Onkologiya-

IA Baldueva

VCO onkološki inštitut. prof. NN Petrov, Ministrstvo za zdravje, St.-Petersburg

vir RosOncoWeb.Ru

"Cepivo - metoda, ki temelji na uporabi kompleksnega antigenaili antigena z ali brez odziva adjuvansov modulyatsiiimmunnogo" (Restifo N., Sznol M., 1997). Ta metoda aktivnoyspetsificheskoy imunoterapija, ki temelji na stimulaciji immunnogootveta pacientov na njihovem lastnem tumorja. Cepljenje (cepljenje tumorja) z rakom se lahko uporablja z adjuvansom (po hirurgicheskogolecheniya v odsotnosti klinično zaznavnih oddaljenih metastaz) in medicinske namene (pri razširjanju tumorja).

Številna dela zadnjih desetletjih prikazani chtopri maligne tumorje imajo ustrezen imunski otveta.Eto je lahko posledica več razlogov:

1) Pomanjkanje imunogenosti tumorja / opuholeasotsiirovannogoantigena;
2) Sposobnost za indukcijo tumorjev lokalnega ali sistemskega imunosupresivno (IL-10, transformirajočega rastnega faktorja rosta-?, Faktor rostaendoteliya posode, itd), z zmanjšanjem aktivnosti limfocitov T .;
3) mehanizem poročanja zlorabo opuholeasotsiirovannogo antigena.
V 70. letih prejšnjega stoletja, Hewitt et al. (1976) je bila vyskazanopredpolozhenie da eksperimentalnih tumorjev pri ravnega zhivotnyhv večini primerov izkažejo za ne-imunogeni. Rezultatyklinicheskih Raziskava je pokazala tudi, da tumorji v chelovekamalo različni od normalnih tkiv. Zadnja obstoyatelstvomozhet delno pojasni pomanjkanje učinkovitega aktivacijo immunnoysistemy. Zato je bil sklep oblikovan, da imunološki poseg v neoplastične procesu yavlyayutsyamaloperspektivnymi. Kasneje v študijah so van Pel in Boon (1982), v mišjih modelih so pokazale, da otvetmozhet se zaščitni imunski povzroča proti "neimunogenski tumorji"In pomanjkanje imunogenosti je zaradi prej nesposobnostyuopuholi aktivira imunski sistem, kot njeni pomanjkanje poverhnostiopuholevyh antigenov. Te ugotovitve so bile naknadno podtverzhdenyna neimunogenski tumorjev pri poskusnih živalih drugih vrst, če z manipulacijo imunskega sistema (z drugimi besedami -vaktsinatsy) so pokazali, da tumorskih antigenov prisutstvuyuti na ne-imunogeni tumorjev, in lahko učinkovito stimulirovatimmunnuyu sistem za odpravo tumorjev. Ti podatki, očitno, mogoče ekstrapolirati na človeških tumorjev. Tako lahko vsi tumor občutljiv na immunologicheskomuvmeshatelstvu (Boon, 1996- van der Bruggen, 1996- Rosenberg S., 1999).

Klinične študije aktivne posebnega immunoterapiibolnyh s tumorji različnih lokalizacije potekajo v nastoyascheevremya v vseh onkoloških centrih. Predmeti issledovaniyayavlyayutsya cepivo na osnovi avtologna ali alogenska ne modifitsirovannyhi modificirane celice tumorja polivalentnyevaktsiny sintetične cepiva na osnovi dendritičnih celic in drugih.

Znano je, da je prost (nevezanega) antigen, ki ga limfociti B ne prepozna, čeprav te celice ekspressiruyutretseptory ustreza antigen. Za initsiirovatimmunny odziv, mora antigen predstavljen poverhnostiantigen-predstavitvene celice v okviru HLA molekule in druga površinska vassotsiatsii s molekularne strukture (kostimulatorni, oprijema in drugi.). Ta dogodek je opredelyayuschimkak pri stimulaciji T-celic in tvorbo učinkovitega immunnogootveta (Guinan E., 1994). T celice "spomin" initsiirovatimmunny lahko odgovorili v kratkem času v interakciji s-razlichnymiantigen predstavljajočih celic (B celic, makrofagov, dendritnyekletki), od katerih so dendritične celice (DC), ki lahko induktsiipervichnogo nepraymirovannymi odzivnost T-celic. Glavni svoystvamDK vključujejo:

