Laboratorijska diagnoza nalezljivih bolezni

Običajni vrsti testih vključujejo mikroskopijo, test kulture, imunološke teste (teste aglutinacijo kot lateks aglutinacijski encimskim imunotestom, zahodni blot, teste padavin in dopolnitev testov za fiksiranje) in metode identifikacije nukleinske in niso nukleinskih kislin. Ponavadi test kulture - je zlati standard za identifikacijo mikroorganizmov, vendar rezultati ne smejo biti na voljo več dni ali tednov. Poleg tega lahko patogeni izoliramo v kulturi, zaradi česar so koristne testi alternativne. Ko patogen izvedli testno kulture, in je opredelila, lahko laboratorij tudi ovrednoti svojo občutljivost na antibiotike.

Nekateri testi (npr Gram obarvanje, običajno aerobna kultura) lahko zazna široko paleto patogenov. Ob istem času, nekateri patogeni ni mogoče identificirati v analizi. Zato se morajo zdravniki zavedati omejenosti vsakega preskusa za določene mikroorganizme. V takih primerih morajo zdravniki zaprosi za teste, ki so značilne za sum povzročitelja (npr posebnih barv ali medij za kulturo) ali priporočiti nekatere laboratorijske preiskave, da izberejo.

mikroskopija

Mikroskopija je mogoče storiti hitro, vendar je natančnost odvisna od izkušenj laboratorijskega delavca in kakovost opreme. Navodila pogosto omejuje uporabo zdravniki mikroskopije za diagnostične namene je certificiran laboratorij.

Večina osebkov, zdravljenih z barvili, ki barva patogeni, ki jih naredi izstopajo iz množice, čeprav se lahko uporablja za mokro pripravki neobarvano vzorcev za odkrivanje glive, parazite, informativnih celic iz nožnice, mobilni organizmi (npr Trichomanas) in sifilis (mikroskopijo, darkfield ). Dokaz gliv je mogoče izboljšati z uporabo 10% kalijevega hidroksida, da smo raztopili okolno tkivo in brez glivične organizmov.

Klinični zahteval sliko, ki temelji na verjetnih patogenov, vendar ne obarvanje ni 100% natančni. Večina vzorcev obdela gram barvanjem in suma, mikobakterije, kislinsko-obarvanjem. Vendar pa nekateri patogeni težko videti, ko uporaba teh metod. V takšnih primerih zahtevajo različne različice barvo ali druge metode identifikacije. Ker mikroskopsko odkrivanje mikrobov na splošno zahteva koncentraciji okoli 1h105 / ml, večina primerki bioloških tekočin (npr CSF), koncentrirali (npr centrifugiranje) pred analizo.

gram madež. Barvanja po Gramu razvršča bakterije glede na to, da ohranijo kristal vijoličnim madež (grampozitivna - modra) ali ne (g - rdeča). Poleg tega kaže celično morfologijo (npr bacili, koki) in njegovo organizacijo (npr grozd veriga diploidov). Take značilnosti lahko pomaga pri predizbor antibiotikov, medtem ko čakajo na dokončno identifikacijo. Za proizvodnjo barvanje po Gramu, laboratorijski material gretje in osnovna vzorec na drsniku, in nato obarvajo zaporedno z barvanja po Gramu vijolično, jodom, acetona in kontrastne barve (običajno safranina).

Kislina in zmerno (Spremenjen) Kisla barvila. Taka barvila se uporabljajo za identifikacijo organizmov kislinsko odporne (Mycobacterium sp.) In zmerno kislinsko odporni organizmi (zlasti Nocardia sp.). Ta barvila so uporabni za barvanje rodov Rhodococcus in podobno, kot tudi oocist nekaterih parazitov (npr Cryptosporidium) prav.

Čeprav odkrivanje mikobakterij v izpljunku zahteva le približno 5 000-10 000 mikroorganizmov / ml, mikobakterije so pogosto prisotne v človeškem telesu na nižjih ravneh, tako je občutljivost omejena. Ponavadi nekaj ml izpljunku deaktiviranje natrijevega hidroksida in koncentriramo s centrifugiranjem pri kislinsko-obarvanje. To izboljša diagnozo, čeprav so nekateri zmerno odporne proti kislinam organizmi težko razlikovati od mikobakterije.

fluorescenčno obarvanje. Taki barvila detekcijo patogenov pri nižjih koncentracijah (1x10⁴ celic / ml). Primeri - akridin oranž (bakterije in glive), auramine rodamin in auramine O (mikobakterije) in kalkoflyuor belo (glive, zlasti dermatofiti).

