GuruHealthInfo.com

Medicinsko pravo: pravo, dokumente, odgovornosti, pravila, akti.

zdravstvena zakonodaja


Moskva, Zvezni center za sanitarne inšpekcije ministrstva za zdravje Rusije, 1999UtverzhdayuGlavny gosudarstvennyysanitarny vrachRossiyskoy FederatsiiG.G.ONISchENKO23 oktober 1999 godaData uvod v januarju 2000 goda4.1 -1. METODE nadzora. CHEMICAL FAKTORYOPREDELENIE MASS KONTSENTRATSIIMIKOTOKSINOV v prehranskih surovin in PRODUKTAHPITANIYA. Priprava vzorcev METODOMTVERDOFAZNOY EKSTRAKTSIIMETODICHESKIE UKAZANIYAMUK 4.1.787-991. Razvila zveznega centra za državne sanitarni in epidemiološki MinzdravaRossii (VB Skachkov, IV Bragin, Queen NV) in CJSC"BioKhimMak CT" (Vodilni raziskovalec Vasiyarov GG, GS starshiynauchny zaposleni Alexeev, višji raziskovalec OsokinD.M., Doktor kemijskih znanosti Staroverov SM.). 2. Odobreni in uveljavijo gosudarstvennymsanitarnym glavni zdravnik Ruske federacije 23. oktobra 1999 D.3. Vpervye.1 predstavil. Namen in področje primeneniyaNastoyaschie Metodicheskieukazaniyaustanavlivayutsposobypodgotovki vzorcev hrane surovin in hrane produktovmetodom ekstrakcijo v trdni fazi posleduyuschegohromatograficheskogo za mikotoksinov analize in varnostne študije so dlyaprovedeniyalaboratornyh pischevoyproduktsii gossanepidsluzhby institucij Ruske federacije, kakor tudi dlyapredpriyaty in ustanove, ki opravljajo nadzor kakovosti iissledovaniya živilskih surovin in živil za skladnost z SanPiN 2.3.2.560-96 "higienske zahteve in varnost hrane surovin in pischevyhproduktov Kkachestvu" in akreditirani v skladu z ustaljeno poryadke.2. Postopek priprave probPodgotovka vzorcev vsebuje naslednje dele: - ekstrakcija preskušani predmet zagotavljanje poluchenieedinogo ekstrakt, ki vsebuje ves mikotoksinov normalizirano vdannom predmet SanPin 2.3.2.560-96-- ekstrakta priprave vzorca, ki ga trdni fazi ekstrakcije vklyuchayuschayapredvaritelnuyuochistku, kontsentrirovanieiokonchatelnuyu čiščenjem s koncentriranjem kartuše Diapak.3 . Zahteve bezopasnostiPri reagenti, topila in veschestvamineobhodimo izpolnjujejo varnostne zahteve dlyaraboty strupene, korozivne in vnetljivih snovi POGOST 12.1.005-88.4. Pogoji priprave probProtsessy opravljajo pripravo in obdelavo vzorcev raztopino izvedemo vnormalnyh pogojih pri temperaturi okolja 18 - 22grad. C.5. Aflatoksina B1 (AP-B1), zearalenona (ZON), deoksinivalenola (DON) in T-2 toksina (T-2) 5,1. Oprema, materiali, reaktivyTablitsa 1 + ------------------------------------ + ------ --- + --------- + --- + --- + | Oprema, materiali, reagenti | AT-B1 | ZON | DON | 2 || T in raztopine + ---- + ---- + ---- + ---- + | ||| 1 | 2 | 1 | 2 | | ||| var |. Var |. Var |. Var. | | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | vzorci tipa shaker | + || AVU-6C TU 64-1-2451-78 ali magnetno | || -magnetic ali mehanskim mešalom | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | analitska tehtnica z natančnostjo | + || tehtal 0,01 g +/- | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | Vrsta Mill "ciklon" QC-114 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | rotacijski uparjalnik (TS-1m2, | + || W ali 25-1173.102-84 al.) | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | naprava za vakuumsko | + || okoli -0,7 mmHg (Vodno turbino | || črpalka, vakuumska črpalka olja, | || Medical aspirator) | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | vakuumska naprava za usposabljanje | + || vzorcev (vakuumskih zbiralnikov), s sprejemniki | || vzdevki preskušanje zmogljivosti ne manj kot | || 10 cu. glej | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | priprava za izhlapevanje vzorcev | + | + | - | - | - | - || tok dušika ob segrevanju okoli ||||| | || 40 stopinj. C (suh zrak je zaželeno ||||| | || kopel) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Koncentriranje kartuša Diapak A-3 | + | + | + | + | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | Podjetje || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Osredotočanje vložek Diapak AU-3 | - | - | - | - | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | Podjetje || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Koncentriranje kartuša Diapak P-3, | + | + | + | + | - | - || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | Podjetje || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Koncentriranje kartuša Diapak H | + | - | + | - | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ZAO ||||| | ||"BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Osredotočanje vložek Diapak C, | - | + | - | + | - | - || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | Podjetje || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | medicinski klešče, 15 cm | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | kovinsko lopatico ali porcelana | + || žlico | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ravnim dnom bučke s stožčastim | + | + | + | + | - | - || zamaški s prostornino 50 kubičnih metrov. cm ||||| | || GOST 25.336 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ravnim dnom Erlenmajerica | + || (erlenmajerica) vmestimos- zastoji | || TEW 250 ali 300 cc. cm | || GOST 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | Buchner bučko s prostornino 500 kubičnih metrov. | + || See | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | Lijak zmogljivosti Bunsen | + || 200 cu. glej | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | toka ločilni kapaciteta | + || 250 cu. glej GOST 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | ostrodonnye bučke z zamaški na | + || GOST 25336 z zamenljivim konu- | || som 14/23 zmogljivost 5, 10 | || 25 cu. glej | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | hruškaste oblike bučke z zamaški na | + | + | + | + | - | - || GOST 25.336 z izmenljivimi konu- ||||| | || som 14/23 zmogljivost 10 in 25 kubičnih metrov. ||||| | || glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | merilne valje z zmogljivostjo 25, 50, | + || 100 cu. cm celice 2, po katerem GOST 1770 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | mikrosiringa s prostornino 100 kubičnih metrov. mm | + || (ali pipeti diplomiral GOST | || 20.292 izvedba 4 ali 5, 1. klasifikacijski |. || sa zmogljivosti natančnost 1 cc) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | filter papir (gosto, ozek || - || - | + | + || koporistaya počasi filtriranje ||||| | | | tanka tipa usedlina "blue ||||| | || Feed") ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | unsterilized medicinske bombaž, | + || x / b | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | acetonitril za tekočinsko kromatografijo | + || graphy, OP-3 OFS TU | || 6-09-14-2167-84, odpravljene | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | acetona, visoke čistosti, po katerem TU 6-09-3513-75 | - | + | - | - | - | - || OP-2, odpravljene ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | benzen, kakovosti reagenta, po katerem GOST 5955-75, vyder- | + | + | + | + | - | - || zhanny preko Na SO, odpravljene ||||| | || 2. april ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | heptan, heksan, XQ, TU | + | + | + | + | - | - || 6-09-3375-78 ali petroleter ||||| | || (frakcija 70-100), kakovosti reagenta, ||||| | Odpravljene || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2-propanol (izopropil alkohol) | - | - | - | - | + | + || XQ, TU 6-09-402-75, ||||| | Odpravljene || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ocetna kislina, XV, | + | + | + | + | - | - || GOST 61-75 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | kloroform, medicinska, trajno | - | - | - | - | + | + || več