1) edinstveno sposobnost za zbiranje celic T z največjo ocena poverhnostiza lastnim izrazom glavnogokompleksa histokompatibilnostni molekule razreda II (HLA-DR, -DP in -DQ) in molekulI razreda;
2) sposobnost izražanja med zorenjem CD80 molekule CD86i CD40, ki aktivira posamezne ligande na T kletkah- CD28, CTLA-4 in CD40L;
3) sposobnost, da dobimo več citokinov, vključno interlevkin-12, ki poveča imunološki odziv zaradi "navodila"T celično diferenciacijo poti iz T pomagalk prvega tipa;
4) Sposobnost za zajemanje topne antigene preko endocitoze;
5) prisotnost učinkovitih mehanizmov za obdelavo (predelavo) kompleksne beljakovine imunogenih peptidov;
6), da lahko izvaja, vlogo diferencira timus: inducira toleranco za antigene tkiva z lastno pomoschyuudaleniya razvoju avtoreaktivnih T-celičnih klonov, in drugi.
Študije so pokazale, da se je število DC v telesu bolnikov zlokachestvennymiopuholyami zmanjša, in so funkcionalno okvari. DC izoliramo iz perifernih limfni in ne-limfoblastne periferne krvi tkaneyi obeh poskusnih živali s tumorji in bolniki z rakom ne morejo stimulirajo limfocite spetsificheskiyotvet citotoksičnih T (CTL) in šibko stimulirajo T-celice pomagalke (Bernard, J. et al., 1997- Gabrilovich D . et al., 1996- ZitvogelL. et al., 1996). Poleg tega je na površini je vyyavlenosnizhenie izražanje adhezijskih in kostimulatornih molekul in downregulation takzhekriticheskoe HLA-molekule, zlasti sem klassa.Predpolagaetsya da lahko zmanjšanje števila DC in izguba ryadafunktsy eden izmed glavnih razlogov za pomanjkanje polnotsennogoimmunnogo odziva na razvoj tumor.

Kultiviranje perifernih DCS vitro pod pogoji pozvolyayuschihpoluchit njihovo največjo rast in aktivacijo, ki vodi do uvelicheniyuekspressii površinske molekule, vendar je njihova stopnja pogosto okazyvalsyanedostatochnym inducira specifično CTL stalno odziva (Gabrilovich D. et al., 1996). Največji sposobnost DCS da comparisonwith periferno predstavitev opuholevogoantigena imajo specifične T limfociti predshestvennikiDK kostni mozeg, kot tudi singenskih ali alogene DC od obrobnih krovizdorovyh posameznikov, aktivira in vitro tumorja assotsiirovannymiantigenami (Palmer E. et al., 1997- Reid C, 1997) . Samo takieDK v večini primerov normalno stimulirani CTL odziv. Etopozvolyaet šteje aktiviranih DC obetavne kandidatamidlya aktivno specifično imunoterapijo pri bolnikih s rasprostranennymiformami malignih tumorjev, vključno zdravljenje odporne kstandartnomu.

Oblikovanje učinkovitega proti tumorjem imunskega otvetana vaccinotherapy ponavadi zahteva nekaj tednov doneskolkih mesecev. Zato je spetsificheskoyimmunoterapii aktivna Klinični učinek zakasnitvijo (Jefford M. s sod., 2001) .Ponyatno, da mora biti ta metoda bolj učinkovita pri adjuvansu primeneniis namen pri tako imenovanem preostalo opuholevoybolezni. Pri veliko tumorsko maso učinkovitosti vaktsinoterapiia vnaprej znatno nižja, saj je v teh primerih pogosto nablyudaetsyanedostatochnoe penetracije v tumorskih efektorskih celic generirovannyhv posledica cepljenja.