Spojina s fluorescentno barvilo za protitelesa, usmerjenega proti patogenom (neposredno ali posredno imunofluorescenco) poveča občutljivost in specifičnost diagnoze. Vendar pa so ti testi so težko brati in interpretirati, in nekaj (na primer, neposredno fluorescence testi in pljučnica Legionella protitelesa) so na voljo na tržišču in se običajno uporablja.

madeži črnila. To barvilo se uporablja za odkrivanje predvsem Cryptococcus neoformans in druge skrite gliv v suspenziji opranih celic (npr CSF oborina). Barvni sekundarna domena in ne samo telo, ki omogoča, da vidim nobene kapsulo po telesu kot halo. Pri drugih patogenov preskus ni tako občutljiva kot odkrivanje kriptokokni antigena. Specifičnost metode je omejena tudi: bele krvničke lahko pojavijo skrite patogenov.

Wright madeži in Giemsa. Taka barvila se uporabljajo za odkrivanje parazitov v krvi, Histoplasma capsulatum fagocitov in tkivne celice, intracelularni vključki oblikovani virusi in klamidija trofozoitov s Pneumocystis jirovecii in nekaterih znotrajceličnih bakterij.

Trichromic obarvanje (barvanje Gomori - Wheatley) in železov hematoksilin barvanje. Te barve se uporabljajo za odkrivanje črevesno praživali.

Dye Gomoryjeva - Whitley se uporablja za odkrivanje mikrosporidij. On ne more razkriti helmintov jajca in ne lichinki- zanesljivo ugotoviti Cryptosporidium. Glive in človeške celice se obarvajo tudi.

Železo hematoksilin madež diferenciranih celic, aktivacijo celic in jeder. helmintskih jajca lahko pobarvana v temne barve, zaradi česar je težko opredeliti.

kultura

Test kulture - mikrobno rast v trdnem ali tekočem povečanje hranilo sredine števila organizmov omogoča identifikacijo. Kultura omogoča tudi testiranje na antibiotike občutljivosti.

Video: Diagnoza cistitis. Del 3 052-2506596

Komunikacija z laboratorijem, je pomembno. Čeprav je večina vzorčni material, nanese na mediju za splošne namene (npr krvi ali čokolada agar), nekateri patogeni zahtevajo vključitev nekaterih hranil in zaviralcev ali drugo posebno usloviy- če obstaja sum eden od teh patogenov ali če pacient prejel antibiotike, je potrebno poroča laboratoriju. O izvoru poročila vzorca take podatke v laboratoriju lahko razlikujejo patogenov iz normalne flore.

Vzorčenje je pomembno. Napačna vrsta tamponom lahko privede do lažno negativnih rezultatov. Lesene palice za palice bris strupena za nekatere viruse. Palčke z vato konico strupenih nekaterih bakterij in klamidijo. Krvne kulture zahtevajo dekontaminacijo in dezinfekcijo kože (npr so povidon tamponov jodove pustimo, da se posuši in odstranimo s 70% alkohola). Pogosto uporabljeni več vzorcev, vsak od ločenega ograje mesta- prednostno izvedemo pri vrhuncu kuge, če je le mogoče. Normalni flora kože in sluznice, ki raste celo v istem vzorcu krvi, obravnavane kot okužene. Če je vzorec kri, pridobljena iz centralno veno ali arterijo, je treba tudi periferne vzorec krvi za pomoč pri razlikovanju sistemsko bakteriemija pred infekcijo katetra. Kultura okuženih katetrov navadno postanejo pozitivni hitreje in vsebuje več organizmov kot obeh kombiniranih kultur periferne krvi. Nekatere glive, zlasti tla (npr Aspergillus sp.), Običajno ne more biti kultiviramo iz vzorcev krvi.

Vzorec je treba hitro prepeljati v ustreznem mediju in pod pogoji, ki omejujejo rast druge morebitno okužbo flore. Natančno določiti znesek patogena treba preprečiti rast patogenih dodatne izvode, je treba takoj prepeljati v laboratorij, ali, če je prevoz zamudo, ki se nahaja v hladilniku (v večini primerov).

