GuruHealthInfo.com

Farmakologija hitra metoda izbire prednostnega antibiotik za zdravljenje bolnikov z okužbami gnojnimi-septični

MI Levy, JP Knots, VG Slizkova

Laboratorij za preskušanje Center MGCD

Predlagani hitro metodo pregleda med študijskim predpochtitelnyhantibiotikov gnojni odvajanje iperevyazochnyh materiali rane, ki temeljijo na sposobnostiantibiotikov pitatelnoysredy preprečuje spremembo barve, ki se pojavi, ko je rast bakterij.

Postopek smo testirali na bolnikih z gnojni oslozhneniyamii pustimo, da dobimo oceno za opredeleniyavvodimyh odmerkov antibiotika, ki lahko ustvarijo svoje izbytokv gnojni izločke.

Express-način izbire preferableantibiotics z gnojnim okužbe septični zdravljenje

M.I. Levi, Ju.G. Suchkov, V.G. Sliskova
Researchlaboratory center moskovskega mestnega dezinfekcije center

Express način izbire preferableantibiotics je na voljo v času raziskave purulentdischarges in jutranje materialov iz ran na osnovi onability antibiotikov za preprečevanje prehranske srednje colorchange na bakterije raste.

Postopek je izkazal za bolnike moških z purulentcomplications in pustimo, da se predstavi predvidevanja podatkov fordefinition antibiotikov vstopnih odmerkih, ki omogoča, da createantibiotic presežek v gnojnimi izločki.

Problem izborom prednostnega Antibiotiki dlyalecheniya nalezljive bolezni pridobljene vydayuscheesyaznachenie sredi rezistentnostivozbuditeley razširjene bolezni [7]. Poleg metodo dobro difuzijo izvestnymdisko pojavila predlozheniyaispolzovat metodo serijske razredčitve antibiotika pri uporabi Barvna vosobennosti hranilnega medija, upoštevajoč spremembe pH v času zhiznedeyatelnostimikrobov [1, 2].

Ta študija se osredotoča na poenostavitvi nedavnopredlozhennogo pospešenem postopku, ki vodi do pomanjkljivosti zgoraj ustraneniyunekotoryh metodo iz isokrascheniyu časa, potrebnega za izvedbo analize [2, 8].

Materiali in metode

Pri preizkusu sterilno 96-lunochnyeplanshety ravnim dnom namenjena dlyaimmuno encimsko testa. V Lune seriynyerazvedeniya antibiotikov smo namestili na obarvano sshagom nosilcu 4, od koncentracije 625 mcg / ml (antibiotik poslednyayakontsentratsiya 0,04 ug / ml). V kontrolnyelunki postavi le medij barva hranil. Poslevysushivaniya pri sobni temperaturi soderzhimogolunochek plošče zaprtih v plastično vrečko, ki je zaprt in je bila shranjena v hladnem zatenennommeste do uporabe. Na eno ploščo 11 pomeschalirazvedeniya antibiotike: ampicilin, benzil penicilin, streptomicin, gentamicin, tetraciklinskih, linkomicin, Claforan (cefotaksim), rifampicin, cefazolin, cefalotin, tsefat (cefamandola). Dvenadtsatayastroka tableta, v kateri posušimo krajec pitatelnayasreda, pustimo spremljanje aktivnosti prvotne barve in issleduemogomateriala tekoči sredy.Bolnye hranilnem bilo hospitaliziranih 67 gorodskoyklinicheskoy Hospital Moskva (glave. V.A.Terushkin predelek) gnojnimi izločki zbrane med vremyaperevyazki bombažno krpico kratki barve pitatelnoysredoy. Poleg ločljivo od rane v več sluchayahispolzovali ekstrakta (0,85% -en natrijev klorid) chasteypovyazki tiste, ki jih vsebuje odvajanje rane. Industrijska otbolnyh sprejeti za bakteriološki laboratorij, kjer s pomočjo barv hranilni medij gotovilisootvetstvuyuschie razredčitve testnih materijal i po0,05 ml dodamo k vsem Lune (razen nadzorni tsvetapitatelnoy mediju) predhodno pripravljenih krožnikov svysushennymi razredčin antibiotikov. V vremyamanipulyatsy z razrešnico gnojnim upoštevati varnostnih ukrepov, predvidenih v "Metodicheskihrekomendatsiyah ..." [5]. Plošče smo rahlo vstryahivalii damo v termostatu pri 37 ° C, do trenutka, ko Lune zatiranje issleduemogomateriala aktivnost, prvotna barva gojišča nadomesti nazhelty. Barva čas pretvorbe v teh kontrolni lunkahzaviselo o koncentraciji sposobnih mikroorganizmov vissleduemom snov (ponavadi 3-6 ur). Po chegopristupali na računovodske analize. Sohranenieiskhodnogo barva navedeno hranilni medij obeffektivnosti dane koncentracije antibiotika apoyavlenie rumeno - nezadostno egokontsentratsii ne more zatreti bakterijske aktivnosti.

Nevtralizacija minimalne koncentracije (MNC) določimo kot koncentracijo antibiotika (mikrograma na ml) Vposlednee Lune ne porumeni.

V poskusih so mikrobnih agentovispolzovali Colishtamm laboratorijskih kultur Escherichia K-12 in sev Staphilococcus aureus Les, kotoryevyraschivali hidrolizat o hranilni agar medijev NIIpitatelnyh (Mahackala, Rusija). Tsvetnuyupitatelnuyu medij, ki vsebuje indikatorabromkrezolpurpur 0,002% in 0,5% glukoze porabljene dvuhsortov, od katerih je eden služil za prigotovleniyarastvorov antibiotikov, in drugo - za prigotovleniyavzvesey gnojnim ran ali pacientov vzveseybakterialnyh kultur.

Volumen dodane k Lune gradiva definirano v0,05 ml, saj manjša (0,002- 0,01 0,005 0,02 ml) pra est (0,1 ml) smo podaljšali čas "manifestacije"aktivnost v kontrolni Lune.

Tabela 1 Aktivnost antibiotikov v lunochkahplansheta po 2 tednih stresanjem (200kachany / min)

preučiti
svet
Antibiotiki (MNC -mkg / ml)
APECS tsillinBenzil kazni tsillinstrep tomitsingentamicintetraciklinlinkomicinklaforanrifampicincefazolincefalotinaTsefat
po
tresenje
6251564010<0,046252.51010402.5
po skladiščenju
v hladilniku
6251564010<0,046252.510104010
Opomba: lunochkiplanshetov dodamo suspenzijo E. Coli 107m.kl. / 0,05 ml. Računovodstvo izkušnje več kot 4 ure.

