zmešamo s albumin in Napili dodamo 1 kapljico (0,05 ml) in Rh pozitiven Rhesus otritsatelnoykrovi. Kapljice mešamo z eritrociti v ravnini polucheniyatonkogo plast. Opazovanje se nadaljuje, dokler 5 minut pri pokachivaniiplastinki.Tak delujejo ločeno za vsako testno obraztsasyvorotki, testiranje vzorcev z 5-6 Rh + krvi in ​​5-6obraztsami ccddee ter vrednotenje krvi in ​​ccddEe.Uchet Scddee fenotip in omogočajo hitrosti rezultata.Rezultat in eevyrazhennosti pojav aglutinacijo s Rh-pozitivnih eritrocitov in otsutstviyus Rh negativne rdečih krvnih celic in rdečih krvnih celic ccddee genotipaCcddee ccddEe.Dlya in nato izberemo antirezusanti-D serumov, ki se preskuša ki so jasno izraženo kot agglyutinatsiyarezus-pozitivnih eritrocitov pojavi v prvem 20-30sekund, anespetsificheskayaagglyutinatsiya otritsatelnyheritrotsitov in Rh Ccddee fenotipom eritrocitov in ccddEe odsoten doistecheniya 10 minut.Podbor optimalnogosootnosheniya serumu antirezus ialbumina.Posle izbira albumin najvišjo konglyutiniruyuscheysposobnostyu ali obratno, serumi izbor antirezus vysokoyagglyutiniruyuschey aktivnost v abluminal mediju, ustanoviti kpodboru optimalno razmerje, ki: v omaro nastavljeno 5 Prony erovannyh cevi v prvo cev za izdelavo 2 kapljici (0,1 ml) seriialbumina izberemo drugega Tube - 4 kapljice, tretji - 6, v chetvertuyu- 8 in pete - 10 kapljic, za vsako cev dodamo 2 kapljici (0 smo 1 ml) syvorotkiantirezus in vsebino temeljito premeša, iz vsake epruvete prenesli v 2 točke 1 kapljica (0,05 ml) naplastinku, s čimer se tvori dve vrsti serumskega albumina vseh kapljic 1. vrstica Znamka 1 kapljico (0 , 05 ml) svezheyrezus pozitivne krvi v 2. seriji - Rh-negativne krvi (krvi, odvzetega s heparinom pred - 1 kapljico na 10 ml krvi) Zmes mešamo in 3 minute in ocena pripokachivanii plastinki.Uchet rezultatov.Chetkaya aglutinacijo Rh + eritrocitov in odsotnost agglyutinatsiirh- eritrocitov in eritrociti ccddee Ccddee fenotip in ccddEeukazyvaet o optimalnem razmerju vzorca in syvorotkiantirezus albumina.Prigotovlenie razsutem stanju niso opazili (serije) antirezusanti seruma D v kombinaciji s pripravo celotni volumen albuminomDlya (serija) standardna syvorotkiispolzuyut vybrannyeoptimalnyesootnosheniya ialbumina serumu. In serumski albumin in uporaba iste serije, kotoryeprimenyalis za določitev njihove optimalne sootnosheniya.K glede na celotno zmes prostornine sirotke albuminomdobavlyayut heparina temelji izdelan - 1 kapljico na 20 ml syvorotki.Prigotovlennuyu tako testiran za vzorce seruma plastinkahs 5-6 Rh-pozitivnih eritrocitov in 5-6 obraztsamirezus negativni ccddee, kot tudi rdečih krvnih celic fenotip Scddeei ccddEe.Pri ne razlikuje aglutinacije srezus pozitivne krvi, ki prihajajo v 30-40 sekundah, iotritsatelnoy Reakcijsko z Rh negativne krvi in ​​krovyufenotipa ccddee Ccddee in ccddEe, serumski antirezus kombinirana salbuminom ocene primerni kot standardni syvorotkianti-D za določitev Rh dodatki na je ravnina izvedemo z istočasnim bezpodogreva.Issledovanie kontrolno parallelnymispolzovaniem syvorotki.Izgotovlenie nadzor syvorotki.Dlya proizvodni nadzor Serum Serum ispolzuyutizogemagglyutiniruyuschuyu skupino AB (IV) in dodamo k enakim vzorcem neyalbumin (serije) in v isti količini in vsootnoshenii, koto rž bili uporabljeni za pripravo seruma dannoyserii antirezus.Kontrolnuyu serum testiran na enak način kot pri opisanovyshe antirezus seruma. Kontrolni serumi ni aglutinira dolzhnavyzyvat eritrotsitov.Konservirovanie syvorotki.Syvorotku stopnji konserviruyutbornoy kisline antirezus in kontrola seruma 2 g na 100 ml seruma in potrjevanje syvorotki.Rozliv antirezus ikontrolnoy syvorotkiSyvorotku antirezus vlije v 2,1 ml ampul, kotoryezapaivayut ali fiole, ki so tesno zaprte rezinovymiprobkami. Na