Obstajajo posebni pogoji za nekatere poljščine.

Anaerobne bakterije ni treba preučiti v testnem kulture, kot diferenciacija patogenov iz normalne flore pogosto nemogoče. Vzorci Vzorce je treba zaščititi pred zrakom. anaerobne prevoz mediji se uporabljajo za potezami čopiča. Vzorci vzorce zberemo z brizgalko (na primer vsebina absces) je treba prevažati v brizgi.

Mikobakterije težko gojiti. Osebki, ki vsebujejo običajne flore (npr izpljunku), je treba najprej onemogočen in koncentriramo. Mycobacterium tuberculosis in nekatere druge mikobakterije rastejo počasi. Rast M. tuberculosis, ponavadi hitreje pojavljajo v tekočinah kot v trdnem nosilcu. Značilno je, da lahko uporaba avtomatiziranih sistemov s tekočim medijem poveča v 2 tednih v primerjavi s >4 tedne na trdnem nosilcu (agar Lowenstein - Jensen). Poleg tega bi lahko majhno število organizmov prisotna v kopiji. Ograje več primerkov na istem mestu lahko pomagajo povečati verjetnost odkrivanja patogenov. V 8 tednih se ne sme mešati vcepimo medij. Če se sumi, atipična Mycobacterium, mora o tem obvestiti laboratorij.

Virusi običajno kultiviramo na umazanijo in tkivnih vzorcev, običajno prevažajo v okoljih, ki vsebujejo antibakterijske in protiglivična sredstva. Vsebina vzorcev nacepili vzorce v tkivni kulturi, ki podpirajo rast virusa in zavirajo vse druge mikrobe. Virusi so zelo nestabilne (virus npr zoster) so inokulirali v tkivni kulturi v 1 uri pobiranja. Standardna kulture tkiva je najbolj občutljiv. Express kulture tkiva celice (plak način: štetje lise na celični enoplastni) lahko zagotovi hitrejši, vendar kaže rezultate. Nekateri pogosti virusi ni mogoče zaznati z običajnimi metodami kulture tkaney- zahtevajo alternativne metode za diagnozo.

Vzorci glive, izpeljani iz nesterilne mest se inokulira v mediju, ki vsebuje antibakterijsko sredstvo. Primere, je treba ohraniti za 4 tedne, preden se zavrže.

Analiza občutljivosti

Analize občutljivosti določiti mikrobno odpornost na antibiotike, ki se zaradi izpostavljenosti s standardizirano koncentraciji antibakterijskih zdravil. Analiza občutljivosti lahko izvedemo za bakterije, glive in virusi. Za nekatere organizme, dobljene iz ene droge rezultati napovedati rezultate teh zdravil. Torej, ni vse potencialno aktivnih zdravil se testirajo.

Analiza občutljivosti se izvaja in vitro in ne sme upoštevati več dejavnikov, naravne danosti (npr Farmakokinetika in farmakodinamika, funkcija koncentracije drog v nekaterih tkiv in organov telesa človeškega imunskega sistema), ki vplivajo na uspeh zdravljenja. Tako rezultati testov o občutljivosti ne vedno napovedati izid zdravljenja.

občutljivosti metode lahko kvalitativno, semikvantitativno ali z uporabo metod za izolacijo nukleinskih kislin. Analiza lahko tudi ocenimo učinek kombinirane uporabe različnih antibakterijskih zdravil (test Vzajemno delovanje).

kvalitativne metode. Kvalitativne metode so manj natančni kot semikvantitativno. Glede na rezultate običajno fiksno občutljivost (S), pri čemer vmesni rezultat (I) ali njena upora (R). Najpogosteje uporabljena metoda diska difuzije (znan tudi kot preskusnega Kirby - Bauer) primeren za hitro rastočih organizmov.

Antibiotik impregnirane plošče damo v agarske plošče, na kateri se preveri mikroorganizem. Po inkubaciji (običajno 16-18 ur) se meri premer inhibicijske cone okoli vsakega diska. Vsako kombinacijo antibiotik mikroorganizem različne premere imajo vrednost S, J ali R.

Druge metode, ki zahtevajo manj stroge parametre oprijem testu lahko uporablja za hitro preverjanje individualnem organizmu odporno na določeno zdravilo ali skupino zdravil ali posebnih antibakterijskih kombinacije (npr odpornost na oksacilinom na meticilin odporen Staphylococcus aureus, proizvodnja B-laktamaze).