Primerjava časa "manifestacije" vkontrolnyh Lune aktivnost pri hitri in uskorennommetode metoda, ki uporablja antibiotične raztopine nevyyavili znatne razlike. Prihranite čas metoda vekspress je dosežena z odpravo etapaprigotovleniya in dajanje v razvedeniyantibiotikov ploščo. Dnevna vysuschennyh antibiotiki rastvorpri dodali 0,05 ml testnega materiala v lunochkuproiskhodit v kratkem času. ispolzovaniyaekspress Rezultati metoda, pri kateri so antibiotiki zaraneevysusheny v Lune pladnju, sovpadalo z metodo rezultatamiuskorennogo, ki uporablja rastvoryantibiotika.

Prednosti izrecno-metodo mora otnestiotnositelno dolgotrajno skladiščenje v ustreznem usloviyahplanshetov z sušimo v Lune antibiotiki bezpoteri njihovo antibakterijsko aktivnost (izraz nablyudeniya6 mesecev), medtem pospešeno oskrbo metodeprihoditsya za ohranitev aktivnosti v ostatkahrastvora antibiotikov.

Stresamo plošč s posušeno antibiotik vtechenie 2 tednov pri sobni temperaturi (z nočno pereryvomna in ob koncu tedna) ni povzročilo kskolko občutnega sloughing s poverhnostilunochek posušene antibiotikov in potereantibakterialnoy aktivnost v primerjavi etipokazateli z enako za tablete, hranivshimisyapri 4 ° C (tabela. 1).

Treba je poudariti, da dobro vosproizvodimostrezultatov hiter način na različnih ploščah neredkoispolzovannyh ob različnih časih. Kot pravilo, poluchalisovpadayuschie rezultate.

Uporabili smo tujimi podjetji plošče (Linbro, ZDA) in plošče iz domače proizvodnje (MEDPOLIMER, Rusija). Nismo nobenih signifikantnih razlik (tabela. 2) aktivnostiraznyh antibiotikov.

V študiji gnojnim rane myopredelyali torej nepogrešljivo in se nanašajo na učinkovitih antibiotikov"B" (Snemljiva rane mikroflora okazalaschuvstvitelnoy na določen antibiotik) ilineeffektivnym "leta" (mikroflora snemljivi ranyokazalas odporni na določen antibiotik). 9obsledovannyh bolnikov v enem primeru, ni bila ena izmed učinkovito 11antibiotikov. V pyatisluchayah neučinkovite antibiotiki predstavljali bolshepoloviny dne 11., v drugih primerih pa so bili meneepoloviny. Pri dodeljevanju antibiotiki učinkoviti ilineeffektivnym uporablja numerične podatke MIC vrednosti iz [7, 9].

Za izbiro najbolj učinkovite antibiotikovispolzovali vrednosti večnacionalnih. Včasih smo izbrali neodin in dva antibiotike, še posebej, če oniprinadlezhali v različne skupine.

Postopek za določanje pokazateleyosnovyvalas računano na kombinaciji dobljen s analizeznacheny torej nepogrešljivo in literature [3, 4, 7, 9]. Sprva sta bili dve določiti količine po literaturi: doz antibiotiki in sorodne antibiotike imkontsentratsy serumu (običajno otmechayutnaivysshie koncentracija). Tako, da se prvi znesek navtoruyu dal neko pomožno spremenljivko, tako kotoruyuoboznachali "raspredeleniyaantibiotika serumski faktor". To razmerje neyavlyaetsya vsaka trajna kot klirensantibiotika vodi k povečani stopnji, vendar myego uporablja kot vodnik dlyaraschetov. Nadalje predvidevamo, da je bil izpust neposredno vgnoynom zametnonizhe antibiotik koncentracije kot v serumu raznitsupredpolozhitelno ocenjevanju teh 10-krat. V tem primeru koeffitsientraspredeleniya antibiotik gnojni vozrastetv ​​10-krat v primerjavi s koeficientom syvorotki.Teper za določitev odmerka antibiotik dajati da dobimo MNC, prikazane v tabeli 3, da se obratnymhodom in večkrat to povzročilo MNC koeffitsientraspredeleniya antibiotiki za izpust gnojni. Etoproizvedenie kaže, v skladu s predpostavko, na dozuantibiotika treba uvesti, da bi našli izcedek vgnoynom hitro metoda OLS vukazannoy koncentracije Tabela 3. Za ustoychivogoblagopriyatnogo posledica antibiotičnega neobhodimosozdat znatno presega serumu antibiotik nadznacheniem IPC. Zato bomo predstavili v tabeli 3 takuyuraschetnuyu dozo antibiotika, ki moglasuschestvenno presega gnojni OLS vrednosti, ki poveča odmerek za 10-krat v primerjavi SDRAM zagotavlja doseganje kontsentratsiiantibiotika enaka MNC. Še vedno je treba upoštevati popravke, povezane z rejo rane peredissledovaniem izrecno metodo, če vsaj določeno stopnjo razvedeniyaizvestna.

Tabela 2 Primerjava aktivnostiantibiotikov posušimo v domačem Lune (MEDPOLIMER) in tuje (Linbro) Tablet

proizvodnja
tablete
številka
tableta
Antibiotiki (MNC -mkg / ml)
APECS tsillinBenzil kazni tsillinstrep tomitsinGhent mitsintetraciklinlinkomicinklaforanrifampicincefazolincefalotinaTsefat
MEDPOLIMER1>625625402.5<0,046252.540404010
2>6256254040<0,046252.540404010
Linbros1>6256254040<0,046252.540404010
2>625>62516540<0,04>6252.540404010
Opomba: Pogoji zajemajo tistimi, ki so v tabeli 1.