CaCl, odpravljene ||||| | || 2 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | metilen klorid (diklorometan) | + | + | - | - | - | - || trajali ves CaCl, ||||| | || 2 ||||| | Odpravljene || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | eter dietil, trajali ves | - | + | - | - | - | - || NaOH odpravljene ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | etil acetat (etilacetat || + || - || - || kislina), kakovosti reagenta, v skladu s GOST 22300-76, || ||| | || ohranjajo v Na-CO in rektifitsi- ||||| | || 3. februar ||||| | Rowan || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | natrijev sulfat, brezvodni, kakovosti reagenta, dne | + | + | + | + | - | - || GOST 4166-76 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | natrijev klorid, kakovosti reagenta, po katerem GOST 4233-77 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | destilirana voda | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | ekstrakcijo - 84% acetonitrila v VO | + || de, 840 kubičnih metrov. Glej acetonitril dovo- | || dyatsya na 1 liter vode ali polucha- | || etsya z destilacijo z vodno vodno | || vendar - acetonitril (1: 4) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 33% benzena v acetonitrilu - mix | + | + | + | + | - | - || 30 cu. Glej benzen in 60 kubičnih metrov. Glej aceton ||||| | || tonitrila (1: 2) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 20% acetonitrila v benzenu - 20 cu |. + | - | - | - | - | - || cm acetonitril razredčimo benzenovo ||||| | || do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2% ocetna kislina v benzenu - 2 | - | - | + | - | - | - || cu. glej razredčeno ocetno kislino ||||| | || benzena do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 5% ocetna kislina v benzenu - 5 | - | + | - | - | - | - || cu. glej razredčeno ocetno kislino ||||| | || benzena do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% etil acetata v benzenu - 10 cu. | - | + | - | + | - | - || cm acetat razredčimo z benzenom da ||||| | || 100 cu. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 25% heksana v zraku - 25 cu. glej | - | + | - | - | - | - || heksan razredčimo z dietil etrom ||||| | || do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% acetona v diklorometanu - 10 cu. | - | + | - | - | - | - || cm aceton razredčimo z diklorometanom ||||| | || do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 20% acetona v diklorometanu - 20 cu |. - | - | - | - | + | - || cm aceton razredčimo z diklorometanom ||||| | || do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + 5.2. Postopek priprave probOpredelyaemye mikotoksinov predela za ekstrakcijo iz vzorca mase prisootnoshenii vzorca - prostornina sredstva za izločanje 1: 5. Ko je opredeleniiaflatoksina B1 in zearalenona očistimo vodni ekstrakt na -atsetonitrilnogo vpenjalne glave Diapak A-3 na kartuši kontsentriruyutmikotoksiny Diapak P-3, posušimo z uparjenjem odpadne vode in ponovnem raztapljanju iposle izvedemo končno ochistkuna vpenjal Diapak H (Diapak C - v primeru koruze in izdelkov iznee ). Frakcionirno izpiranje dve frakciji dobimo, soderzhaschieaflatoksin B1 in zearalenona, pripravljena za kromatografsko določanje deoksinivalenol analizu.Pri in T-2 toksina provodyatpredvaritelnuyu čiščenje vode - acetonitril ekstrakt napatrone Diapak AU-3 in zgostimo do suhega. Poslepererastvoreniya končno čiščenje izvedemo na DiapakN kartuše. Frakcionirno izpiranje dve frakciji dobimo, soderzhaschiedezoksinivalenol in T-2 toksina, pripravljena hromatograficheskomuanalizu.Dlya potrjevanja stopnjo priprave vzorca iutochneniya mikotoksinov ekstrakcijo analizirali probymetodom standardne dodatke prvotnemu ekstrakta. Osnovnyeharakteristiki pripravo vzorca trdna ekstraktsiiprivedeny v tabeli. 2. Tabela 2OSNOVNYE priprava značilnosti vzorca + ---------------- + --------------- + --------- - + ------------------- + | Mikotoksinov | Čas | Stopnja | relativna ||| probopod- | ekstrakcija, | povprečju kvadratiche- ||| kuhanje min. | % | Skoe odstopanje,% | + ---------------- + --------------- + --------- - + ------------------- + | aflatoksin B1 | 120 | 75 | 20 | + ---------------- + --------------- + ----------- + - ----------------- + | zearalenon | 120 | 70 | 20 | + ---------------- + --------------- + ----------- + - ----------------- + | Deoksinivalenol | 90 | 85 | 10 | + ---------------- + --------------- + ----------- + - ----------------- + |, T-2 toksina | 90 | 85 | 10 | + ---------------- + --------------- + ----------- + - ----------------- + za doseganje potrebne stopnje ekstrakcije tochnovypolnyat zahtevah za kvalifikacijo organskih topil in ihpodgotovke pripravi raztopin navedene v pogl. 5.1.Algoritm iskanja morebitnih izgubah ciljnih vzorcev mikotoksinov pripodgotovke je podan v Dodatku 1 k tej Metodicheskimukazaniyam.5.3. Priprava koncentriranje patronovPatrony Diapak plastika stolpec vsebuje 1 ali 3 kubičnih metrov. cm sorbenta.5.3.1 hermetično pakirajo. zlaganje kartuša Diapak-3Vskryt izhodno linijo kartuše Diapak A-3, odstranitev polimernuyuzaglushku. Nastavitev kartuša pokonci ozkem kontsomvniz primerna naprava za zbiranje in odvajanje elyuata.Ostorozhno Odpri polimernega pokrov kartuše, da se tvori zgornjo plast sorbenta rovnyygorizontalny Točilna popatronu in ga pritrdimo z majhno bombaža tampona.Podklyuchit vakuumski aparat za praznjenje vakuuma in na obespechitpodachu patrone .Kontsentriruyuschy kartuša Diapak A-3 enkratno iregeneratsii ne podlezhit.5.3.2. Koncentriranje kartuša Diapak AU-3Podgotovka koncentriranje kartuša Diapak AU-3 provoditsyaanalogichno n. 5.3.1.Kontsentriruyuschy kartuša Diapak AU-3 enkratno iregeneratsii ne podlezhit.5.3.3. Koncentriranje kartuša Diapak P-3Set kartuša Diapak P-3, v vertikalno podhodyascheeustroystvo za vakuumu in odpreti zgornjo kryshku.Suspendirovat sorbent ob mešanju s stekleno paličico v 10kub. Glej benzena, pustite stati absorbent in gospodična na slabomvakuume, izogibanje zraka ujetost v sorbentno posledovatelnopo 10 cu. cm iz benzena in acetona atsetona.Sohraniv plasti približno 2 cm, da uvede porozno polimernyyfiltr (na voljo v kompletu) in tesnilo je palico verhnemusloyusorbenta.Zatempropustit Preostali aceton in zaporedno s 10 cc. cm ekstrakcijo in ekstrakcijo -voda zmes (1: 1), ki preprečuje vstop zraka v sorbent s skorostyu2 - 3 kapljice sekundu.Sohraniv sloja eluenta trajala približno 2 cm, onemogoči vakuumu žarilna prvi kapsuli gornji pokrov in nato (posleprekrascheniya kaplja) in dno loputa. Tako se bolezen pripravljeni vložek lahko shranite med delovnim dnem, in suši prisluchaynom je v delovnem stanju prokachivaniem10 kocko. cm ekstrakcijsko sredstvo zmes - voda (1: 1) .Kontsentriruyuschy vložek Diapak P-3 za enkratno uporabo sheme ipodlezhit regeneracija, kot je opisano zgoraj, po provedeniyaprobopodgotovki.5.3.4. Osredotočanje Diapak NSnyat glava z chuck Diapak H čepi skozi to s pomočjo 5 cc brizge. glej benzen in tesnjenje obeh koncih, tako da se patrona.Podgotovlenny vložek lahko shrani v techeniesutok pri temperaturi, ki ni višja od 25 °. C.Kontsentriruyuschy kartuša Diapak H ipodlezhit večkratno uporabo Regeneracija naslednje sheme po provedeniyaprobopodgotovki: - po pripravi vzorca DT - zaporedno preskoči cherezpatron 5 cu. cm etanola, acetona in po pripravi vzorca benzola-- AZ - zaporedno preskoči cherezpatron 5 cu. cm aceton in benzola.5.3.5. Osredotočanje Diapak SSnyat kartuše s kartušo C Diapak svečke skozi to s pomočjo 5 cc brizge. glej benzen in tesnjenje obeh koncih, tako da se patrona.Podgotovlenny vložek lahko shrani v techeniesutok pri temperaturi, ki ni višja od 25 °. C.Kontsentriruyuschy vložek Diapak C enkratno iregeneratsii ne podlezhit.5.4. Pridobivanje mikotoksinov5.4.1. Žita in zernoprodukty25 g zmeljemo vzorec prenesemo v erlenmajerico in zalit125 kocke. Glej ekstrakcijsko. Izvedemo intenzivno peremeshivaniesoderzhimogo bučko teku 30 min. Izvleček filter cherezbumazhny filter "modri trak".5.4.2. Matice in oljna semena kultur25 g zmeljemo vzorec prenesli v erlenmajerici dobavit125 kocke. Glej ekstrakcijsko in 40 kubičnih metrov. glej heksana. Izvesti intensivnoeperemeshivanie vsebino bučke 30 minut. Posleperemeshivaniya dodaj za pridobivanje 1 g natrijevega klorida in prodolzhitperemeshivanie 5 minut. Filtriramo skozi filtrirni papir"modri trak". Filtrirano ekstrakt smo prenesli v raztopino in po delitelnuyuvoronku snopa zbirajo -atsetonitrilny spodnji vodni sloj. Ekstrakt acetonitril razmasti 25 cc heksana v lij ločnik s prostornino 250 kubičnih metrov. sm.Ekstrakt prenesli v lij ločnik, dodamo 25 cc heptana in mešamo temeljito. Po ločitvi sobratnizhny vodo - acetonitrila ekstrakt.5.4.3. Olje rastitelnoe25 g olja prenesemo v erlenmajerico, dodamo 40 ccm. smgeksana in 125 kubičnih metrov. Glej ekstrakcijsko. Izvesti intensivnoeperemeshivanie vsebino bučke 30 minut. Posleperemeshivaniya da ekstrakt 0,2 g NaCI iprodolzhit mešanju 3 - 5 min. Ekstrakt smo prenesli vdelitelnuyu ločnik in po razmešanje zbirajo spodnjo plast vode in acetonitrila. Ekstrakt acetonitril razmasti 25kub. glej heksana ali heptana ali petroletra delitelnoyvoronke kapaciteto 250 cu. sm.Ekstrakt prenesli v lij ločnik, dodamo 25 cc heptana in mešamo temeljito. Po ločitvi sobratnizhny vodo - acetonitrila ekstrakt.5.5. Čiščenje in prob5.5.1 koncentracija. Čiščenje in koncentracija vzorca na opredeleniiaflatoksina B1 in zearalenona5.5.1.1. Predhodno čiščenje in koncentriranje proby25 kocka. cm razmaščeni ekstrakt skozi patronDiapak A-3 s hitrostjo 2 - 3 kapljice na sekundo in 20 cc izbiro elyuata.Poluchenny eluata prostornino 20 kubičnih metrov. glej razredčimo enako obemomvody. Nastalo raztopino smo spustili skozi kartušo Diapak soskorostyu P-3 1 - 2 kapljici na sekundo, potem smo kartuša speremo s 5 cc vode in čistimo z zrakom 1 min.Tselevuyu fraktsiyuelyuirovatspatronaDiapakP 3posledovatelno 7-kocke. acetonitril in 7 cm kocke. 33 cm protsentnogobenzola acetonitril - s hitrostjo 1 - 2 kapljici sekundu.Sobranny eluata smo spustili skozi plast brezvodnega natrijevega sulfata (10 g) zaradi gravitacije. Bučo smo splaknili z 2 cc. 33 cm protsentnogobenzola v acetonitrilu in vsebina prenesene na isti sloybezvodnogo natrijevim sulfatom. Spere natrijevim sulfatom 3 cu. sm33 odstotkov benzena v acetonitrilu. Posušeni uparitdosuha Filtrat na rotacijskem uparjalniku pri temperaturi, ki ni višja od 40 grad.C in takoj rekonstituiranega v 0,5 cc. Glej benzola.5.5.1.2. Končno čiščenje na vložku Diapak H (varianta 1) Raztopino benzena smo nanesli na predvaritelnokonditsionirovanny kartuša Diapak N. erlenmajerico suhoyostatok, speremo 2-krat bolj z 0.5 cu. glej benzen in zaporedno uporabljajo rešitve na tuljavi Diapak N. Vsi izpiralne spatrona otbrosit.Zearalenon eluirane iz vložka Diapak H 4 kocka. cm2 odstotkov ocetne kisline v benzenu in uparimo do suhega (doischeznoveniya vonja ocetne kisline) v rotacijskem temperaturi isparitelepri ni višja od 50 °. C (Primer H). Suha ostatoknemedlenno rekonstituiran v sootvetstvuyuschemkonechnomu topilu kromatografska opredeleniyu.Zatem eluira aflatoksina B1 5 cc. 20 cm protsentnogoatsetonitrila v benzenu vložku in uparimo do suhega v toku dušika pritemperature ni višja kot 40 °. C (vzorec A). Trdne snovi nemedlennopererastvoritvrastvoritele ustreza konechnomuhromatograficheskomu opredeleniyu.Ekvivalent maso vzorca, odvzetega za analizo aflatoksina B1, MNR, - 4 g.Ekvivalent maso vzorca, odvzetega za analizo zearalenon, MNR, - 4g.5.5.1.3. Končno čiščenje na vložku Diapak C (varianta 2), primerno za koruzo in proizvodov iz raztopine nee.Benzolny smo nanesli na predvaritelnokonditsionirovanny kartuša Diapak S. erlenmajerico suhoyostatok, speremo 2-krat bolj z 0.5 cu. nanašajo na benzen in nanestirastvory Diapak kartuše C, če gornjo stran od predhodnih rešitev filtrapatrona odsekov. Vsi izpiranjem z patronaotbrosit.Zearalenon Diapak eluiramo iz vložka s 6 kubičnih metrov. SM10 odstotni etil acetat v benzenu in uparimo do suhega (doischeznoveniya vonj benzenu) v rotacijskem uparjalniku pritemperature ni višja kot 50 °. C (Primer H). Trdne snovi nemedlennopererastvoritvrastvoritele ustreza konechnomuhromatograficheskomu opredeleniyu.Zatem Diapak skozi kartušo C3 CC dosledno izpustili 5 odstotno ocetno kislino v benzenu in 4 cc. sm25 odstotkov heksana v zraku. Vse eluate se zavržejo. AflatoksinV1 eluiramo iz vložka 6 cu. cm 10 odstotkov aceton vdihlormetane. Eluat uparimo do suhega v toku dušika pri temperaturi 40 ° nevyshe. C (vzorec A). Trdne snovi dobro pererastvoritv topilo primerno konec hromatograficheskomuopredeleniyu.Ekvivalent masa vzorca, odvzetega pri analizi aflatoksina B1, MNR, - 4 g.Ekvivalent maso vzorca, odvzetega za analizo zearalenon, MNR, - 4g.5.5.2. Čiščenje in koncentracija vzorca v opredeleniidezoksinivalenola in T-2 toksina5.5.2.1. Predhodno čiščenje in koncentriranje proby20 kocka. glej ekstrakt skozi kartušo Diapak AU-3 soskorostyu 2 - 3 kapljice na sekundo. Eluat zberemo. Sperite 5kub kartuše. cm ekstrakcijo in filtriranje združene eluate vserdtsevidnuyu bučo splaknemo 2 filtra kocko. cm acetonitril sobirayapromyvochnuyu tekočine v steklenici. Rotatsionnomisparitele izpari do suhega pri temperaturi okoli 60-70 stopinj. C. Uparivaniepovtorit 2 - 3-krat z dodatkom bučko 3 - 5 cc. smpropanola-2 ali acetonitril do izginotja vodnih kapljic Nastenko bučko (vzorec DT) .5.5.2.2. Končno čiščenje na kartuši Diapak NProbu DT, raztopljenega v 0,5 cc. cm kloroforma in uporabiti napredvaritelno pogojeno kartuša Diapak N. obmytesche bučko z 2-krat 0,5 cu. cm nanestirastvory kloroform in zaporedoma na isti vpenjalne glave, ki se začne z zbiranjem frakcije, ki vsebujejo T 2toksin v stripping bučki. Celotna eluciji T-2 toksina 2 ccm kloroforma v bučki. Eluat uparimo do suhega na rotatsionnomisparitele pri 40 - 45 ° C. C in rekonstituiramo vrastvoritele ustreza končni hromatograficheskomuopredeleniyu T-2 toksina (vzorčna T) .Dezoksinivalenol eluiramo iz vložka na drugega krovnega kolbu6 kocko. glej 20 odstotkov acetona v kloroformu. Uparitdosuha izluži na rotacijskem uparjalniku pri temperaturi 40 - 45 stopinj. Ipererastvorit C v topilu sootvetstvuyuschemkonechnomuhromatograficheskomu določanje deoksinivalenol (vzorec D) .Ekvivalent masa vzorca, odvzetega za analizo deoksinivalenol, NMR, - 4 g.Ekvivalent masa vzorca, odvzetega za analizo, T-2 toksina, MNR, - 4g.6. Aflatoksin M16.1. Oprema, materiali, reagenti + -------------------------------------------- - + ----------------- + | IR rotacijski uparjalnik ali enota 1m2 | TU 25-1173.102-84 || izhlapi vzorce dušikom pri ogrevalnem | ali druga . || SRI okoli 40 stopinj. C | || TSLN Centrifuga tipa 2 ali podobno | W || 5-375-4171-73 Naprava za ustvarjanje vakuuma okoli -0,7 mm | || Hg. (Z vodnim curkom črpalko, olje vakuumsko | || črpalko, medicinski Sesalna naprava) | || vakuumska naprava za pripravo vzorca (Ba | || Razdelilnik vakuumsko), s sprejemniki vmesti- preskušanja | || most ni manjša od 10 kubičnih metrov. glej | || Osredotočanje vložek Diapak S16M, | TU 4215-002 - || Podjetje "BioKhimMak CT"| 05.451.931-94 || Osredotočanje vložek Diapak C, | TU 4215-002 - || Podjetje "BioKhimMak CT"| 05451931-94 || Medicinska klešče, 15 cm | || brizgalko kapaciteta 10 ali 20 