Delno kvantitativne metode. Semikvantitativno metode za določitev najmanjše koncentracije zdravila, ki inhibira rast določenega organizma in vitro. Minimalna inhibitorna koncentracija (MIK) je določen kot število, ki se nato lahko šteje kot eno od treh skupin: S (občutljivi), I (vmesna) ali (odporni) R. MIK Določitev uporabljajo predvsem za bakterije, vključno anaerobov in Mycobacterium se včasih uporablja za glive, zlasti vrste Candida, ki izhajajo iz sterilnih mest. koncentracija Minimalne nevtralizira (baktericidno) (MBC), se lahko tudi določi, vendar je tehnično zahtevna in standardi za razlago se še niso dogovorili. MBC analiza vrednost, to pomeni, ali lahko zdravilo je bakteriostatično ali baktericidno.

Antibiotik lahko raztopimo v agarju ali juhe, ki jo nato dodamo v mikroorganizmu. Olajšajte juho - zlati standard, vendar je zamudno, saj se le ena koncentracija zdravila lahko testirali v eni cevi. Bolj učinkovita metoda uporablja trak poliester filmskega traku, prepojen z ustreznim koncentracije antibiotika. Trak smo dali na agarske plošče, ki vsebujejo vstavljanje materiala in IDC določena z lokacijo na traku, ki se začne ingibitsiya- se številni antibiotikov mogoče preveriti na isti plošči.

IDC omogoča povezavo med občutljivosti mikroorganizma proti zdravilu in koncentracijo zdravila dosegljive na materiale, ki niso beljakovine (prosta drog). Če je koncentracija prostega zdravila v tkivu višje od MIC, je verjetnost uspešnega zdravljenja je visoka. Podobno podatki o S, I in R so povezana z BMD. Običajno so na osnovi dosegljivih koncentracijah prostega zdravila v serumu ali plazmi.

Metode za odkrivanje nukleinske kisline. Ti testi temeljijo na metodah odkrivanja nukleinskih kislin, ki so podobni tistim, za identifikacijo mikroorganizma, vendar prirejena za odkrivanje znanih genov odpornosti ali mutacije. Primer - Meca, gen za odpornost na oksacilinom v S. aureus- če je gen prisoten, je organizem šteje odporni na vse-laktamske antibiotike. Čeprav je znano, veliko takih genov, vendar je njihova identifikacija ni upravičen do dokončne sklenitve o odpornosti in vivo. Poleg tega, saj lahko predstavljajo nove mutacije ali druge gene za odpornost, njihova odsotnost ne zagotavlja občutljivosti na zdravilo. Iz teh razlogov in zato, ker so testi številčno omejene in so drage, pa se ne uporablja pogosto. Metode za detekcijo nukleinskih kislin ne nadomešča standardno testno kulture in običajno analizo občutljivosti.

Imunološki testi za nalezljive bolezni

Imunološki testi, ki uporabljajo antigen za odkrivanje protiteles proti patogenom ali protitelesa za odkrivanje antigen patogenov v vzorcu pacienta. Zdravljenje se spreminja, če pa boste morali odložiti analizo, vzorec, kot pravilo, je treba shraniti v hladilniku ali zamrzujte, da bi preprečili prekomerno rast bakterij.

testi aglutinacijski. V aglutinacijo se testi (npr lateks aglutinacijski, koaggregatsiya) delec (lateks sloj ali bakterija), povezan antigen ali protiteles reagenta. Nastali kompleksni delci zmešamo z vzorcem (npr CSF, serum) - če je premreževalni delec pojavi želeno protitelo ali antigen prisoten v vzorcu v obliki aglutinacije, ki se lahko izmeri.

Če so rezultati pozitivni, zaporedno preiskovani biološka tekočina razredči in preizkušen. Aglutinacijo s bolj razredčene raztopine kaže višje koncentracije v želeni antigen ali protitelo. Titer pravilno snemati vzajemno aglutinacijo če je razredčen v primeru raztapljanja 32 kaže, da je aglutinacije potekala v razredčeni raztopini 1/32 začetne koncentracije.