TABELA 3 Vpliv antibiotikov na bolnikov gnoynoeotdelyaemoe za določitev MNC *) hiter način in nastavitev izračunana dozypredpochitaemogo antibiotik, da doseže svoj odvečno rane votdelyaemom

NN
p / p
Fahmy Leah
bolečina stopala
diagnozaAntibiotiki (MNC -mkg / ml) najbolj
učinkovit
antibiotik
Intoduction
anti živih organizmih ka
koeficient
dis-določitev
anti biotsko
v syvo Rothka
Ras Čet Naya
Sotho-jezične
dozadlya
DOS tizhe Nia
MNCs v ognjišču
Čas do zheniya (mg)
poravnave
Sotho-jezične
dozadlya
DOS tizhe Nia
Koča TKA
anti biotsko
(10 * MC)
ognjišča
Čas do zheniya (mg)
Opti mal Naya
vsak dan
odmerek
anti bio teak
(Mg)
Mak Sim Naročanje
vsak dan
odmerek
anti bio teak
(Mg)
APECS cyl lengBen ZIL pene itsil lengaStreit PTOM itsinGent s chingTet ratsi klinLin Qing KomiKLA rane PhoReef APECS chingCeph azo lengCeph scarlet tinFat Tse
1L-Vgnojni
shin poškodbe
40 imajo0,6 H625 imajo2.5 UCH0,6 H625 imajo0,6 H<0,04 Ч0,6 H0,15 W0,6 Hrifampicin
cefalotina
znotraj
v /
100000
20000
40
30
400
300
900
2.000
1.200
8000
2To-kemgnojni
rana po
stegna amputacija
<0,04 Ч156 imajo156 imajo156 imajo0,6 H625 imajo<0,04 Ч10 imajo10 ur156 imajo2,5 Hampicilin
klaforan
v /
v /
200000
10.000
80
4
800
40
3000
1.000
14000
2.000
3Dem, vgnojni
rana po
ozebline
2,5 H<0,04 Ч10 UCH2.5 UCH<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Чbenzil penicilin
tetra ciklin
v /
znotraj
700000
100000
300
40
3000
400
6000
1.000
36000
2.000
4Z-Vgnojni
shin poškodbe
>625 imajo>625 imajo>625 imajo625 imajo625 imajo625 imajo40 imajo156 imajo625 imajo625 imajo625 imajo-
5El-Ngnojni
Poškodba stopala
40 imajo2.5 V625 imajo625 imajo40 imajo>625 imajo0,6 H2.5 UCH40 imajo40 imajo10 UCHklaforanv /10.000606002.00012000
6Ar-ysuppuration po
stopala ozebline
156 imajo40 imajo156 imajo>625 imajo156 imajo625 imajo<0,04 Ч10 imajo40 imajo40 imajo2,5 Hklaforanv /10.0004402.00012000
7Ci-Vgnile rane
po amputaciji
stegna
625 imajo156 imajo625 imajo2,5 H<0,04 Ч>625 imajo2,5 H40 imajo10 ur156 imajo2,5 Htetraciklinznotraj100000404001.0002.000
8.bvpooperativna prehrana
gnile rane
vpahovoy območje
625 imajo40 imajo156 imajo2.5 UCH0,15 W156 imajo<0,04 Ч2.5 UCH10 ur40 imajo0,6 Hklaforanv /10.0004402.00012000
9.za vzavrite
zadnjice
40 imajo2.5 UCH2,5 H0,15 W0,6 H0,6 H0,6 H<0,04 Ч0,15 W<0,04 Ч0,15 Wcefalotinav /20000303002.0008000
Opomba: -mikroflora rane praznjenja odporna na deystviyuantibiotika- B - mikroflore praznjenja ranychuvstvitelna k dejanju antibiotika- UCH - mikrofloraotdelyaemogo rane zmerno občutljiv na deystviyuantibiotika.
Desna polovica tabele je sestavljen naosnovanii podatke, navedene v literaturi (glej pojasnila, določene v besedilu).
*) OLS - minimalnayaneytralizuyuschaya koncentracije.

Zadnja dva stolpca v tabeli 3 in vsebuje informacije oboptimalnoy največjo dozamiantibiotikov ki so sestavljeni iz sovremennyhliteraturnyh virov [3, 4, 9]. So pozvolyayutsopostavit izračunane vrednosti vpiše effektivnyhantibiotikov optimalni odmerek in odmerek omejevanje. Tudi v vseh 9 primerih je odmerek, ki omogočajo, da ustvarite izbytokantibiotika v rane razrešnico, so nižje od tistih kotoryeschitayutsya optimalna. Če ne uporabljajo metodyotbora učinkovitih antibiotikov in primenyatantibiotiki priporočljivo določitev občutljivosti vozbuditelyai [9], je pogosto priporočljivo za koncentracijo sozdatizbytochnuyu konkretnoybolezni antibiotik verjetno (čeprav MNKsostavlyaet 10 ug / ml), saj izrazito prevyshaetmaksimalno dovoljeni odmerek.

Izkazalo se je, da lahko le ispolzovatne izcedek gnojen, ampak tudi citat prelivi ilisalfetki naloženih na rano za hitro metodo. V nekaterih primerih je bil uporabljen kot myparallelno odvajanje gnojni, tako iekstrakt del obliža, ter smo pripravili kot na splošno enakih rezultatov. Ena takihprotokolov podani v tabeli 4.

Razprava o rezultatih

Pospešena učinkovit antibiotik izbirna metoda [1, 5] predlaga uporabo raztopin antibiotikov, ki s praktičnega vidika manj Priročni chemispolzovanie tablete z vnaprej vysushennymiantibiotikami hitra metoda, kjer le še bakteriologuostaetsya Lune 0,05 mlissleduemogo material plošče, in nato sledijo konversieytsveta v inkubatorju. Zmanjševanje vekspress času analitsko metodo se doseže z odpravo otneobhodimosti preživijo čas kuhanja razvedeniyantibiotikov v Lune.

hitra metoda zagotavlja prednost vozmozhnostsohraneniya tablete so z vnaprej vysushennymiantibiotikami, da ni nobene razlike vantibakterialnoy dejavnost v domačih iamerikanskih tablet, brez učinka mnogochasovogovstryahivaniya pripravljen tablete in rezultati vysokayavosproizvodimost. Metodologija izrecno metodastol obdavčevanja, ki se lahko izvede, poslenadlezhaschey usposabljanje medicinskih sester.