ampule, fiole lepljena nalepk z ukazaniemuchrezhdeniya, proizvajajo sirotka, sirotka specifičnost metode za katerega je namenjen, količino, obdobje od sob seriii godnosti.Kontrolnuyu seruma dani pacientu v enakih količinah in v zhekolichestve ampulah (vial) in tudi samolepilna etiketa . Nomerserii kontrolnih serumov ponavlja osnovnoysyvorotki antirezus.Hranenie serijsko številko, veljavnost in kontrol.Syvorotki antirezus potekajo v povezavi s albumina ikontrolnye seruma skladiščili pri 4-8sh S.Srok pasu - 4 mesyatsa.Po datumom izteka, vendar ob ohranitvi aktivnosti serumskih ispetsifichnosti , se rok trajanja se lahko podaljša še za eno 1mesyats.Vydacha serum antirezus.Syvorotka antirezus izdal skupaj z kontrolnoysyvorotkoy.K vsak komplet prihaja z navodili za uporabo. + ------------------- ------ + + ------------------------- + | Ime izvajalska agencija | | Ime izvajalska agencija || proizvajalec | | Proizvajalec | + ------------------------- + + -------------------- ----- + | Serumu antirezus-D | | Control Serum || za metodo ravnini | | pri metodi na ravnino || neogrevana | | neogrevana || Za vse krvne skupine | | Za vse krvne skupine || ABO sistem | | ABO sistem || Serija ______ ______ ml | | Serija ml ______ ______ || Uporabno za __________ | | Uporabno za __________ | + ------------------------- + + ------------------ ------- + nalepke oblika za serumski antirezus in kontrolnoysyvorotki.4. Proizvodnja reagenta s antirezus ispolzovaniemsuhogo poliglyukina za določitev Rh prinadlezhnostina ravnino brez podogrevaReaktiv ki obsega aktivne protiteles antirezus nepopoln anti-D, viskozna motna raztopina motna. Prihranenii oborino lahko pade. Na voljo popolna skontrolnym reagenta ne vsebuje Rh antitel.Materialom za pripravo reagenta antirezus nativnyesyvorotki so humani krvno skupino AB (IV) ali s posebej prigotovlennye- univerzalne titra nepopolnih protiteles Rh ni nižja od 1:64 -1: 128 vnepryamoyprobe Coombs. Serum bytpredvaritelno treba preiskati in velja standartnayasyvorotka antirezus.Materialom za izdelavo sluzhitsyvorotka človeškega kontrolni krvni serum skupino AB (IV), t.j. ki ne vsebujejo kakrezus protitelesa in skupino protitelesa alfa in beta. Kontrolnayasyvorotka morajo izpolnjevati zahteve kstandartnym izogemagglyutiniruyuschim serumi AVO.Pri izdelavo antirezus reagentnega sistema potrebno: - polyglukin posušimo Lyophilic sposobom-- albumina, 2.5% izotonično raztopino rastvor-- NaCl-- vzorci Rhesus pozitiven in Rh-negativne krvi. Opombe: 1. Poliglyukin sušimo pri sublimatsionnomapparate postopku liofilizacije skladu s predpisi, ki za plazemsko sušenjem. Sushkuvedut vial kapaciteta ml.2 250-500. 2,5% raztopina albumina dobimo iz končnega 10% -20% raztopine albumina z razredčenjem izotonično rastvoromNaCl.Izgotovlenie antirezus.Syvorotku reagent, ki vsebuje protitelesa anti-D s titer ni nižja chem1: 64-1: 128 *> prenesli v stekleničko z vnaprej vysushennympoliglyukinom v količini, ki je enaka količini tekočine poliglyukina posušimo v viali. Kot rezultat, končni 6% kontsentratsiyapoliglyukina .--------------------------------- *> - Opomba: Serum antirezus višja titrommozhno razredči na to vrednost serumskega skupino AB (IV), ali standard razvoditelem 2,5% raztopina albuminavizotonicheskom viala NaCl.Soderzhimoe raztopina s popolno raztapljanje praška vstryahivaniyado poliglyukina.Izgotovlenie nadzor reaktiva.Dlya proizvodni nadzor temeljito pomešamo v drugi reagentom, zheflakon s posušimo polyglucin iste serije dobavlyayutstandartny razvoditel ali 2,5% raztopine albumina v istem volumnu doiskhodnogo poliglyukina. Vsebino temeljito zmešamo raztopi prašek dopolnjen poliglyukina.Issledovanie kakovosti proizvaja reaktivov.Issledovanie reagente dobimo neposredno po ihizgotovleniya