Video: Laferobion

Aglutinacijo testi ponavadi hitrejši, vendar manj občutljive od mnogih drugih metod. Ti lahko določi tudi serotipe nekaterih bakterij.

vezanja komplementa. S tem poskusom meri porabo komplementa (vezanja komplementa) protiteles v serumu ali v CSL. Test se uporablja za diagnosticiranje nekaterih virusnih in glivičnih okužb, zlasti kokcidioidomikoze. Vzorec inkubiramo z znanimi količinami komplementa in antigena. Obseg vezanja komplementa kaže relativno količino protiteles v vzorcu. Test lahko merijo protiteles titre IgG in IgM, ali se lahko spremeni za odkrivanje specifičnih antigenov. Analiza natančno, vendar je omejeno uporabo, je dolgotrajen in zahteva številne nadzorne sredstva.

vezan imunski test. Ti testi uporabljajo protitelesa sklopljena s encimov, za odkrivanje antigenov ali odkrivanje in kvantifikacijo protiteles. Povezane imunski test (ELISA), in encim imunološki, se najpogosteje uporabljajo encim-vezan-vezan imunski (ELISA). Ker je večina občutljivih imunskih visoka, se običajno uporabljajo za presejanje. Titri se lahko določi s serijsko razredčitev vzorca, kot je v aglutinacijski test.

Analiza občutljivosti čeprav običajno visoka in se lahko spreminja glede na starost bolnika, serotipa mikroba, kot vzorec ali klinični fazi bolezni.

Analiza padavin. Ti testi merijo antigen ali protitelo v telesnih tekočinah stopnjo vidne usedanja kompleksov antigen-protitelo v gelu (agaroze) ali v raztopini. Obstaja veliko vrst analize padavin (na primer z Ouchterlony dvojne difuzije, nasprotni imunoelektroforezni), vendar je njihova uporaba omejena. Značilno je, da je vzorec krvi zmešamo s testiranim antigenom na prisotnost protiteles zaščitne, pogosto z glivično okužbo ali piogeni meningitis. Kot pozitiven rezultat zahteva veliko količino protitelesa ali antigen, občutljivost nizka.

Western Blot Analiza. Ta analiza odkriva antibakterijske protiteles v vzorcu materiala, vzetega iz pacienta (npr seruma, druge telesne tekočine) z njihovo reakcijo z antigenom (npr virusne komponente), ki so bile imobilizirane na membranski blot.

V zahodni blot analizi, kot pravilo, dobro občutljivost, čeprav je pogosto manjša kot pri presejalnih testov, kot je ELISA, ampak na splošno pa ima visoko specifičnost. To se običajno uporablja za potrditev pozitivnih rezultatov, pridobljenih v presejalnem testu.

Tehnične spremembe linearna Western blot imunsko (LIA) - analize rekombinantne imunoblot (riba), ki uporablja sintetično ali rekombinacije-binant proizvedene antigeny- in imunokromatografski test, ki lahko hitro testnih vzorcev za posebne mikrobnih antigenov ali protiteles pacienta.

Metode za identifikacijo niso nukleinskih kislin za odkrivanje nalezljivih bolezni

Takoj, ko je bilo ugotovljeno, test organizem kulture, jo je treba identificirati. brez nukleinske metode za odkrivanje kislina zaposlujejo fenotipsko (funkcionalna ali morfološka) ima mikroorganizmov, namesto genetske identifikacije.

Značilnosti rast patogena v hranil medijih - velikost kolonij, barvo in obliko, daje informacije za opredelitev vrste in z Gram barvanjem in algoritem za nadaljnje analize. Na razpolago številne biokemijske testy- vsak značilna za določeno vrsto mikroorganizmov (npr aerobne ali anaerobne bakterije). Nekateri ocenjujejo sposobnost telesa za uporabo različnih substratov za rast. Drugi ocene prisotnost ali aktivnost ključnih encimov (npr koagulaza, katalaza). Analize delajo, korak za korakom. Zaporedje preskusov je zelo raznoliki in se lahko v različnih laboratorijih nekoliko razlikujejo.