V tem prispevku nov izraz uporablja v nevtralizacijo minimalno koncentracijo - MNCs kotorayane sovpada z definicijo minimalne podavlyayuscheykontsentratsii - IPC. Ta zadnja številka MPKopredelyaetsya Postopek diska difuzija v otnositelnostandartnyh pogojih (uporablja na agarju opredelennoechislo mikrobnih celic, čemur sledi merjenje rast bakterij in zonyzaderzhki prenese premer vMPK te cone). Kot je za večnacionalna podjetja, izhajamo iz dejstva, chtootdelyaemoe rane na ima možnost spremeniti prvotno barvo usloviyahtermostata hranil srednje vzhelty in antibiotik nevtralizira ta učinek. Ko etomvelichina OLS v veliki meri odvisna od vrste (-ih) mikroorganizma pri odvajanju in njene primeru kontsentratsii.V le registrirani barvni učinek nevtralizacije. Študija Lunes sneizmennym pridelka barva hranilni medij je pokazala, da zazna vnekotoryh zhiznesposobnyebakterii primerov, čeprav v majhnem številu, v drugih pa sluchayahih ni zaznati. Razmeroma hitro opredelenieMNK omogoča, da oceni aktivnost različnih antibiotikov votnoshenii mikrobov razrešnico razširjanje površinsko ranyobychno dnevno vzorčenje materiala za raziskave, v tovremya kot je opredelitev v IPC zamuja neskolkosutok, ko se lahko razmere v rani spremeniti.

TABELA 4 Primerjava delovanja antibiotikov na rezultatovopredeleniya issledovaniignoynogo ločili in odsek ekstrakt povoj na ranebolnogo BV.

preučiti
Material
Antibiotiki (MNC -mkg / ml)
APECS tsillinBenzil kazni tsillinstrep tomitsinGhent mitsintetraciklinlinkomicinklaforanrifampicincefazolincefalotinaTsefat
izcedek gnojni625401562.50,15156<0,042.510400.6
izvlečka Obveza za rano625401562.50,15156<0,042.52.5100.6

Izračunane vrednosti vnesene pacientovega telesa omogoči dozantibiotikov otnosheniivozmozhnogo voden v presežno antibiotika izpust gnojni. Etiraschety temelji na nekaterih verjetno ne vsegdakorrektnyh predpostavk. Izračunajte gradient padeniyakontsentratsii antibiotik serum ne samo gnoynomuotdelyaemomu, nekako smo raspolagaemlish predpostavke v zvezi s tem. Kot je za izbytkaantibiotika v rane razrešnice, tukaj netdostovernyh informacij, čeprav ne bomo izgubili nadezhdurazrabotat ustrezne metodologije v nedalekombuduschem. V vsakem primeru je zaželeno, da imajo podobnymisvedeniyami za vsakega posameznega bolnika, ki potrebuje antibiotično terapijo.

Pomemben olajšave za določitev OLS mozhnoschitat mogoče analizirati ne le gnoynogootdelyaemogo ampak elementi prelivi. Vposlednee primeru bi se lahko bali massivnyhkolichestv naključni bakterije, vendar ispolzovaniesterilizovannyh prelivi verjetno zavrnili skrbi, kot je razvidno iz nashnebolshoy izkušenj. V relativno kratkem času preživel hitri način, mogoče neznachitelnyekolichestva tuje bakterije ne morejo effektivnokonkurirovat z mikrobne flore gnojni otdelyaemogoiz sposobnost, da spremenite barvo medija kulture.

Smotrna izbor antibiotika sestoji izbystrogo vvodimoydozy in učinkovitih antibiotikov sposobna ustvariti presežek v leziji, prepričanje, da bo tak presežek, in določitev trajanja zdravljenja z antibiotikov.Zhelatelno s temi priporočili iskhodyane so izbrani izmed splošnih ugotovitev, in zlasti za kazhdogobolnogo. Prve tri kazalnike bi morali dobiti vrezultate sodelovanju, ki jih klinični zdravnik klinicheskogobakteriologa in Klinični farmakolog in dlitelnostlecheniya - ne, to je pristojnost lečečega zdravnika, ki temelji na rezultatih prvih dneh primeneniyaetiotropnogo zdravljenja.

ugotovitve

1. Uporaba tablete s predhodno posušili vlunochkah antibiotikov zmanjša čas, porabljen naotbor najbolj učinkovitih antibiotikov ter se suschestvennouproschaet analizo.

2. Hitra metoda za izbiro učinkovitih antibiotikov v analizi bylaprobirovan gnojni materiala iperevyazochnogo rane več podatkovnih bolnyh.Raschetnye temeljijo na rezultatih issledovaniyakonkretnyh bolnikov v povezavi s podatki naberejo iz literature, pozvoliliotsenit možne odmerke antibiotikov potrebnih dlyasoozdaniya njihovi višji pri odvajanju gnojni.

literatura

1. Levy MI, Gorozhankina IA, Sagatovsky L.A.Bystry bakterialnyhkultur metoda določanja občutljivosti različnih antibiotikov v tekoči srede.Antibiotiki, 1967, N1, str. 57-62.
2. Levi MI, SuchkovYu.G., Prokhorov VJ, Terushkin VA Pospešeni otboreffektivnyh antibiotiki za zdravljenje okužb bolnyhgospitalnymi. Dezinfekcijo primeru 1999, N3, str. 18-24.
3. Zdravila zarubezhnyhfirm v Rusiji. Imenik. M.,"Astrafarmservis"1993.
4. Mashkovskii I.D.Lekarstvennye pomeni. Zvezek 2, Ed. 13, Moskva, 1998.
5.Metodicheskie priporočila za pospešeno otborueffektivnyh antibiotiki za zdravljenje okužb bolnyhgospitalnymi. Odobreno s strani Ministrstva za zdravje Ruske federacije 10.01.2000 g.za N1100 / 26-0-117. Dezinfekcija poslovanje v letu 1999, N3, Dodatek.
6. Navashin SM, IP Fomina Ratsionalnayaantibiotikoterapiya. Ed. 4, Moskva, 1982.
7. SidorenkoS.V., Kolupaev VE Antibiotikogrammy: disk metoda difuzije. Razlaga rezultatov.Izd. skupina "Arina"1999.
8. SidorenkoS.V., Fedorovich V.Yu. Pospešena Postopek opredeleniyaminimalnoy inhibitorne koncentracije antibiotikov naplanshetnyh spektrofotometrih z vgrajenim termostatom.V knjige.: "Bolnišnične okužbe - problemyepidemiologii, ambulanta, diagnoza, zdravljenje iprofilaktiki"M., 1999, str. 220-221.
9. SenfordDzh. Gilbert, D., J. Gerberding. Sandy M. Antimikrobnayaterapiya. Ed. 23, Moskva, 1996.

