Študija matičnih celic. Glavne metode raziskav izvornih celic

Razlikovanje hematopoetičnih celic

Video: Shukhrat Mitalip, naš znanstvenik v ZDA uspešno klonirali matičnih celic

Zadnji, po definiciji, morajo ima vsaj dve osnovni značilnosti: sposobnost, da sama obnoviti, primerljivo s trajanjem celotnega organizma, in sposobnost, da se diferencirajo v bolj zrele elemente celic.

Za dolgo časa problem raziskave matičnih celic nosil nezanesljiva. Eksperimentalna študija je postalo mogoče šele po vzpostavitvi metode kloniranja hematopoetičnih celic v vranici obsevanih miših.

Celice kostnega mozga injicirali usodno obsevanih miši v majhni količini, da spadajo v različne krvotvornih organov, zlasti v vranici. Širjenje hematopoetičnih celic uveden vanj povzroči nastanek žarišč (kolonije) iz hematopoeze, diskretno nahajajo vsej vranici in dobro vidno makroskopsko v obliki gomoljev vsebujejo 7-10 dni po presaditvi več milijonov hematopoetičnih celic.

V povprečju je Presaditev 104 celic singenski kostni mozeg tvori eno - tri kolonije. To povzroča ključ za katero koli metodo kloniranja vprašanje, ali je kolonija oblikovali hematopoetske celice ali v svojem ustvarjanju je sodelovala celične populacije, komponento presajene prebivalstva. Rezultati (Till, McCulloch, 1961), ki se s povečevanjem števila presajenih celic linearno povečuje število kolonij. To dejstvo je resen argument v prid klonske izvora kolonij.

Video: TV Show Marina Astvatsaturyan "Medicina v kontekstu", tema: "matične celice"

Vendar pa samo dejstvo, je linearno razmerje med številom celic upravlja in število nastajajočih kolonij ne zadostuje, da dokaže izvor klonskih kolonij. Dejansko, če je tvorba kolonija sodelujeta dva ali več tipov celic, od katerih le ena je omejena v suspenziji hematopoetičnih celic, in v tem primeru bodo opazili linearno razmerje med številom vbrizgali celic in število nastajajočih kolonij.

Klonov narava kolonij v vranici bila dokazana z metodo markerjev sevanja (Becker e. a., 1963). V ta namen smo miši obsevanih v dozi 250 rad, so bili presajeni velik odmerek singenske kostnega mozga in nato obsevali z drugim odmerkom 650 rad. Pod temi pogoji, se z miško prejemniki prejeli skupni odmerek 900 rad, ki je skoraj v celoti inaktivirano lastne celice, ki tvorijo kolonije, medtem ko presajene celice dobijo manj doze sevanja (650 rad) in nekatere od njih preživel.

Hkrati veliko verjetnost da obsevanje v tem odmerkom celici čeprav preživi, ​​vendar nosi vsako stabilno kromosomsko aberacijo (kromosom marker), ki omogoča, da se z njim in potomce identificirati. Karyological analiza je pokazala, da večina kolonij preučila, v katerem je zaznati dvojno podajo kromosom, enako aberacije izvaja vse deljive celice te kolonije. Ker neodvisni pojavu enaka aberacije celo samo v dveh celicah je statistično zelo verjetno ta dejstva kažejo, da je kolonija (ali vsaj večina) potomci a kolonija klon celic. Tako kolonija izdelal izvorno celico (kolonija tvori enoto v selezenke- CFU).