kubičnih metrov. Glej Luer | || ravnim dnom konične bučke z zamaški, | || GOST 25.336 z zmogljivostjo 50 kubičnih metrov. glej | || ostrodonnye bučke z zamaški, z izmenljivimi | GOST 25.336 || z neposrednim stožec 14/23 z zmogljivostjo 10 ali 25 kubičnih metrov. | || See | || hruškasta bučke z zamaški, z izmenljivimi | GOST 25.336 || z neposredno stožca 14/23 z zmogljivostjo 25 kubičnih metrov. glej | || merilne valje z zmogljivostjo 50 kubičnih metrov. Glej, | GOST 1770 || 2 celic, ali epruveta diplomiral vmestimos-. | || TEW 15 ali 20 kubičnih metrov. glej | || mikrosiringa s prostornino 100 kubičnih metrov. mm ali pipet- | GOST 20292 || ka diplomiral izvršitev od 4 ali 5, razred 1 | || zmogljivost natančnost 1 cu. glej | || unsterilized medicinske bombaž, s / b | || acetonitril za tekočinsko kromatografijo, | W 6-09-14 - || OP-3, OFS odpravljene ali | 2167-84 || acetonitril, 1 razred kooperativno "Kriohrom", | || r. Saint - Petersburg | || aceton, OFS, OP-2, prečiščeni | || TU 6-09-3513-75 heptan, heksan, xv ali petroleter (poročene | TU 6-09-3375-78 || kem 70-100) odpravljene | || citronska kislina, 1-voda, analitskega | GOST 3652-29 || natrijev klorid, kakovosti reagenta | || GOST 4233-66 kloroform medicinska, trajali ves CaCl | || 2 | || odpravljene | || natrijev sulfat, brezvodni, kakovosti reagenta | GOST 4166-76 || destilirana voda | | + ---------------------------------------------- + - ---------------- + 20% acetona v kloroformu - 20 cu. aceton dobavithloroform cm do 100 cu. nanašajo na celotno ali 5% metanol vhloroforme - 20 cu. dodamo 5 cm kloroforma kocke. cm metanola, da skupni volumen raztopine do 100 cc kloroforma. sm.6.2. Postopek priprave M1 probAflatoksin odstranimo iz tekoče mlečne vzorca skozi propuskaniemee kartuše Diapak S16M. Frakcijo, ki vsebuje aflatoksinM1, eluiramo s kloroformom in vložka, po sušenju iuparivaniya se končno čiščenje izvedemo na kartuši Diapak S.Podgotovlennaya vzorca pripravljena za kromatografsko analizu.Aflatoksin M1 smetane in mlečnih pijač ekstragiruyuthloroformom v prisotnosti natrijevega klorida in citronske kisline za skladnost z MU N 4082-86 <*> и, после высушивания и упаривания,проводят окончательную очистку на патроне Диапак С.--------------------------------<*> Методические указания по обнаружению, идентификации иопределению содержания афлатоксинов в продовольственном сырье ипищевых продуктах с помощью высокоэффективной жидкостнойхроматографии. Утв. МЗ СССР 20.03.86 N 4082-86.Для проверки правильности проведения пробоподготовки иуточнения степени извлечения микотоксинов проводят анализ методомстандартной добавки в исходный экстракт.Время проведения пробоподготовки - 60 мин. Степень извлечения<*> - 80%. Относительное среднее квадратическое отклонение - 10%.--------------------------------<*> При снижении степени извлечения афлатоксина М1 см.Приложение 1.6.3. Подготовка концентрирующих патронов6.3.1. Концентрирующий патрон Диапак С16МСнять с патрона Диапак С16М заглушки и пропустить через него спомощью шприца последовательно по 5 куб. см ацетонитрила и воды.Заглушить оба конца патрона. Подготовленный таким образом патронможет храниться в течение суток при температуре не выше 25 град.C.Концентрирующий патрон Диапак С16М одноразового применения ирегенерации не подлежит.6.3.2. Концентрирующий патрон Диапак ССнять с патрона Диапак С заглушки и пропустить через него спомощью шприца 5 куб. см бензола и заглушить оба конца патрона.Подготовленный таким образом патрон может храниться в течениесуток при температуре не выше 25 град. C.Концентрирующий патрон Диапак С одноразового применения ирегенерации не подлежит.6.4. Подготовка проб молочных продуктов к анализу6.4.1. Подготовка, концентрирование и очисткапроб молокаПробу молока 50 куб. см центрифугировать на подходящемоборудовании в течение 5 мин. при 1000 об./мин. Для определенияафлатоксина М1 отобрать 20 куб. см супернатанта, избегая попаданияжира.Сухое молоко растворяется в соответствии с инструкцией илисоответствующим ТУ и обрабатывается, как описано выше.20 куб. см подогретой до 40 град. C подготовленной пробымолока пропустить через предварительно подготовленный патронДиапак С16М со скоростью 3 капли в секунду. Затем патрон промыть 5куб. см дистиллированной воды и высушить продуванием воздуха втечение 1 мин. Элюаты отбросить. Патрон промыть 10 куб. см гексанаи вновь высушить воздухом в течение 1 мин.Афлатоксин М1 элюировать 6 куб. см хлороформа. Собранный элюатпропустить самотеком через слой безводного сульфата натрия (3 куб.см). Колбу обмыть 1 куб. см хлороформа, и содержимое перенести натот же слой безводного сульфата натрия. Хлороформные растворысобрать (Экстракт М).6.4.2. Подготовка проб сметаны и кисломолочныхпродуктовВ коническую колбу вместимостью 250 куб. см помещают навеску20,0 г сметаны или 40 куб. см кисломолочного напитка. Затем тудаже вносят 10,0 куб. см водного раствора 2 г хлорида натрия и 0,24г лимонной кислоты и 100 куб. см хлороформа (все составные частипредварительно подогревают до температуры 35 - 38 град. C).Содержимое колбы встряхивают 2 - 3 мин., переносят в центрифужныестаканы и центрифугируют 15 мин. при 3000 - 4000 об./мин. Отделяютнижний хлороформный слой, высушивают над 10 г безводного сульфатанатрия, отфильтровывают, измеряют объем фильтрата (V ) и упариваютфдо 5 - 6 куб. см (Экстракт М).6.5. Окончательная очистка пробыЭкстракт М нанести на патрон Диапак С со скоростью 3 - 4 каплив секунду. Промыть сульфат натрия 1 куб. см хлороформа, и растворнанести на патрон Диапак С при достижении верхнего фильтра патронауровнем предыдущей порции раствора.Афлатоксин М1 элюировать с патрона 10 куб. см 20-процентногоацетона в хлороформе или 7 куб. см 5-процентного метанола вхлороформе. Элюат собрать и упарить досуха на ротационномиспарителе или в слабом токе азота при температуре не выше 40град. C. Сухой остаток немедленно перерастворить в растворителе,соответствующем конечному хроматографическому определению (ПробаМ).Эквивалент массы пробы молока, взятой на анализ афлатоксинаМ1, М , - 20 г.прЭквивалент массы пробы сухого молока рассчитывается поформуле:mМ = --- x 20, (6.1)прVгде:М - эквивалент массы пробы, взятой на анализ, г-прm - масса пробы сухого молока, г-V - объем воды для растворения пробы сухого молока, куб. см.Эквивалент массы пробы сметаны или кисломолочных напитков,взятой на анализ, рассчитывается по формуле:VфM = --- x m ,(6.2)пр 100пргде:M - эквивалент массы пробы, взятой на анализ, г-прV - объем фильтрата, куб. см-фm - масса (объем) пробы сметаны или кисломолочных напитков,прг (куб. см).7. Патулин7.1. Оборудование, материалы, реактивы+----------------------------------------------+-----------------+|Испаритель ротационный ИР-1М2 |ТУ 25-1173.102 - || |84 или др. ||Центрифуга типа ЦЛН-2 или аналогичная |ТУ 5-375-4171-73 ||Устройство для создания вакуума около -0,7 мм | ||рт.