MI Levy, JP Knots, VG Slizkova

Laboratorij za preskušanje Center MGCD




Predlagani hitro metodo pregleda med študijskim predpochtitelnyhantibiotikov gnojni odvajanje iperevyazochnyh materiali rane, ki temeljijo na sposobnostiantibiotikov pitatelnoysredy preprečuje spremembo barve, ki se pojavi, ko je rast bakterij.

Postopek smo testirali na bolnikih z gnojni oslozhneniyamii pustimo, da dobimo oceno za opredeleniyavvodimyh odmerkov antibiotika, ki lahko ustvarijo svoje izbytokv gnojni izločke.

Express-način izbire preferableantibiotics z gnojnim okužbe septični zdravljenje

M.I. Levi, Ju.G. Suchkov, V.G. Sliskova
Researchlaboratory center moskovskega mestnega dezinfekcije center

Express način izbire preferableantibiotics je na voljo v času raziskave purulentdischarges in jutranje materialov iz ran na osnovi onability antibiotikov za preprečevanje prehranske srednje colorchange na bakterije raste.

Postopek je izkazal za bolnike moških z purulentcomplications in pustimo, da se predstavi predvidevanja podatkov fordefinition antibiotikov vstopnih odmerkih, ki omogoča, da createantibiotic presežek v gnojnimi izločki.

Problem izborom prednostnega Antibiotiki dlyalecheniya nalezljive bolezni pridobljene vydayuscheesyaznachenie sredi rezistentnostivozbuditeley razširjene bolezni [7]. Poleg metodo dobro difuzijo izvestnymdisko pojavila predlozheniyaispolzovat metodo serijske razredčitve antibiotika pri uporabi Barvna vosobennosti hranilnega medija, upoštevajoč spremembe pH v času zhiznedeyatelnostimikrobov [1, 2].

Ta študija se osredotoča na poenostavitvi nedavnopredlozhennogo pospešenem postopku, ki vodi do pomanjkljivosti zgoraj ustraneniyunekotoryh metodo iz isokrascheniyu časa, potrebnega za izvedbo analize [2, 8].

Materiali in metode

Pri preizkusu sterilno 96-lunochnyeplanshety ravnim dnom namenjena dlyaimmuno encimsko testa. V Lune seriynyerazvedeniya antibiotikov smo namestili na obarvano sshagom nosilcu 4, od koncentracije 625 mcg / ml (antibiotik poslednyayakontsentratsiya 0,04 ug / ml). V kontrolnyelunki postavi le medij barva hranil. Poslevysushivaniya pri sobni temperaturi soderzhimogolunochek plošče zaprtih v plastično vrečko, ki je zaprt in je bila shranjena v hladnem zatenennommeste do uporabe. Na eno ploščo 11 pomeschalirazvedeniya antibiotike: ampicilin, benzil penicilin, streptomicin, gentamicin, tetraciklinskih, linkomicin, Claforan (cefotaksim), rifampicin, cefazolin, cefalotin, tsefat (cefamandola). Dvenadtsatayastroka tableta, v kateri posušimo krajec pitatelnayasreda, pustimo spremljanje aktivnosti prvotne barve in issleduemogomateriala tekoči sredy.Bolnye hranilnem bilo hospitaliziranih 67 gorodskoyklinicheskoy Hospital Moskva (glave. V.A.Terushkin predelek) gnojnimi izločki zbrane med vremyaperevyazki bombažno krpico kratki barve pitatelnoysredoy. Poleg ločljivo od rane v več sluchayahispolzovali ekstrakta (0,85% -en natrijev klorid) chasteypovyazki tiste, ki jih vsebuje odvajanje rane. Industrijska otbolnyh sprejeti za bakteriološki laboratorij, kjer s pomočjo barv hranilni medij gotovilisootvetstvuyuschie razredčitve testnih materijal i po0,05 ml dodamo k vsem Lune (razen nadzorni tsvetapitatelnoy mediju) predhodno pripravljenih krožnikov svysushennymi razredčin antibiotikov. V vremyamanipulyatsy z razrešnico gnojnim upoštevati varnostnih ukrepov, predvidenih v "Metodicheskihrekomendatsiyah ..." [5]. Plošče smo rahlo vstryahivalii damo v termostatu pri 37 ° C, do trenutka, ko Lune zatiranje issleduemogomateriala aktivnost, prvotna barva gojišča nadomesti nazhelty. Barva čas pretvorbe v teh kontrolni lunkahzaviselo o koncentraciji sposobnih mikroorganizmov vissleduemom snov (ponavadi 3-6 ur). Po chegopristupali na računovodske analize. Sohranenieiskhodnogo barva navedeno hranilni medij obeffektivnosti dane koncentracije antibiotika apoyavlenie rumeno - nezadostno egokontsentratsii ne more zatreti bakterijske aktivnosti.

Nevtralizacija minimalne koncentracije (MNC) določimo kot koncentracijo antibiotika (mikrograma na ml) Vposlednee Lune ne porumeni.

V poskusih so mikrobnih agentovispolzovali Colishtamm laboratorijskih kultur Escherichia K-12 in sev Staphilococcus aureus Les, kotoryevyraschivali hidrolizat o hranilni agar medijev NIIpitatelnyh (Mahackala, Rusija). Tsvetnuyupitatelnuyu medij, ki vsebuje indikatorabromkrezolpurpur 0,002% in 0,5% glukoze porabljene dvuhsortov, od katerih je eden služil za prigotovleniyarastvorov antibiotikov, in drugo - za prigotovleniyavzvesey gnojnim ran ali pacientov vzveseybakterialnyh kultur.

Volumen dodane k Lune gradiva definirano v0,05 ml, saj manjša (0,002- 0,01 0,005 0,02 ml) pra est (0,1 ml) smo podaljšali čas "manifestacije"aktivnost v kontrolni Lune.

Tabela 1 Aktivnost antibiotikov v lunochkahplansheta po 2 tednih stresanjem (200kachany / min)

preučiti
svet
Antibiotiki (MNC -mkg / ml)
APECS tsillinBenzil kazni tsillinstrep tomitsingentamicintetraciklinlinkomicinklaforanrifampicincefazolincefalotinaTsefat
po
tresenje
6251564010<0,046252.51010402.5
po skladiščenju
v hladilniku
6251564010<0,046252.510104010
Opomba: lunochkiplanshetov dodamo suspenzijo E. Coli 107m.kl. / 0,05 ml. Računovodstvo izkušnje več kot 4 ure.