Cepivo je lahko neučinkovita pri bolnikih z bystrymopuholevym rasti, saj napredovanja zlokachestvennyeopuholi genetsko nestabilna (posledica mutacij), in se lahko razprši in "utaja" Novi tumor kloni otraspoznavaniya imunskega sistema gostiteljici. Zato mnogi klinicheskieissledovaniya-DC terapija cepivo opravili pri bolnikih z minimalnoyostatochnoy boleznijo. To je zaradi odločitve o tako pomembni zadachkak povečanje preživetja in ponovitve brez obdobju. Skupaj pomorejo uporabo sodobnih metod imunoterapije pri bolnikih z disseminirovannymiopuholyami odporen na tradicionalnih zdravljenj, pomogayutbolee popolnoma razumem učinkovitost imunskega odziva, rast biologiyuopuholevogo kot tudi za določitev kraja imunoterapijo pri bolnikih z rakom kompleksnomlechenii.

Pri razvijanju pomembnih načinov testov imeyutlaboratornye s cepljenjem, lahko rezultati, ki napovedujejo klinicheskoetechenie bolezni. Te vključujejo: raziskave spetsificheskihpeptid-HLA-tetramere, intracitoplazemski interferon -, test ELISPOT-testu (enzyme-linked immunospot) polimerazo verige reaktsiyas reverzne transkriptaze (Sznol M.? & MarincolaF., 2000). Ti preskusi se omogoči določitev količine antigena le-spetsificheskihT celic v periferni krvi in ​​sposobnost celic T povrezhdatkletki cilja izraža tuj antigen.

Velika polemika postavlja vprašanje izbire materiala za laboratornogoissledovaniya pri ocenjevanju odziva na vaccinotherapy: perifericheskayakrov, tumor tkiva ali limfni odcejene vsebine uzly.Opredelenie za efektor kletokv obtoku krvi antigen specifične je označen kot najpomembnejši. Skupaj pomorejo je treba preučiti povezavo laboratorijskih parametrov iotsrochennogo regresijo tumorjev. S praktičnega vidika še metode naibolsheeznachenie klinično oceno terapevtskega učinka (popolna, delna regresija, stabilizacijo procesov in trajanje).

Trenutno smo razpravljali različne vrste mieloidnih DCS ki so lahko primerni za klinično uporabo: DC izoliranih iz periferne krvi, izih goji ex vivo predniških kostnega mozga (CD34 + -gemopoeticheskie stvolovyekletki), dobljene iz periferne krvi monociti. Vnesite DK- določeno stopnjo zrelosti hematopoetičnih celic kostnega mozga Farlands, ki igrajo pomembno stimulacijo vloga tipuantigennoy. Srečanje z imunogene antigena prispevajo k zorenja ali aktivacije in funkcijo lahko spremenijo (npr migracije, stimulacije T-celic, citokinsko produkcijo, itd).

Hkrati izmerjena različnimi metodami dostavni dlyaDK ex vivo antigen. DC se uporablja za aktiviranje posebne peptide, vendar je njihova uporaba omejena zaradi odvisnosti od HLA fenotipapatsienta (Nestle F., 2000). V nekaterih tumorjih opuholeassotsiirovannyeantigeny ostajajo neznani, vendar tselnyhopuholevyh uporabljeni celični lizat (Ashley D. et al., 1997), peptidi, elyuirovannyes površinsko avtolognih tumorskih celic, konjugatov "DK-opuholevayakletka" (Hart I. & Colaço C., 1997). Opuholevoykletki RNA in DNA lahko transfektiramo tudi v DC za antigennogoopuholevogo proteinsko sintezo in / ali predstavitve na svoji površini immunogennyhpeptidov (Nair S. et al., 1998- Philip R. et al., 1998). Protivoopuholevymeffektom imajo tudi eksozomov, ki so "antigen predstavlyayuschiepuzyrki"Izvedena iz tumorske celice ali DC (ZitvogelL. Et al., 1999).