srezus-polozhitelnymii Rh otritsatelnymieritrotsitami in ovrednotijo ​​za aglutinacijo in spetsifichnostireaktsii narave: a ploščo postavljen v dveh vrstah, levo - dve kapljici (0,1 ml) antirezus reagenta in desno - kontrolnogoreaktiva-v prvi vrsti dodamo kapljico (0,05ml) dve kapljici (0,1 ml) Rh-pozitivnih eritrocitov v drugi vrsti tudi Rh na odnoykaple otritsatelnyheritrotsitov.Soderzhimoe kapelperemeshivayut potem razmaže dokler tanko plastjo iostavlyayut tri minute periodično premikanjem ploščatim tri minute Vse 5-6 dodamo kapljico kapelizotonicheskogo raztopino NaCl, mešamo in dva minutyuchityvayut rezultat.Reaktivy niso preizkušene meneechems20obraztsamirezus- is30 pozitivni vzorci rezus otritsatelnyheritrotsitov skupine A (II), ab (IV) in B (III), in tudi eritrotsityCcddee ssddEe.Uchet in ocenjevanje rezultatov.Rezultat upoštevati hitrostnega tekalne plasti Nia in eevyrazhennosti aglutinacijo z Rh-pozitivnih rdečih krvnih celic in odsotnosti EGS Rh-negativnih rdečih krvnih celic (ccddee) in eritrotsitamifenotipa Ccddee in rccddEe.Pokazatelem reagenta primernosti za posleduyuschegoispolzovaniya je prisotnost grobih agglyutinatsiirezus-pozitivnih rdečih krvničk v višini nastopa za 1 minuto in njena odsotnost z Rh-negativnih rdečih krvnih celic (ccddee) in rdeče krvničke fenotip CcddEe ssddEe.Kontrolny reagent in raziskali enaka kot je opisano zgoraj dlyareagenta antirezus. Aglutinacijo kontrolnim reagentom dolzhnaotsutstvovat vseh osebkov eritrotsitov.Konservirovanie reaktivov.Reaktiv antirezus in ohranjanje reagent bornoykislotoy nadzoruje stopnjo 2 g na 100 ml reagenta.Rozliv pasportizatsiya.Reagent antirezus in zlijemo v fiole ali ampule. Ampulyzapaivayut, viale tesno zaprti z gumijastim zamaškom izavaltsovyvayut parafiniruyut.Na ali ampule, fiole samolepilna etiketa z navedbo nosilca pripravi reagenta specifičnost reagenta, metode za kotorogoon namenjena količino, serijsko številko in rok godnosti.Kontrolny reagenta steče v enakih količinah in v zhekolichestve ampul (vial), in tudi prilepite besedilne oznake z ustrezno mizo. Nadzor reaktivapovtoryaet serijsko številko zaporedno številko glavnega reagenta antirezus. + ------------------------- + ------------ + ------------- + | Ime izvajalska agencija | | Ime izvajalska agencija || proizvajalec | | Proizvajalec | + ------------------------- + + -------------------- ----- + | Reagentov antirezus-D | | Nadzor reagenta || za metodo ravnini | | pri metodi na ravnino || neogrevana | | neogrevana || Serija ______ ______ ml | | Serija ml ______ ______ || Najboljša pred __________ | | Najboljša pred __________ | + ------------------------- + + ------------------ + ------- skladiščenja, rok trajanja in kontrol.Reaktiv antirezus pripravimo s suhim polyglucin ikontrolny 4-8sh reagenta shranjeni pri 4 ° C rokom uporabnosti mesyatsa.Reaktiv antirezus in krmiljenje preverjanje naaktivnost reagenta in reagent specifičnost za hrbet mesyats.Vydacha antirezus.Reaktiv antirezus izdala, skupaj z kontrolnymreaktivom.K vsak komplet (ali niz sklopov) pridaetsyainstruktsiya za uporabo."Navodila za določitev krvnega naploskosti Rh pripada neogrevana in za pripravo standardnega seruma ireaktiva antirezus namenjenega za ta namen", UtverzhdennuyuMinisterstvom zdravje ZSSR 6. december 1990 N05-14 / 38-14 se šteje za brezpredmetno od sprejetja dannoyinstruktsii.Nachalnik Upravleniyaorganizatsii meditsinskoypomoschi naseleniyuMinzdrava RFA.I.VYaLKOVPrilozhenie N 9UTVERZhDENOPrikaz Rossiiot Ministrstvo za zdravje 09.01.1998, N 2INSTRUKTSIYA *>UPORABA ANTI-Colyclons DDIAGNOSTICHESKOGO TEKOČE SISTEM ZA antigenskih OPREDELENIYAD Rh (monoklonskimi protitelesi anti-D) 9398-215-27575295-95 TU) 1. NaznachenieTsoliklon anti-D je zasnovan za odkrivanje D antigenskih sistemyrezus v človeških eritrocitih in se uporablja v seroloških testahvzamen ali vzporedno z anti-D izoimunske syvorotkoy.Poryadok o RH-krvne definirano dodatki"Navodilo o opredeleniyurezus-prinadlezhnostikrovi"Odobreno s strani Ministrstva za zdravje Ruske federacije v letu 1997, in smernice za kri-opredeleniyurezus odobril dodatki hematologijo raziskovalno središče aprila 27 1994goda .