Primerjava časa "manifestacije" vkontrolnyh Lune aktivnost pri hitri in uskorennommetode metoda, ki uporablja antibiotične raztopine nevyyavili znatne razlike. Prihranite čas metoda vekspress je dosežena z odpravo etapaprigotovleniya in dajanje v razvedeniyantibiotikov ploščo. Dnevna vysuschennyh antibiotiki rastvorpri dodali 0,05 ml testnega materiala v lunochkuproiskhodit v kratkem času. ispolzovaniyaekspress Rezultati metoda, pri kateri so antibiotiki zaraneevysusheny v Lune pladnju, sovpadalo z metodo rezultatamiuskorennogo, ki uporablja rastvoryantibiotika.

Prednosti izrecno-metodo mora otnestiotnositelno dolgotrajno skladiščenje v ustreznem usloviyahplanshetov z sušimo v Lune antibiotiki bezpoteri njihovo antibakterijsko aktivnost (izraz nablyudeniya6 mesecev), medtem pospešeno oskrbo metodeprihoditsya za ohranitev aktivnosti v ostatkahrastvora antibiotikov.

Stresamo plošč s posušeno antibiotik vtechenie 2 tednov pri sobni temperaturi (z nočno pereryvomna in ob koncu tedna) ni povzročilo kskolko občutnega sloughing s poverhnostilunochek posušene antibiotikov in potereantibakterialnoy aktivnost v primerjavi etipokazateli z enako za tablete, hranivshimisyapri 4 ° C (tabela. 1).

Treba je poudariti, da dobro vosproizvodimostrezultatov hiter način na različnih ploščah neredkoispolzovannyh ob različnih časih. Kot pravilo, poluchalisovpadayuschie rezultate.

Uporabili smo tujimi podjetji plošče (Linbro, ZDA) in plošče iz domače proizvodnje (MEDPOLIMER, Rusija). Nismo nobenih signifikantnih razlik (tabela. 2) aktivnostiraznyh antibiotikov.

V študiji gnojnim rane myopredelyali torej nepogrešljivo in se nanašajo na učinkovitih antibiotikov"B" (Snemljiva rane mikroflora okazalaschuvstvitelnoy na določen antibiotik) ilineeffektivnym "leta" (mikroflora snemljivi ranyokazalas odporni na določen antibiotik). 9obsledovannyh bolnikov v enem primeru, ni bila ena izmed učinkovito 11antibiotikov. V pyatisluchayah neučinkovite antibiotiki predstavljali bolshepoloviny dne 11., v drugih primerih pa so bili meneepoloviny. Pri dodeljevanju antibiotiki učinkoviti ilineeffektivnym uporablja numerične podatke MIC vrednosti iz [7, 9].

Za izbiro najbolj učinkovite antibiotikovispolzovali vrednosti večnacionalnih. Včasih smo izbrali neodin in dva antibiotike, še posebej, če oniprinadlezhali v različne skupine.

Postopek za določanje pokazateleyosnovyvalas računano na kombinaciji dobljen s analizeznacheny torej nepogrešljivo in literature [3, 4, 7, 9]. Sprva sta bili dve določiti količine po literaturi: doz antibiotiki in sorodne antibiotike imkontsentratsy serumu (običajno otmechayutnaivysshie koncentracija). Tako, da se prvi znesek navtoruyu dal neko pomožno spremenljivko, tako kotoruyuoboznachali "raspredeleniyaantibiotika serumski faktor". To razmerje neyavlyaetsya vsaka trajna kot klirensantibiotika vodi k povečani stopnji, vendar myego uporablja kot vodnik dlyaraschetov. Nadalje predvidevamo, da je bil izpust neposredno vgnoynom zametnonizhe antibiotik koncentracije kot v serumu raznitsupredpolozhitelno ocenjevanju teh 10-krat. V tem primeru koeffitsientraspredeleniya antibiotik gnojni vozrastetv ​​10-krat v primerjavi s koeficientom syvorotki.Teper za določitev odmerka antibiotik dajati da dobimo MNC, prikazane v tabeli 3, da se obratnymhodom in večkrat to povzročilo MNC koeffitsientraspredeleniya antibiotiki za izpust gnojni. Etoproizvedenie kaže, v skladu s predpostavko, na dozuantibiotika treba uvesti, da bi našli izcedek vgnoynom hitro metoda OLS vukazannoy koncentracije Tabela 3. Za ustoychivogoblagopriyatnogo posledica antibiotičnega neobhodimosozdat znatno presega serumu antibiotik nadznacheniem IPC. Zato bomo predstavili v tabeli 3 takuyuraschetnuyu dozo antibiotika, ki moglasuschestvenno presega gnojni OLS vrednosti, ki poveča odmerek za 10-krat v primerjavi SDRAM zagotavlja doseganje kontsentratsiiantibiotika enaka MNC. Še vedno je treba upoštevati popravke, povezane z rejo rane peredissledovaniem izrecno metodo, če vsaj določeno stopnjo razvedeniyaizvestna.

Tabela 2 Primerjava aktivnostiantibiotikov posušimo v domačem Lune (MEDPOLIMER) in tuje (Linbro) Tablet

proizvodnja
tablete
številka
tableta
Antibiotiki (MNC -mkg / ml)
APECS tsillinBenzil kazni tsillinstrep tomitsinGhent mitsintetraciklinlinkomicinklaforanrifampicincefazolincefalotinaTsefat
MEDPOLIMER1>625625402.5<0,046252.540404010
2>6256254040<0,046252.540404010
Linbros1>6256254040<0,046252.540404010
2>625>62516540<0,04>6252.540404010
Opomba: Pogoji zajemajo tistimi, ki so v tabeli 1.