ст. (водоструйный насос, масляный вакуумный| ||насос, медицинский отсасыватель) | ||Вакуумное устройство для подготовки проб (ва- | ||куумный манифолд), с приемниками проб вмести- | ||мостью не менее 10 куб. см| ||Устройство для упаривания проб в токе азота | ||при нагревании около 40 град. C (желательно | ||суховоздушная баня) | ||Концентрирующий патрон Диапак П-3,|ТУ 4215-002 -||ЗАО "БиоХимМак СТ"|05451931-94 ||Концентрирующий патрон Диапак С, |ТУ 4215-002 -||ЗАО "БиоХимМак СТ"|05451931-94 ||Пинцет медицинский, 15 см | ||Колбы плоскодонные конические с пробками вмес-|ГОСТ 25336 ||тимостью 50 куб. см | ||Колбы остродонные с пробками с взаимозаменяе- |ГОСТ 25336 ||мым конусом 14/23 вместимостью 5, 10 или 25 | ||куб. см | ||Колбы грушевидные с пробками с взаимозаменяе- |ГОСТ 25336 ||мым конусом 14/23 вместимостью 25 куб. см | ||Пробирка градуированная вместимостью 15 или 20|ГОСТ 1770||куб. см | ||Цилиндры мерные вместимостью 10 и 50 куб. см, |ГОСТ 1770||2 кл. | ||Микрошприц вместимостью 100 куб. мм (или пи- |ГОСТ 20292 ||петка с делениями исполнения 4 или 5, 1-го| ||класса точности вместимостью 1 куб. см) | ||Бумажные фильтры обеззоленные марки ФОМ | ||Вата медицинская нестерилизованная, х/б | ||Ацетат цинка 2-водный, чда|ГОСТ 5823||Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, |ТУ 6-09-14 - ||ОП-3 осч, ректифицированный |2167-84 ||Ацетон, осч, ректифицированный, ОП-2 |ТУ 6-09-3513-75 ||Бензол, хч, ректифицированный |ГОСТ 5955-75 ||Гексацианоферат II калия (калий железистосине-|ГОСТ 4207||родистый) 3-водный, хч| ||Гептан, гексан, хч или петролейный эфир |ТУ 6-09-3375-78 ||(фракция 70-100), хч, ректифицированный | ||Хлороформ, медицинский, выдержанный над CaCl ,| ||2 | ||ректифицированный | ||Этилацетат (этиловый эфир уксусной кислоты), |ГОСТ 22300-76||хч, выдержанный над Na CO и ректифицированный| || 2 3| ||Карбонат натрия, хч |ГОСТ 83-79 ||Сульфат натрия, безводный, хч |ГОСТ 4166-76 ||Вода бидистиллированная | |+----------------------------------------------+-----------------+1,5% карбоната натрия - 1,5 г карбоната натрия растворить в100 куб. см воды.15% этилацетата в бензоле - 15 куб. см этилацетата разбавитьбензолом до 100 куб. см.30% этилацетата в бензоле - 30 куб. см этилацетата разбавитьбензолом до 100 куб. см.Раствор Карреза I - 15,0 г гексацианоферата II калиярастворить в 100 куб. см воды.Раствор Карреза II - 30,0 г ацетата цинка растворить в 100куб. см воды.7.2. Способ подготовки пробМикотоксин патулин извлекают из проб осветленных соков инапитков пропусканием их через патрон Диапак П-3. Затем патулинэлюируют этилацетатом с патрона и после обработки растворомNa CO , высушивания, упаривания и перерастворения проводят2 3окончательную очистку на патроне Диапак С.Соки и напитки с мякотью и консистентные продукты разводятводой, осветляют растворами Карреза в соответствии с ГОСТом28038-89 <*>, фильтруют и экстрагируют патулин пропусканиемфильтрата через патрон Диапак П-3. Затем патулин элюируютэтилацетатом с патрона и после обработки раствором Na CO ,2 3высушивания, упаривания и перерастворения проводят окончательнуюочистку на патроне Диапак С.--------------------------------<*> Продукты переработки плодов и овощей. Метод определениямикотоксина патулина. ГОСТ 28038-89.Подготовленные пробы готовы к хроматографическому анализу.Для проверки правильности проведения пробоподготовки иуточнения степени извлечения патулина проводят анализ методомстандартной добавки в пробу.Время проведения пробоподготовки - 90 мин. Степень извлечения<*> - 60%. Относительное среднее квадратическое отклонение - 10%.--------------------------------<*> При снижении степени извлечения патулина см. Приложение 1.7.3. Подготовка концентрирующих патронов7.3.1. Концентрирующий патрон Диапак П-3Установить патрон Диапак П-3 вертикально в подходящееустройство для вакуумирования и открыть верхнюю крышку.Суспендировать сорбент при перемешивании стеклянной палочкой в 10куб. см бензола, дать отстояться сорбенту и пропустить при слабомвакууме, не допуская попадания воздуха, последовательно по 10 куб.см бензола и ацетона.Сохранив слой ацетона около 2 см, ввести пористый полимерныйфильтр (имеется в комплекте) и уплотнить его палочкой по верхнемуслоюсорбента.Затемпропустить оставшийся ацетон ипоследовательно по 10 куб. см экстрагента (см. п. 5.1) и смесиэкстрагент - вода (1:1), не допуская попадания воздуха на сорбентсо скоростью 2 - 3 капли в секунду.Сохранив слой последнего элюента около 2 см, отключить вакууми заглушить патрон сначала верхней крышкой, а затем (послепрекращения скапывания) и нижней заглушкой. Подготовленный такимобразом патрон может храниться в течение рабочего дня, а прислучайном пересыхании приводится в рабочее состояние прокачиванием10 куб. см смеси экстрагент - вода (1:1).Перед проведением пробоподготовки через патрон Диапак П-3пропустить 10 куб. см воды.Концентрирующий патрон Диапак П-3 многоразового применения иподлежит регенерации после проведения пробоподготовки по схеме егоподготовки, как указано выше.7.3.2. Концентрирующий патрон Диапак ССнять с патрона Диапак С заглушки и пропустить через него спомощью шприца 5 куб. см бензола и заглушить оба конца патрона.Подготовленный таким образом патрон может храниться в течениесуток при температуре не выше 25 град. C.Концентрирующий патрон Диапак С одноразового применения ирегенерации не подлежит.7.4. Подготовка проб к анализу7.4.1. Подготовка осветленных соков и напитковОтфильтровать пробу через плотный бумажный фильтр до получения20 куб. см фильтрата (Фильтрат П).7.4.2. Подготовка соков и напитков с мякотьюи консистентных продуктовНавеску пробы массой 10,0 г поместить в стеклянный стакан,смешать с небольшим количеством дистиллированной воды иколичественно перенести в мерную колбу вместимостью 50 куб. см. Вмерную колбу внести 6,0 куб. см раствора Карреза I и 6,0 куб. смраствора Карреза II. Содержание колбы довести дистиллированнойводой до метки, тщательно перемешать и отфильтровать в мерныйцилиндр через бумажный складчатый фильтр. Измерить объем фильтрата(Фильтрат П).7.5. Концентрирование и очистка пробы7.5.1. Концентрирование пробы на патроне Диапак П-3Весь объемФильтратаПнанестина предварительнокондиционированный патрон Диапак П-3 со скоростью 1 - 2 капли всекунду. Промыть патрон 5 куб. см бидистиллированной воды. Всесмывы отбросить.Патулин элюировать с патрона 10 куб. см этилацетата в колбуили мерную пробирку с пришлифованной пробкой, содержащую 5 куб. см1,5-процентного карбоната натрия, закрыть пробкой, интенсивноперемешать и дать отстояться. Декантировать верхний этилацетатныйслой, высушить его безводным сульфатом натрия (3 г) и перенести вколбу для упаривания. В колбу или пробирку, содержащую оставшийся1,5-процентный карбонат натрия, добавить еще 10 куб. смэтилацетата, перемешать и, после полного расслоения, высушиванияэтилацетатного слоя тем же сульфатом натрия, объединить его спервой порцией этилацетатного раствора в той же колбе дляупаривания. Операцию повторить с 5 куб. см этилацетата.Упарить этилацетатный раствор на ротационном испарителе притемпературе не выше 40 град. C до объема около 0,5 куб. см (неупаривать досуха!). Количественно перенести пробу в сердцевиднуюколбу вместимостью не более 5 куб. см или в полимерную пробиркутипа Эппендорф, промыв предыдущую отгонную колбу 0,5 куб. смэтилацетата, и присоединить к упариваемой пробе. Пробу упарить втоке азота при температуре не более 40 град. C в суховоздушнойбане до 0,5 куб. см и добавить к ней 2,5 куб. см бензола.7.5.2. Окончательная очистка пробы на патроне Диапак СБензол - этилацетатный раствор пропустить через патрон ДиапакC со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Обмыть колбу еще 0,5 - 1,0куб. см 15-процентного этилацетата в бензоле и нанести на патрон.Все смывы отбросить.Патулин элюировать с патрона 6 куб. см 30-процентногоэтилацетата а бензоле, собирая элюат в сердцевидную отгоннуюколбу. Элюат упарить досуха в токе азота при температуре не выше40 град. C в суховоздушной бане.Внимание! После упаривания пробу немедленно перерастворить в100 мкл хлороформа, охлажденного до 0 - 5 град. C (для ТСХ -анализа) или в 100 - 500 мкл охлажденной до 5 - 8 град. Cбидистиллированной воды, подкисленной до pH 4,0 уксусной кислотой(для ВЭЖХ - анализа) и быстро охладить до 0 - 5 град. C (Проба П).Хранить Пробу П в холодильнике не более 1 ч.