Nedavno je bilo, da je izbira tipa DC klinicheskogoprimeneniya odvisna od vrste antigena (Serody J. et al., 2000) dk Postopek antigen, ki se lahko dostavijo kot peptid, protein ali genskega cepiva. Nezrele DC, ki ispolzuyutendotsitoz aktivno in učinkovito zajemanje eksozomov lahko naiboleepodhodyaschimi za dovajanje imunogena ali antigenska protein kompleksov.V kontrast je, zrele DC z visoko ekspresijo HLAmolekul lahko najbolj primerna za uporabo peptidov.Korotkie peptidi (od 8 do 10 aminokislinskih ostankov) lahko napryamuyusvyazyvatsya z HLA molekule (poglavitnega histokompatibilnega kompleksa molekule) na površini DCS in ne potrebujejo zajemanje antigenom in klinični protsessinge.V issled vaniyah ocenjen molekulsko biologicheskiemetody ki prispevajo k povečanju funkcionalni aktivnostiDK. Genska manipulacija DCS ex vivo spodbuja ekspresijo molekul naih citokinov ali imunostimulatorni molekule, ki lahko okrepijo interakcijo DPP-celic in kot rezultat, izzove imunski odziv proti tumorjem (Philip R. et al., 1998).

tudi iskanje optimalnega odmerka DC cepljenje razrabatyvaetsyagrafik, ocenili poti dajanja cepiva DC. Ugotovljeno je bilo, da mora imeti DC naslednje lastnosti:

1) po kultiviranju ex vivo v vivov izvedljiva za dolgo časa, saj ne more izpolniti edinstveno dostatochnodolgo (redko) antigenspetsificheskieT celic v limfne vozle;
2) učinkovito migrirajo limfe uzlam-
3) lažje in vivo efektorsko funkcijo celic T.
Poleg tega je stopnja preživetja pri in vivo efektorskih generirovannyhs T celic s cepljenjem, zahteva nenehno stimulacijo, s čimer zagotavlja optimalno in stabilno lege tumorja.

Pomembno je klinično oceniti subkutano, intradermalno, intravensko vnutrilimfaticheskoei DC cepiv. Uvedba cepiva v perifericheskielimfaticheskie vozlišč zahteva naloženi DC selijo v limfoidnuyutkan in dolgoročno vzdrževanje je izziv sposobnost celic. Intravensko, DK odlagajo v pljučih, jetrih, vranici in kostnem mozgu, vendar niso odkriti v tumorju ali limfaticheskihuzlah formacije (Morse M. et al., 1999). V protivopolozhnostetomu, študije z intradermalno dajanje DCS, ki izhajajo iz monocitov, DC pokazala migracije limfaticheskieuzly. Te študije uporabili nezrelih DC in njihova kolichestvobylo nepomembno. Večina DC ostanejo na mestu injiciranja (Thomas R. et al., 1999). To kaže, da so prebivalstvo nezrelyeDK optimalna za doseganje vaktsinoylimfoidnoy tkiva. Vendar Schuler-Thurner B. s sod. (2000) uporablja DC izvedene iz monocite ex vivo, ki effektivnostimulirovali protitumorskega imunskega odziva. Brez treba neposredna sravneniyaeti podatki lahko pripišemo učinkovito migracijo in predstavleniemopuholespetsificheskogo antigenov limfocitom T aktivirane exvivo DC.

Obetaven je uporaba DC-cepivi gemopoeticheskimifaktorami, vnetnih posrednikov, T-celice ali drugimitsitokinami (Flt-3 ligand, granulocitno-makrofagne koloniestimuliruyuschiyfaktor, CD40-liganda, interlevkina-2, -12, interferoni?,?, Itd). Te rekombinantna celica elementi, se lahko uporabijo v kakadyuvanty DK-vaccinotherapy (Pulendran B. et al., 1998- Williamson E. et al., 1999- Nestle F. et al., 2001).

Torej, pregled podatkov o literaturi predstavljenih kaže, da so lahko metode cepiva na osnovi DC onkologicheskihbolnyh zdravljenje zelo raznolika. Razvoj perspektivnyhmetodov terapijo cepiva DC, prispevali k napredku v oblastimolekulyarnoy biologije, hibridom tehnologije, rekombinantnyeformy različnih biološko aktivnih snovi in ​​veliko drugiedostizheniya.

Vprašanje učinkovitosti cepiva proti raku, terapevtske in adjuvans primenyaemyhs ciljev bo temeljila na pridobivanju obektivnyhdannyh povečanje pričakovane življenjske dobe bolnikov z rakom, ne obstaja nevarnost zapletov, povezanih s cepivom in sootnosheniistoimost / učinkovitosti.