TABELA 3 Vpliv antibiotikov na bolnikov gnoynoeotdelyaemoe za določitev MNC *) hiter način in nastavitev izračunana dozypredpochitaemogo antibiotik, da doseže svoj odvečno rane votdelyaemom

NN
p / p
Fahmy Leah
bolečina stopala
diagnozaAntibiotiki (MNC -mkg / ml) najbolj
učinkovit
antibiotik
Intoduction
anti živih organizmih ka
koeficient
dis-določitev
anti biotsko
v syvo Rothka
Ras Čet Naya
Sotho-jezične
dozadlya
DOS tizhe Nia
MNCs v ognjišču
Čas do zheniya (mg)
poravnave
Sotho-jezične
dozadlya
DOS tizhe Nia
Koča TKA
anti biotsko
(10 * MC)
ognjišča
Čas do zheniya (mg)
Opti mal Naya
vsak dan
odmerek
anti bio teak
(Mg)
Mak Sim Naročanje
vsak dan
odmerek
anti bio teak
(Mg)
APECS cyl lengBen ZIL pene itsil lengaStreit PTOM itsinGent s chingTet ratsi klinLin Qing KomiKLA rane PhoReef APECS chingCeph azo lengCeph scarlet tinFat Tse
1L-Vgnojni
shin poškodbe
40 imajo0,6 H625 imajo2.5 UCH0,6 H625 imajo0,6 H<0,04 Ч0,6 H0,15 W0,6 Hrifampicin
cefalotina
znotraj
v /
100000
20000
40
30
400
300
900
2.000
1.200
8000
2To-kemgnojni
rana po
stegna amputacija
<0,04 Ч156 imajo156 imajo156 imajo0,6 H625 imajo<0,04 Ч10 imajo10 ur156 imajo2,5 Hampicilin
klaforan
v /
v /
200000
10.000
80
4
800
40
3000
1.000
14000
2.000
3Dem, vgnojni
rana po
ozebline
2,5 H<0,04 Ч10 UCH2.5 UCH<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Ч<0,04 Чbenzil penicilin
tetra ciklin
v /
znotraj
700000
100000
300
40
3000
400
6000
1.000
36000
2.000
4Z-Vgnojni
shin poškodbe
>625 imajo>625 imajo>625 imajo625 imajo625 imajo625 imajo40 imajo156 imajo625 imajo625 imajo625 imajo-
5El-Ngnojni
Poškodba stopala
40 imajo2.5 V625 imajo625 imajo40 imajo>625 imajo0,6 H2.5 UCH40 imajo40 imajo10 UCHklaforanv /10.000606002.00012000
6Ar-ysuppuration po
stopala ozebline
156 imajo40 imajo156 imajo>625 imajo156 imajo625 imajo<0,04 Ч10 imajo40 imajo40 imajo2,5 Hklaforanv /10.0004402.00012000
7Ci-Vgnile rane
po amputaciji
stegna
625 imajo156 imajo625 imajo2,5 H<0,04 Ч>625 imajo2,5 H40 imajo10 ur156 imajo2,5 Htetraciklinznotraj100000404001.0002.000
8.bvpooperativna prehrana
gnile rane
vpahovoy območje
625 imajo40 imajo156 imajo2.5 UCH0,15 W156 imajo<0,04 Ч2.5 UCH10 ur40 imajo0,6 Hklaforanv /10.0004402.00012000
9.za vzavrite
zadnjice
40 imajo2.5 UCH2,5 H0,15 W0,6 H0,6 H0,6 H<0,04 Ч0,15 W<0,04 Ч0,15 Wcefalotinav /20000303002.0008000
Opomba: -mikroflora rane praznjenja odporna na deystviyuantibiotika- B - mikroflore praznjenja ranychuvstvitelna k dejanju antibiotika- UCH - mikrofloraotdelyaemogo rane zmerno občutljiv na deystviyuantibiotika.
Desna polovica tabele je sestavljen naosnovanii podatke, navedene v literaturi (glej pojasnila, določene v besedilu).
*) OLS - minimalnayaneytralizuyuschaya koncentracije.

Zadnja dva stolpca v tabeli 3 in vsebuje informacije oboptimalnoy največjo dozamiantibiotikov ki so sestavljeni iz sovremennyhliteraturnyh virov [3, 4, 9]. So pozvolyayutsopostavit izračunane vrednosti vpiše effektivnyhantibiotikov optimalni odmerek in odmerek omejevanje. Tudi v vseh 9 primerih je odmerek, ki omogočajo, da ustvarite izbytokantibiotika v rane razrešnico, so nižje od tistih kotoryeschitayutsya optimalna. Če ne uporabljajo metodyotbora učinkovitih antibiotikov in primenyatantibiotiki priporočljivo določitev občutljivosti vozbuditelyai [9], je pogosto priporočljivo za koncentracijo sozdatizbytochnuyu konkretnoybolezni antibiotik verjetno (čeprav MNKsostavlyaet 10 ug / ml), saj izrazito prevyshaetmaksimalno dovoljeni odmerek.

Izkazalo se je, da lahko le ispolzovatne izcedek gnojen, ampak tudi citat prelivi ilisalfetki naloženih na rano za hitro metodo. V nekaterih primerih je bil uporabljen kot myparallelno odvajanje gnojni, tako iekstrakt del obliža, ter smo pripravili kot na splošno enakih rezultatov. Ena takihprotokolov podani v tabeli 4.

Razprava o rezultatih

Pospešena učinkovit antibiotik izbirna metoda [1, 5] predlaga uporabo raztopin antibiotikov, ki s praktičnega vidika manj Priročni chemispolzovanie tablete z vnaprej vysushennymiantibiotikami hitra metoda, kjer le še bakteriologuostaetsya Lune 0,05 mlissleduemogo material plošče, in nato sledijo konversieytsveta v inkubatorju. Zmanjševanje vekspress času analitsko metodo se doseže z odpravo otneobhodimosti preživijo čas kuhanja razvedeniyantibiotikov v Lune.

hitra metoda zagotavlja prednost vozmozhnostsohraneniya tablete so z vnaprej vysushennymiantibiotikami, da ni nobene razlike vantibakterialnoy dejavnost v domačih iamerikanskih tablet, brez učinka mnogochasovogovstryahivaniya pripravljen tablete in rezultati vysokayavosproizvodimost. Metodologija izrecno metodastol obdavčevanja, ki se lahko izvede, poslenadlezhaschey usposabljanje medicinskih sester.