Эквивалент массы пробы осветленных соков и напитков, взятой наанализ, М , - 20 г, соков и напитков с мякотью и консистентныхпрпродуктов определяется по формуле:VФр.ПМ = ----- x m , (7.1)пр 50 пргде:М - эквивалент массы пробы, взятой на анализ, г-прV - объем Фракции П, куб. см-Фр.Пm - масса пробы соков и напитков с мякотью или консистентныхпрпродуктов, г.Приложение 1РЕКОМЕНДУЕМАЯ МЕТОДИКАИСПЫТАНИЙ КОНЦЕНТРИРУЮЩИХ ПАТРОНОВ ДИАПАКВведениеКаждая партия концентрирующих патронов Диапак П-3, ДиапакС16М, Диапак Н, Диапак С, а также партии сорбентов Диасорб А иДиасорб АУ подвергаются выходному контролю в соответствии сТУ 4215-002-05451931-94 наихсоответствиетребованиям,предъявляемым к специализированным патронам для твердофазнойэкстракции микотоксинов. Этим метрологически обеспечивается ихпроизводство.Применение настоящих испытаний рекомендуется проводить вследующих случаях:- еслирезультатпроверкиправильности проведенияпробоподготовки методом стандартной добавки не соответствуетнормативу коэффициента извлечения-- если патроны Диапак подвергались неправильному хранению илинарушена целостность упаковки-- в случаях дополнительного сверхнормативного использованиярегенерируемых патронов (Диапак Н, Диапак П-3).Приведенные ниже методики проверки патронов Диапак позволяютвыявить ошибку по стадиям пробоподготовки. При соответствиихарактеристик патронов Диапак нормативным требованиям следуетискать ошибки в правильности подготовки растворителей иприготовлениирастворов,контроле условий упаривания иперерастворения анализируемых проб.Если среди стадий подготовки пробы присутствует подготовка напатроне Диапак С, рекомендуется начинать анализ возможной потерицелевого компонента именно с этого патрона. Это связано счувствительностьюсиликагеляк качеству используемыхрастворителей, и прежде всего с содержанием в них воды. Такаяспецифика сильной зависимости активности патрона Диапак С отусловий его хранения и качества используемых растворителей можетпотребовать оптимизации количества элюента, используемого приработе с этими патронами в конкретной лаборатории.Общая частьНастоящая Методикапредназначенадляметрологическогообеспечения применения патронов Диапак в анализе микотоксинов иустанавливает процедуру их испытаний. Критерием качества патроновДиапак является соответствие результатов испытаний нормативамкоэффициента извлечения, K , в модельных экспериментах вRсоответствии со схемами элюирования, приведенными в разделах 5 - 7настоящих Методических указаний.Коэффициент извлечения рассчитывают по формуле:C` x KdK = ------- x 100, (1)R Cгргде:K - коэффициент извлечения данных микотоксинов, %-RC` - концентрация данного микотоксина, найденная в результатеиспытания, мкг/куб. см (или S` площадь хроматографического пика,соответствующая концентрации C`)-C - концентрация того же микотоксина, используемая длягрградуировки хроматографической системы, мкг/см (или Sплощадьгрхроматографического пика, соответствующая концентрации C )-грK - коэффициент разведения образца.dЗа окончательное значение K принимаетсясреднееRарифметическое результатов двух параллельных испытаний, еслиабсолютное расхождение между ними не превышает 5%.Испытания проводятся относительным методом по схеме "введено -найдено", поэтому специальных требований к стандартным образцаммикотоксинов не предъявляется.1. Испытание патронов Диапак А-3 иДиапак П-3 по афлатоксину В1 и зеараленонуИспытание патронов Диапак А-3 проводится совместно с ДиапакП-3 из-за низких концентраций афлатоксина В1 и зеараленона, атакже их температурной лабильности, приводящей к невозможностиконцентрирования упариванием. Патрон Диапак П-3 может быть испытаннезависимо от Диапак А-3, что рекомендуется выполнять потребителючерез каждые 10 проб после соответствующей регенерации по п.5.3.3.Приготовить из имеющихся стандартных растворов микотоксинов1,0 куб. см испытательной смеси, содержащей 0,4 мкг афлатоксина В1и 4,0 мкг зеараленона в произвольной смеси бензола и ацетонитрила.Аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см перенести в сердцевиднуюколбу, и упарить растворители досуха в токе азота при температуре40 град. C. Немедленно перерастворить остаток в 0,25 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению. Ориентировочные значения концентраций: 0,4 мкг/куб.см - для афлатоксина В1 и 4,0 мкг/куб. см - для зеараленона.Ввести раствор не менее двух раз в хроматографическую систему ирассчитать среднее арифметическое значение площадей пиков каждогоиз микотоксинов, C (S ).гр грПодготовить патроны Диапак А-3 и Диапак П-3 в соответствии сп. п. 5.3.1 и 5.3.3.Вторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить аналогично,перерастворить в 25 мл экстрагента (смеси ацетонитрил - вода -84:16) и нанести на патрон Диапак А-3 в соответствии с п. 5.1.1.Полученные 20 мл элюата сконцентрировать на патроне Диапак П-3 всоответствии с п. 5.1.1. Концентратперерастворитьипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту, получивзначение C`(S`).Рассчитать значение K по формуле (1). Значение K = 1,25.R dКоэффициент извлечения, K , должен быть не менее 90% - дляRафлатоксина В1 и 85% - для зеараленона.При испытании одного патрона Диапак П-3 вторую аликвотуобъемом 0,25 куб. см после упаривания перерастворить в 40 мл смесиэкстрагент - вода (1:1) (смеси ацетонитрил - вода 42:58) исконцентрировать в соответствии с п. 5.1.1. Рассчитать значениеK , принимая K = 1,00. Коэффициент извлечения, K , должен быть неRd Rменее 95% - для афлатоксина В1 и 95% - зеараленона.2. Испытание патронов Диапак АУ-3по дезоксиниваленолу и Т-2 токсинуПриготовить из имеющихся стандартных растворов микотоксинов1,0 см испытательной смеси, содержащей по 20 мкг дезоксиниваленолаи Т-2 токсина в произвольной смеси бензола и ацетонитрила.Аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см перенести в сердцевиднуюотгонную колбу и упарить досуха на ротационном испарителе притемпературе 40 - 50 град. C. Перерастворить остаток в 0,25 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению. Ориентировочное значение концентраций: 20 мкг/куб. см- для дезоксиниваленола и Т-2 токсина. Для градуировкихроматографической системы ввести раствор не менее двух раз ирассчитать среднее арифметическое значение площадей пиков каждогоиз микотоксинов, C (S ).гр грПодготовить патрон Диапак АУ-3 по п. 5.3.2.Вторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить аналогично,перерастворить в 20 мл экстрагента (смеси ацетонитрил - вода84:16) и нанести на патрон Диапак АУ-3, в соответствии с п. 5.5.2.После упаривания досуха остаток перерастворить и проанализироватьаналогично градуировочному эксперименту, получив значение C` (S`).Рассчитать значение K по формуле 1. Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения K должен быть не менее 95% - дляRдезоксиниваленола и Т-2 токсина.3. Испытания патрона Диапак НКонцентрирующие патроны Диапак Н являются универсальнымирегенерируемыми патронами для окончательной очистки афлатоксинаВ1), зеараленона, дезоксиниваленола и Т-2 токсина, поэтомуиспытание рекомендуется выполнять через каждые 10 проб послеочередной регенерации по п. 5.3.4. Патроны Диапак Н обеспечиваюттонкую очистку указанных микотоксинов с высокими метрологическимихарактеристиками (K не менее 90%), поэтому значения K менее 90%R Rчаще всего свидетельствуют об ошибках в приготовлении элюентов илио недостаточной чистоте растворителей.3.1. Испытание по афлатоксину В1 и зеараленонуСухой остаток упаренной второй аликвоты испытательной смеси поп. 1 немедленно перерастворить в 0,5 мл бензола и нанести поусловиям п. 5.1.2 на подготовленный (см. п. 5.3.4) патрон ДиапакН. После элюирования и упаривания Пробы З и Пробы А немедленноперерастворить их в 0,25 куб. см растворителя, соответствующегоконечному хроматографическому определению, и проанализироватьаналогично градуировочному эксперименту по п. 1, получив значениеC (S ) и C`(S`) по каждому из микотоксинов.