Limfokina aktivirajo celice ubijalke za cepljenje. Učinek-limfokina aktivirane celice ubijalke v prirojene imunosti

IL-2 ali eksogeni analogi stimulirajo proliferacijo naravnih celic ubijalk in utrdi citolitično funkcijo, ki vodi do nastanka tako imenovanih-limfokinov aktivira ubijalskih (LAK). Po svoji naravi, LAK so citotoksičnih limfocitov, ki so sposobni uničevanja celic, okuženih z virusi ali znotrajceličnih bakterij in tumorskih celic. V tem trenutku je možnost zdravljenja LAK od preučevali pri različnih oblik raka. V infekcijskih bolezni praktično raziskali adaptivno prenos Postopek LAK.
ta vprašanje Imeli smo študiral na okužbo miši K. pneumoniae K2 CBA kulture seva.

Limfokina aktivira morilec ML pripravimo iz vranice miši, ko kultiviramo za dva dni v RPMI-1640 medij, ki vsebuje 1000 IU / ml IL-2, smo celice izprali in uporabljene v poskusu.
Morfogistohimicheskie študija Ti so pokazali, da LAK celice predstavljajo veliko število limfni in tip immunoblast prolymphocytes z bazofilno citoplazmo. V madeži so pogosto najdemo pri delitvi celic na mitotićno stanje. V fazi kontrast mikroskopija LAK celice predstavljajo bolj razširjeni konglomerate.

Tako, ko Učinki za IL-2 v MT vranice miši je prišlo generacijo LAK, označen s proliferacijo in aktivacijo limfoidnih celic. Povečana ekspresija antigenov aktivacijskih-onnyh ki funkcije immunophenotype LAC pričal tudi aktivacije limfocitov procese. Poleg tega smo ugotovili, da je LAC bistveno večjo aktivnost morilec v primerjavi z neokrnjeno ML v zvezi z NK občutljive celične liniji mišjega limfoma YAC-1.

V skladu s splošnim prepričanjem, NK - glavni podskupina limfocitov izražajo r75r receptorja verigo IL-2 in selektivno aktivira in bolj razširjeni pod njegovim vplivom na tvorita LAC sposoben učinkovito lizirajo ciljne tumorske celice. Vendar pa skupaj z zgornjimi zamisli, obstaja dokaz o obstoju prebivalstva v LAK NKT-celice, ki izražajo le NK (CD16, CD56) označevalcev, ampak tudi antigenov diferenciacije celic T (CD3, CD4, CD8).

ti podatki izpolnjujejo prejšnje Predlagana NK-celice, ki se štejejo ne le kot samostojna podskupini, ampak tudi kot stopnjo diferenciacije zrelih limfocitov. Iz zrelih limfocitov z inkubacijo z IL-2, lahko pripravimo s tako imenovanimi NK-LAK celic.

v naši ML poskusi po pridelavi vranice z IL-2 Dobimo LAC izražajo v njihovem aktivacijo membrana molekule (CD25) in molekule glavnega histo-kompatibilnost kompleks MHC I, MHC II. Hkrati je v populaciji LAK razen NK, prisotnih ekspresirajočih celic in antigenov diferenciacije celic T (CD3, CD4, CD8).

Najnovejše v enakih zneskih bili odkriti v začetni populaciji ML. Uporabljena tehnologija pridobitev-limfokinov aktivira morilca Zagotovljena je bila znatno povečanje NK-celic z 1,5 do 20,3% in celice, ki vsebujejo označevalne molekule CD25 in predstavitev antigenski MHC I in II.

Nastali Suspenzijo limfokinov-aktivirane celice ubijalke smo mišim intraperitonealno 2,5 x 106 celic v 0,5 ml 0,9% raztopine natrijevega klorida. Potem, intraperitonealno injicirali 250 celic v volumnu 0,5 ml K pneumoniae K2. Ker so kontrole uporablja ML kultiviramo v prisotnosti PHA (10 ug / ml).

Limfokina aktivira morilec okužene K. pneumoniae (100 LD50) miši zagotovi 100% preživetje živali pri skoraj sočasno intraperitonalno mikrobnih celic in killer. ML, PHA-aktiviran, zaščiteni v 50% pri 100% usmrtitve nepoškodovanih miši prejemajo okuženja enak odmerek.
Naše raziskave potrditev Študija izvedljivosti o uporabi LAK za posvojitelj imunoterapijo, kot uvedemo v miši intraperitonealno LAK K. pneumoniae K2 preprečuje razvoj bolezni pri živalih.

Pri določanju citokinov v gojitvenem mediju bili odkriti LAK povečana vsebnost IL-1, po 24 urah in 72 urah inkubacije (254 + 12,3 pg / ml in 213 ± 11,5 pg / ml) po 72 urah - IL-6 (224 ± 21 2 pg / ml) in IL-10 (150 ± 10,5 pg / ml) v primerjavi s kulturo mL (Vsebina teh citokinov v kontrolah ni presegala 25-80 pg / ml) inkubiramo brez IL-2. Zanimivo je, da v kulturi srednje LAC ni povečala vsebino regulativnega IL-12, da smo v velikih količinah, določenih v gojitvenem mediju DK.

citotoksična Aktivnost-limfokinov aktiviran killer, izhaja iz vranice miši (ASK) določimo na NK občutljivih YAC-1 linije celic mišjega limfoma pri vračilu Testna 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolijevega bromida (MTT-test). Tumorske celice (1 x 104 na 1 ml) smo inkubirali v gojišče z LAK v različnih razmerjih in absorbanco pri 540 nm smo izračunali odstotek tumorja lizo celic (v odstotkih citotoksičnosti).
Pogojih Killer aktivnost efektorskih celic pokazala, da LAK imajo bistveno višjo NK aktivnost v primerjavi z nepoškodovano miši ML.

V razmerju 1: 5 LAK in tumorske celice Glodalcih limfoma YAC-1 citotoksično aktivnost celic ubijalk povečala 6-krat v primerjavi z ML. Pod temi pogoji, 15,5% ML lizirali celične linije K562, medtem ko pod podobnimi pogoji LAK povzročil 92,2% smrt tumorskih celic (p < 0,01). В меньших соотношениях мишени/эффекторы (1:2 и 1:1) эти различия не столь значимы, хотя цитотоксическая активность ЛАК превышает таковую у МЛ интактных мышей.