V tem prispevku nov izraz uporablja v nevtralizacijo minimalno koncentracijo - MNCs kotorayane sovpada z definicijo minimalne podavlyayuscheykontsentratsii - IPC. Ta zadnja številka MPKopredelyaetsya Postopek diska difuzija v otnositelnostandartnyh pogojih (uporablja na agarju opredelennoechislo mikrobnih celic, čemur sledi merjenje rast bakterij in zonyzaderzhki prenese premer vMPK te cone). Kot je za večnacionalna podjetja, izhajamo iz dejstva, chtootdelyaemoe rane na ima možnost spremeniti prvotno barvo usloviyahtermostata hranil srednje vzhelty in antibiotik nevtralizira ta učinek. Ko etomvelichina OLS v veliki meri odvisna od vrste (-ih) mikroorganizma pri odvajanju in njene primeru kontsentratsii.V le registrirani barvni učinek nevtralizacije. Študija Lunes sneizmennym pridelka barva hranilni medij je pokazala, da zazna vnekotoryh zhiznesposobnyebakterii primerov, čeprav v majhnem številu, v drugih pa sluchayahih ni zaznati. Razmeroma hitro opredelenieMNK omogoča, da oceni aktivnost različnih antibiotikov votnoshenii mikrobov razrešnico razširjanje površinsko ranyobychno dnevno vzorčenje materiala za raziskave, v tovremya kot je opredelitev v IPC zamuja neskolkosutok, ko se lahko razmere v rani spremeniti.

TABELA 4 Primerjava delovanja antibiotikov na rezultatovopredeleniya issledovaniignoynogo ločili in odsek ekstrakt povoj na ranebolnogo BV.

preučiti
Material
Antibiotiki (MNC -mkg / ml)
APECS tsillinBenzil kazni tsillinstrep tomitsinGhent mitsintetraciklinlinkomicinklaforanrifampicincefazolincefalotinaTsefat
izcedek gnojni625401562.50,15156<0,042.510400.6
izvlečka Obveza za rano625401562.50,15156<0,042.52.5100.6

Izračunane vrednosti vnesene pacientovega telesa omogoči dozantibiotikov otnosheniivozmozhnogo voden v presežno antibiotika izpust gnojni. Etiraschety temelji na nekaterih verjetno ne vsegdakorrektnyh predpostavk. Izračunajte gradient padeniyakontsentratsii antibiotik serum ne samo gnoynomuotdelyaemomu, nekako smo raspolagaemlish predpostavke v zvezi s tem. Kot je za izbytkaantibiotika v rane razrešnice, tukaj netdostovernyh informacij, čeprav ne bomo izgubili nadezhdurazrabotat ustrezne metodologije v nedalekombuduschem. V vsakem primeru je zaželeno, da imajo podobnymisvedeniyami za vsakega posameznega bolnika, ki potrebuje antibiotično terapijo.

Pomemben olajšave za določitev OLS mozhnoschitat mogoče analizirati ne le gnoynogootdelyaemogo ampak elementi prelivi. Vposlednee primeru bi se lahko bali massivnyhkolichestv naključni bakterije, vendar ispolzovaniesterilizovannyh prelivi verjetno zavrnili skrbi, kot je razvidno iz nashnebolshoy izkušenj. V relativno kratkem času preživel hitri način, mogoče neznachitelnyekolichestva tuje bakterije ne morejo effektivnokonkurirovat z mikrobne flore gnojni otdelyaemogoiz sposobnost, da spremenite barvo medija kulture.

Smotrna izbor antibiotika sestoji izbystrogo vvodimoydozy in učinkovitih antibiotikov sposobna ustvariti presežek v leziji, prepričanje, da bo tak presežek, in določitev trajanja zdravljenja z antibiotikov.Zhelatelno s temi priporočili iskhodyane so izbrani izmed splošnih ugotovitev, in zlasti za kazhdogobolnogo. Prve tri kazalnike bi morali dobiti vrezultate sodelovanju, ki jih klinični zdravnik klinicheskogobakteriologa in Klinični farmakolog in dlitelnostlecheniya - ne, to je pristojnost lečečega zdravnika, ki temelji na rezultatih prvih dneh primeneniyaetiotropnogo zdravljenja.

ugotovitve

1. Uporaba tablete s predhodno posušili vlunochkah antibiotikov zmanjša čas, porabljen naotbor najbolj učinkovitih antibiotikov ter se suschestvennouproschaet analizo.

2. Hitra metoda za izbiro učinkovitih antibiotikov v analizi bylaprobirovan gnojni materiala iperevyazochnogo rane več podatkovnih bolnyh.Raschetnye temeljijo na rezultatih issledovaniyakonkretnyh bolnikov v povezavi s podatki naberejo iz literature, pozvoliliotsenit možne odmerke antibiotikov potrebnih dlyasoozdaniya njihovi višji pri odvajanju gnojni.

literatura

1. Levy MI, Gorozhankina IA, Sagatovsky L.A.Bystry bakterialnyhkultur metoda določanja občutljivosti različnih antibiotikov v tekoči srede.Antibiotiki, 1967, N1, str. 57-62.
2. Levi MI, SuchkovYu.G., Prokhorov VJ, Terushkin VA Pospešeni otboreffektivnyh antibiotiki za zdravljenje okužb bolnyhgospitalnymi. Dezinfekcijo primeru 1999, N3, str. 18-24.
3. Zdravila zarubezhnyhfirm v Rusiji. Imenik. M.,"Astrafarmservis"1993.
4. Mashkovskii I.D.Lekarstvennye pomeni. Zvezek 2, Ed. 13, Moskva, 1998.
5.Metodicheskie priporočila za pospešeno otborueffektivnyh antibiotiki za zdravljenje okužb bolnyhgospitalnymi. Odobreno s strani Ministrstva za zdravje Ruske federacije 10.01.2000 g.za N1100 / 26-0-117. Dezinfekcija poslovanje v letu 1999, N3, Dodatek.
6. Navashin SM, IP Fomina Ratsionalnayaantibiotikoterapiya. Ed. 4, Moskva, 1982.
7. SidorenkoS.V., Kolupaev VE Antibiotikogrammy: disk metoda difuzije. Razlaga rezultatov.Izd. skupina "Arina"1999.
8. SidorenkoS.V., Fedorovich V.Yu. Pospešena Postopek opredeleniyaminimalnoy inhibitorne koncentracije antibiotikov naplanshetnyh spektrofotometrih z vgrajenim termostatom.V knjige.: "Bolnišnične okužbe - problemyepidemiologii, ambulanta, diagnoza, zdravljenje iprofilaktiki"M., 1999, str. 220-221.
9. SenfordDzh. Gilbert, D., J. Gerberding. Sandy M. Antimikrobnayaterapiya. Ed. 23, Moskva, 1996.

Zdieľať na sociálnych sieťach:

Príbuzný