гр грРассчитать значение K по формуле (1). Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения K должен быть не менее 90% - дляRафлатоксина В1 и зеараленона.3.2. Испытания по дезоксиниваленолу и Т-2 токсинуСухой остаток упаренной второй аликвоты испытательной смеси поп. 2 перерастворить в 0,5 мл хлороформа и нанести по условиям п.5.1.2 на подготовленный патрон Диапак Н. После элюирования иупаривания Пробу Д и Пробу Т перерастворить в 0,25 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению, и проанализировать аналогично градуировочномуэксперименту по п. 2, получив значения C (S ) и C`(S`) погр гркаждому из микотоксинов.Рассчитать значения K по формуле (1). Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения Kдолжен быть не менее 90% дляRдезоксиниваленола и Т-2 токсина.4. Испытания патрона Диапак СКонцентрирующие патроны Диапак С являются одноразовымипатронами для окончательной очистки афлатоксина В1 и зеараленона,а также афлатоксина М1 и патулина. Патроны Диапак С обеспечиваюттонкую очистку указанных микотоксинов с хорошими метрологическимихарактеристиками (K = 75 - 90%). Для достижения указанныхRхарактеристик необходимо установить оптимальный объем элюированиямоделированием порционного элюирования (1 - 3 порции по 3 мл)целевых фракций в ходе настоящих испытаний.Оптимальную схему элюирования, т.е. необходимое число порцийпо 3 мл, потребитель устанавливает по достижению суммарногокоэффициентаизвлечениянениже указанного норматива.Установленный объем элюирования подлежит проверке при смене партиирастворителей и их смесей, используемых для тонкой очисткимикотоксинов.4.1. Испытания по афлатоксину В1 и зеараленонуПодготовить патрон Диапак С в соответствии с п. 5.3.5.Сухой остаток упаренной второй аликвоты испытательной смеси поп. 1 немедленно перерастворить в 0,5 мл бензола и нанести напатрон Диапак С в соответствии с п. 5.1.3. После элюирования ираздельного упаривания трех фракций Пробы З и трех фракций Пробы Анемедленно перерастворить их в 0,25 куб. см растворителя,соответствующего конечному хроматографическому определению, ипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту по п. 1,получив по три значения Sи одному S` по каждому изгрмикотоксинов.Рассчитать K по формуле (1) для каждой из трех фракций Проб ЗRи А K = 1,00. Суммарный коэффициент извлечения K должен быть неdRменее 90% - для афлатоксина В1 и 85% - для зеараленона. Определитьминимальновозможноечисло последовательных фракций,обеспечивающее суммарный K не ниже норматива. Найденное числоRфракций (от 1 до 3) и определяет оптимальный объем элюированияданных микотоксинов с патрона Диапак С данной партии сприготовленными растворителями.Если значение суммарного K меньше нормативного значения, тоRэто свидетельствует об ошибках в приготовлении элюирующих смесейи/или о недостаточной чистоте растворителей, в особенности с точкизрения содержания в них воды.4.2. Испытание по афлатоксину М1Приготовить из имеющегося стандартного раствора 1,0 куб. смиспытательной смеси, содержащей 0,1 мкг афлатоксина М1 впроизвольной смеси бензола и ацетонитрила. Аликвоту смеси объемом0,25 куб. см перенести в сердцевидную колбу и упарить раствор втоке азота при температуре 40 град. C. Немедленно перерастворитьостаток в 0,25 - 1,0 куб. см растворителя, соответствующегоконечному хроматографическомуопределению.Ориентировочныезначения концентраций афлатоксина М1 0,025 - 0,1 мкг/куб. смсоответственно. Для проведения градуировочного эксперимента ввестираствор не менее двух раз в хроматографическую систему ирассчитать среднее арифметическое значение площадей пиковафлатоксина М1, C (S ).гр грВторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить, какописано выше, перерастворить в 6 мл хлороформа и нанести вусловиях п. 6.5 на подготовленный (см. п. 6.3.2) патрон Диапак С.После элюирования и раздельного упаривания трех последовательныхфракций Пробы М немедленно перерастворить их в 0,25 - 1,0 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению, и проанализировать аналогично градуировочномуэксперименту, получив три значения C`(S`) по афлатоксину М1.Рассчитать K по формуле (1) для каждой их трех фракций ПробыRМ K = 1,00. Суммарный коэффициент извлечения K для афлатоксинаdRМ1 должен быть не менее 85%. Найти оптимальный объем элюированияафлатоксина М1 с патрона Диапак С по алгоритму, приведенному в п.4.1. Там же приведен алгоритм поиска ошибок.4.3. Испытание по патулинуПриготовить из имеющегося стандартного раствора 1,0 куб. смиспытательной смеси, содержащей 4,0 мкг патулина в произвольнойсмеси бензола и ацетонитрила. Аликвоту смеси объемом 0,25 куб. смперенести в сердцевидную колбу и упарить растворитель в токе азотапри температуре 35 - 40 град. C. Немедленно перерастворить остатокв 0,25 куб. см растворителя, соответствующего конечномухроматографическомуопределению.Ориентировочноезначениеконцентрации патулина: 4,0 мкг/куб. см. Для проведенияградуировочного эксперимента ввести раствор не менее двух раз вхроматографическую систему и рассчитать среднее арифметическоезначение площади пика патулина, C (S ).гр грВторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить аналогично,перерастворить в 3 мл 15-процентного этилацетата в бензоле инанести в условиях п. 7.5.2 на подготовленный (см. п. 7.3.2)патрон Диапак С. После элюирования и раздельного упаривания трехпоследовательных фракций Пробы П немедленно перерастворить их в0,25 куб. смрастворителя,соответствующегоконечномухроматографическому определению, и проанализировать аналогичноградуировочному эксперименту по п. 4.3, получив три значенияC`(S`) по патулину.Рассчитать значение K по формуле (1) для каждой из трехRфракций Пробы П. K = 1,00. Суммарный коэффициент извлечения KdRдля патулина должен быть не менее 75%. Найти оптимальный объемэлюирования патулина с патрона Диапак С по алгоритму, приведенномув п. 4.1. Там же приведен алгоритм поиска ошибок.5. Испытание патрона Диапак П-3 по патулинуВторую аликвоту испытательной смеси по п. 4.3 объемом 0,25куб. см после упаривания перерастворить в охлажденной до 5 - 8град. C воде, подкисленной уксусной кислотой до pH 4,0, исконцентрировать в условиях п. 7.5.1 на подготовленном (см. п.7.3.1) патроне Диапак П-3. После элюирования и высушивания упаритьэтилацетатный экстракт досуха в токе азота при температуре 35 - 40град. C, немедленно перерастворить в 0,25 куб. см растворителя,соответствующего конечному хроматографическому определению, ипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту по п.4.3, получив значения C (S ) и C`(S`).гр грРассчитать значение K по формуле (1). Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения K для патулина должен быть не менее 80%.R6. Испытание патрона Диапак С16М по афлатоксину М1Вторую аликвоту испытательной смеси по п. 4.2 объемом 0,25куб. см после упаривания перерастворить в 20 мл 5-процентногоацетонитрила в воде и нанести в соответствии с п. 6.4.1 наподготовленный по п. 6.3.1 патрон Диапак С16М. После элюирования ивысушивания упарить хлороформный экстракт М на ротационномиспарителе при температуре не выше 40 град. C, немедленноперерастворить его в 0,25 - 1,0 куб. см растворителя,соответствующего конечному хроматографическому определению, ипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту по п.4.2, получив значения C (S ) и C`(S`) для афлатоксина М1.гр грРассчитать K по формуле (1) K = 1,00. Коэффициент извлечения,R dK , по афлатоксину М1 должен быть не менее 95%.