-------------------------- ------ *> - Navodila profesorja I.L.Chertkov, direktorTOO Prevedene "Hematolog" G.Yu.Miterev, raziskovalci L.N.Lemeneva, N.I.Olovnikova, E.V.Belkina.2. Značilnosti in osnovne lastnosti Colyclons anti-DDeystvuyuschim začnejo Colyclons anti-D so monoklonalnyeanti-D protitelesa proizvedena limfoblastoianoy kletokcheloveka linija izvedena iz limfocitov darovalca, hiperimunih proti Dantigena. Protitelesa, ki jih celice klona yavlyayutsyamonoklonalnymi spadata v isti razred imunoglobulinov, so enaki strukturi in biološki celične linije aktivnosti.Poskolku izločujoče monoklonsko anti-Dantitela, limfociti, dobljeni iz zdravega donorja, isklyuchenakontaminatsiya reagenta patogeni virusi (hepatitis, AIDS in druge. ) vzorce krvi .Vendar mora delovati perchatkahvo preprečevanje okužbe s patogenimi virusi prenašajo cherezkrov.Tsoliklon anti-D predstavlja ner zbavlennuyuilirazvedennuyu slanico kulturna tekočina s celicami, ki proizvajajo protitelesa napravo. Anti-Dmonoklonalnye protitelesa pripadajo imunoglobulin razreda G (IgGl). Colyclons anti-D protitelesa ne vsebuje ipoetomu različni specifičnost lahko uporabimo za odkrivanje antigen D veritrotsitah koli filter krovi.Anti-D protitelesa, ki spada v imunoglobulina razred G (nepopolnih protitelesa) ne povzročajo neposrednega aglutinacijo eritrocitov, ki vsebujejo D antigen, in lahko reaktsiikonglyutinatsii uporabljati želatino, posredno antiglobulinski preskus (probeKumbsa) vreaktsii eritrocitov aglutinacijo, obrabotannyhproteoliticheskimi encime, vključno z vrsto avtomatizirovannyhsistemah "Gruppomatik"0,3. Tehnika določanje sistem rezusOpredelenie D-D-antigen nativne krvnega antigenaproizvoditsya stabilizirani preko konservantov- uporablja v krvi, odvzetega brez konservanta- v krvi, odvzetega iz prsta. Večina chetkayareaktsiya aglutinacijo opazili vysokoykontsentratsii eritrocitov. Sklep o prisotnosti D-antigena vissleduemyh eritrocite storiti s prisotnostjo pozitivno reaktsiiagglyutinatsii.3.1. Preskus Posredno antiglobulinski (indirektni Coombsov test) so najbolj občutljiva metoda za detekcijo D antigena.Vzves (2-3%) v slanici trizhdyotmytyhissleduemyh eritrocite damo v okrogli cevi (0,1 mlvzvesi eritrocitov) ali 96-naredil okrogle plošče ((0,05ml / vdolbino) smo dodali enak volumen Colyclons vtechenie in inkubirali 45-60 minut pri 37sh C. Nato po enkratnem otmyvaniyafiziologicheskim raztopine, da se obori eritrociti 0,05-0,1ml antiglobulinski dodamo seruma, skrbno zmešali in takoj če 15-30-minutni inkubaciji pri sobni temperaturetsentrifugiruyut pri 200 g 15-20 sekund. Oborino myagkovzveshivayut in prisotnost aglutinira, vyyavlyaemyhmakro- ilimikroskopicheski, sklepanje o prisotnosti D vissleduemyh eritrotsitah.3.2 antigen. conglutination z zhelatinomV aglutinacije reakcijsko cev izdelavo ene padec (0,05-0,1 ml) smo brez eritrocitov strjene strdek kroviilieritrotsitov oprana brez zaščitnega sredstva. dodamo dve kapljici (0,1-0,2 ml) 10% -ne raztopine želatine, segreti na utekočinjenim pri45-50sh C La in eno kapljico Colyclons anti-D. Suspenziyutschatelno mešali in inkubirali 10-15 minut v vodni kopeli ili30 minutami v termostatu pri 48sh C dodamo 5-6 mlfiziologicheskogo raztopino in po rahlem perevorachivaniyaprobirki vizualno določanje prisotnosti aglutinira. aglutinacije 
Zdieľať na sociálnych sieťach: 

 
Príbuzný