Ne-nukleinske metode za odkrivanje kislino lahko temelji na priročniku na avtomatiziranih sistemih, ali pa lahko kromatografske metode. Nekateri kompleti na voljo na tržišču vsebuje posebno baterijo testov, ki se lahko opravijo pri uporabi samo en vzorec materiala in je na splošno koristno za diagnozo širokem spektru mikroorganizmov. Taki Test sistemi so lahko zelo natančen, vendar lahko traja nekaj časa, tudi do nekaj dni.

kromatografske metode. Mikrobiološke sestavni deli ali izdelki so ločene in označene s tekočinsko kromatografijo visoke ločljivosti (HPLC) ali plinsko kromatografijo. Značilno je, detekcija je s primerjavo maščobnih kislin organizma z bazo podatkov. Kromatografske metode se lahko uporabljajo za identifikacijo aerobne in anaerobne bakterije, mikobakterije in glivice. Natančnost je odvisna od preizkus kulture vzorec za analizo kakovosti in kakovosti baze podatkov, ki so lahko netočni ali nepopolni.

Metode za identifikacijo za nalezljivo boleznijo, ki temelji na odkrivanje nukleinske kisline

Na identifikaciji nukleinskih kislin kažejo nekatere metode za detekcijo organizma DNA ali RNA ekstrahiramo iz mikroorganizma. Sekvence se lahko poveča in vitro. Na odkrivanje nukleinske kisline so na splošno zelo občutljiv in specifičen in se lahko uporablja za vse vrste mikrobov. Rezultati se lahko hitro dobiti. Ker je vsaka analiza običajno značilne za posamezno organizma, zdravnik mora vedeti diagnostičnih možnosti in prosi za ustrezno analizo. Na primer, če ima bolnik simptome, ki kažejo na gripe, vendar sezono gripe je konec, ki imajo skupaj virusne diagnostičnem testu (npr virusna kultura), ne pa s posebno analizo o gripi je bolje, saj lahko drug virus (npr parainfluence, adenovirus) bo povzroči.

Na določitev nukleinskih kislin so kvalitativni preizkusi, vendar obstaja kvantitativne metode določanja za omejeno, vendar povečanje števila okužb (npr HIV, citomegalovirus, virus človeške T-limfotropni). Te metode so lahko koristni za diagnozo in spremljanje odziva na zdravljenje.

Metode, ki ne povzročajo pomnoževanja nukleinske kisline se uporabljajo v primerih, ko je organizem prvi odkritih v testnem kulture in je prisotna v vzorcu, pri visoki koncentraciji.

ojačanje. Pri metodah pomnoževanja nukleinske kisline, pri čemer majhno količino DNA ali RNA, razmnoževanje, ji večkrat, zato lahko zazna majhne sledi mikroorganizma v vzorcu. Te metode so še posebej uporabni za bolezni, ki jih je težko gojiti ali identificirana z drugimi metodami (npr virusi so obligate znotrajceličnih patogeni, glive, mikobakterije, nekatere druge bakterije), ali pa za tiste organizme, ki so prisotni v majhnih količinah.

Ti testi lahko vključujejo ciljni ojačanje (npr PCR reverzne transkriptaze PCR [RT-PCR] pristranskosti vezje ojačenje, pomnoževanje transkripcije) pomnoževanje signala (npr analiza razvejen DNA hibridni zajem), pomnoževanje vzorca (npr verižno reakcijo ligazo , uvaja obliko cepitev ciklični test) ali postamplifikatsii analizo (npr sekvenciranje analizo pomnoženega produkta, uporabo analize mikromrež in likvidus krivuljo, kot je narejeno v realnem času PCR).

Ustrezno vzorčenje in shranjevanje pred prihodom v molekularni diagnostičnega laboratorija je pomembno. Ker metode ojačevanja, se lahko namesti tako občutljiv, enostavno do lažno pozitivnih rezultatov kontaminacije sledovih vzorca ali opreme. Kljub visoki občutljivosti, včasih so lažno negativne rezultate, tudi če ima bolnik klinične znake (npr virusne infekcije z zahodnega Nila). Napačni negativni rezultati je mogoče zmanjšati

• z izogibanjem uporabi palčke za umazanijo z lesenimi palicami in konice volno
• hiter prevoz vzorcev,
• zmrzovanjem ali z dajanjem vzorcev v hladilniku, če prevoz traja >2 uri.

Zamrzovanje - tipičen način shranjevanja nukleinske kisline ojačevalni testov. Vendar pa morajo biti vzorci shranjeni v hladilniku, in ne sme biti predmet zamrznitve, če se sumi, nestabilne virusi (na primer, virus herpes zoster, virus influence, HIV-2), ali če nameravate študirati virusne kulture (zamrznjeni vzorci niso primerni za standardne rastline).