zdravstvena zakonodaja




Moskva, Zvezni center za sanitarne inšpekcije ministrstva za zdravje Rusije, 1999UtverzhdayuGlavny gosudarstvennyysanitarny vrachRossiyskoy FederatsiiG.G.ONISchENKO23 oktober 1999 godaData uvod v januarju 2000 goda4.1 -1. METODE nadzora. CHEMICAL FAKTORYOPREDELENIE MASS KONTSENTRATSIIMIKOTOKSINOV v prehranskih surovin in PRODUKTAHPITANIYA. Priprava vzorcev METODOMTVERDOFAZNOY EKSTRAKTSIIMETODICHESKIE UKAZANIYAMUK 4.1.787-991. Razvila zveznega centra za državne sanitarni in epidemiološki MinzdravaRossii (VB Skachkov, IV Bragin, Queen NV) in CJSC"BioKhimMak CT" (Vodilni raziskovalec Vasiyarov GG, GS starshiynauchny zaposleni Alexeev, višji raziskovalec OsokinD.M., Doktor kemijskih znanosti Staroverov SM.). 2. Odobreni in uveljavijo gosudarstvennymsanitarnym glavni zdravnik Ruske federacije 23. oktobra 1999 D.3. Vpervye.1 predstavil. Namen in področje primeneniyaNastoyaschie Metodicheskieukazaniyaustanavlivayutsposobypodgotovki vzorcev hrane surovin in hrane produktovmetodom ekstrakcijo v trdni fazi posleduyuschegohromatograficheskogo za mikotoksinov analize in varnostne študije so dlyaprovedeniyalaboratornyh pischevoyproduktsii gossanepidsluzhby institucij Ruske federacije, kakor tudi dlyapredpriyaty in ustanove, ki opravljajo nadzor kakovosti iissledovaniya živilskih surovin in živil za skladnost z SanPiN 2.3.2.560-96 "higienske zahteve in varnost hrane surovin in pischevyhproduktov Kkachestvu" in akreditirani v skladu z ustaljeno poryadke.2. Postopek priprave probPodgotovka vzorcev vsebuje naslednje dele: - ekstrakcija preskušani predmet zagotavljanje poluchenieedinogo ekstrakt, ki vsebuje ves mikotoksinov normalizirano vdannom predmet SanPin 2.3.2.560-96-- ekstrakta priprave vzorca, ki ga trdni fazi ekstrakcije vklyuchayuschayapredvaritelnuyuochistku, kontsentrirovanieiokonchatelnuyu čiščenjem s koncentriranjem kartuše Diapak.3 . Zahteve bezopasnostiPri reagenti, topila in veschestvamineobhodimo izpolnjujejo varnostne zahteve dlyaraboty strupene, korozivne in vnetljivih snovi POGOST 12.1.005-88.4. Pogoji priprave probProtsessy opravljajo pripravo in obdelavo vzorcev raztopino izvedemo vnormalnyh pogojih pri temperaturi okolja 18 - 22grad. C.5. Aflatoksina B1 (AP-B1), zearalenona (ZON), deoksinivalenola (DON) in T-2 toksina (T-2) 5,1. Oprema, materiali, reaktivyTablitsa 1 + ------------------------------------ + ------ --- + --------- + --- + --- + | Oprema, materiali, reagenti | AT-B1 | ZON | DON | 2 || T in raztopine + ---- + ---- + ---- + ---- + | ||| 1 | 2 | 1 | 2 | | ||| var |. Var |. Var |. Var. | | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | vzorci tipa shaker | + || AVU-6C TU 64-1-2451-78 ali magnetno | || -magnetic ali mehanskim mešalom | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | analitska tehtnica z natančnostjo | + || tehtal 0,01 g +/- | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | Vrsta Mill "ciklon" QC-114 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | rotacijski uparjalnik (TS-1m2, | + || W ali 25-1173.102-84 al.) | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | naprava za vakuumsko | + || okoli -0,7 mmHg (Vodno turbino | || črpalka, vakuumska črpalka olja, | || Medical aspirator) | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | vakuumska naprava za usposabljanje | + || vzorcev (vakuumskih zbiralnikov), s sprejemniki | || vzdevki preskušanje zmogljivosti ne manj kot | || 10 cu. glej | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | priprava za izhlapevanje vzorcev | + | + | - | - | - | - || tok dušika ob segrevanju okoli ||||| | || 40 stopinj. C (suh zrak je zaželeno ||||| | || kopel) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Koncentriranje kartuša Diapak A-3 | + | + | + | + | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | Podjetje || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Osredotočanje vložek Diapak AU-3 | - | - | - | - | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | Podjetje || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Koncentriranje kartuša Diapak P-3, | + | + | + | + | - | - || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | Podjetje || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Koncentriranje kartuša Diapak H | + | - | + | - | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ZAO ||||| | ||"BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Osredotočanje vložek Diapak C, | - | + | - | + | - | - || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | Podjetje || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | medicinski klešče, 15 cm | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | kovinsko lopatico ali porcelana | + || žlico | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ravnim dnom bučke s stožčastim | + | + | + | + | - | - || zamaški s prostornino 50 kubičnih metrov. cm ||||| | || GOST 25.336 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ravnim dnom Erlenmajerica | + || (erlenmajerica) vmestimos- zastoji | || TEW 250 ali 300 cc. cm | || GOST 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | Buchner bučko s prostornino 500 kubičnih metrov. | + || See | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | Lijak zmogljivosti Bunsen | + || 200 cu. glej | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | toka ločilni kapaciteta | + || 250 cu. glej GOST 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | ostrodonnye bučke z zamaški na | + || GOST 25336 z zamenljivim konu- | || som 14/23 zmogljivost 5, 10 | || 25 cu. glej | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | hruškaste oblike bučke z zamaški na | + | + | + | + | - | - || GOST 25.336 z izmenljivimi konu- ||||| | || som 14/23 zmogljivost 10 in 25 kubičnih metrov. ||||| | || glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | merilne valje z zmogljivostjo 25, 50, | + || 100 cu. cm celice 2, po katerem GOST 1770 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | mikrosiringa s prostornino 100 kubičnih metrov. mm | + || (ali pipeti diplomiral GOST | || 20.292 izvedba 4 ali 5, 1. klasifikacijski |. || sa zmogljivosti natančnost 1 cc) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | filter papir (gosto, ozek || - || - | + | + || koporistaya počasi filtriranje ||||| | | | tanka tipa usedlina "blue ||||| | || Feed") ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | unsterilized medicinske bombaž, | + || x / b | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | acetonitril za tekočinsko kromatografijo | + || graphy, OP-3 OFS TU | || 6-09-14-2167-84, odpravljene | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | acetona, visoke čistosti, po katerem TU 6-09-3513-75 | - | + | - | - | - | - || OP-2, odpravljene ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | benzen, kakovosti reagenta, po katerem GOST 5955-75, vyder- | + | + | + | + | - | - || zhanny preko Na SO, odpravljene ||||| | || 2. april ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | heptan, heksan, XQ, TU | + | + | + | + | - | - || 6-09-3375-78 ali petroleter ||||| | || (frakcija 70-100), kakovosti reagenta, ||||| | Odpravljene || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2-propanol (izopropil alkohol) | - | - | - | - | + | + || XQ, TU 6-09-402-75, ||||| | Odpravljene || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ocetna kislina, XV, | + | + | + | + | - | - || GOST 61-75 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | kloroform, medicinska, trajno | - | - | - | - | + | + || več CaCl, odpravljene ||||| | || 2 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | metilen klorid (diklorometan) | + | + | - | - | - | - || trajali ves CaCl, ||||| | || 2 ||||| | Odpravljene || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | eter dietil, trajali ves | - | + | - | - | - | - || NaOH odpravljene ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | etil acetat (etilacetat || + || - || - || kislina), kakovosti reagenta, v skladu s GOST 22300-76, || ||| | || ohranjajo v Na-CO in rektifitsi- ||||| | || 3. februar ||||| | Rowan || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | natrijev sulfat, brezvodni, kakovosti reagenta, dne | + | + | + | + | - | - || GOST 4166-76 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | natrijev klorid, kakovosti reagenta, po katerem GOST 4233-77 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | destilirana voda | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | ekstrakcijo - 84% acetonitrila v VO | + || de, 840 kubičnih metrov. Glej acetonitril dovo- | || dyatsya na 1 liter vode ali polucha- | || etsya z destilacijo z vodno vodno | || vendar - acetonitril (1: 4) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 33% benzena v acetonitrilu - mix | + | + | + | + | - | - || 30 cu. Glej benzen in 60 kubičnih metrov. Glej aceton ||||| | || tonitrila (1: 2) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 20% acetonitrila v benzenu - 20 cu |. + | - | - | - | - | - || cm acetonitril razredčimo benzenovo ||||| | || do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2% ocetna kislina v benzenu - 2 | - | - | + | - | - | - || cu. glej razredčeno ocetno kislino ||||| | || benzena do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 5% ocetna kislina v benzenu - 5 | - | + | - | - | - | - || cu. glej razredčeno ocetno kislino ||||| | || benzena do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% etil acetata v benzenu - 10 cu. | - | + | - | + | - | - || cm acetat razredčimo z benzenom da ||||| | || 100 cu. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 25% heksana v zraku - 25 cu. glej | - | + | - | - | - | - || heksan razredčimo z dietil etrom ||||| | || do 100 kubičnih metrov. glej ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% acetona v diklorometanu - 10 cu. | - | + | - | - | - | - || razredčimo z acetonom cm 
Zdieľať na sociálnych sieťach: 

 
Príbuzný