D-dimer: kakšna je norma

Delovanje encimskega kompleksa t-PA-plazminogena proizvaja encim, ki lahko uniči fibrinskega strdka, - plazmina. Med razgradnjo fibrina, izvaja to ključni encim v fibrinolitičnega sistema na protofibrilov (D = D-E-D = D-E-D = D) ločena D-dimeri (D = D) in E fragmentov (E-). Ker D-dimera je D-D-povezave (zamreženja), ki so odsotni v fibrinogen, fibrin monomera in ohlapne fibrinske polimera, povečanje njegove koncentracije v krvi označuje izvedbo aktivacije koagulacije in fibrinolize.

Princip metode

Princip metode ELISA temelji na specifične vezave D-dimera monoklonskega protitelesa na mikroploščnem površini. Po odstranitvi snovi, ki niso vezane na mikroplošče, inkubiramo s protitelesom encimsko označeno (konjugirano). Kot rezultat, na mikroploščnem površini pojavi pristopna protitelesa označeni z encimom kompleksi obstoječega D-dimera-anti-O-dimera. Dodano po spiranju 3,3`, 5,5`-tetrametilbenzidina omogoča ovrednotiti encimsko aktivnost z značilno obarvanost testnega zmesi. Intenzivnost barve je sorazmerna s encimske aktivnosti in s tem tudi količino analita v vzorcu.

Reagenti in oprema

• Encimski konjugat (zajec ali kozje protitelo konjugirano na hrenovo peroksidazo).
• Mikroplošči prevlečena z anti-D-dimera luknjo.
• Kalibrator / kalibratorji.
• Vzorec pufer.
• Pralni pufer.
• Raztopino kromogena / substrata (kromogena - tetrametilbenzidina, substrata - vodikovega peroksida).
• Raztopina za ustavitev reakcije (0,5 M žveplovo kislino).
• Oprema za opravljanje ELISA (pranje, bralnik za tablične računalnike in druge.).

Distributer Diagnostični komplet reagentov - CJSC "BIOHIMMAK".

Vzorce krvi za raziskave

Kot vzorec za določanje koncentracije D-dimera, uporaba stabilizirane plazme natrijevega citrata polni krvi. Značilnosti pripravo vzorcev podrobno pregledali v prilogi 3.

Videoposnetki: Povečanje D-dimer z zunajtelesno oploditvijo (? Ali e-dimer implantacije)

Metode določanja

Reagenti vključena v komplet, in ploščo pred testom mora biti pri sobni temperaturi. Zaporedje ukrepov laboratorij zdravnik pri določanju ravni D-dimera biti strogo v skladu z navodili za reagent kit.

Video: Express analizator srčnih markerjev in D-dimer RAMP Reader

Rezultati ocenjevanja študije za merjenje je koncentracija D-dimera potrebno uporabiti kalibracijske krivulje. Kalibratorji v dveh izvodih je priporočljivo raziskati definicije, kot tudi zgraditi novo umeritveno krivuljo za vsako novo opremo za diagnosticiranje. Za izdelavo umeritvene krivulje s pomočjo vrednosti absorbance, dobljene pri odkrivanju različnih koncentracij D-dimera.

Poudariti je treba, da je v času pisanja monografije ni splošno sprejete standardne D-dimer, da proizvajalci uporabljajo različne diagnostičnih kompletov in vzorcev enot za njeno določanje. Poleg tradicionalnih vsebnosti oznake mase na volumsko enoto (mg / l ng / ml, ug / ml, mg / l nmol / l), številni proizvajalci diagnostičnih kits predlogov določanje D-dimera ocenjenih v enotah, enakovrednih fibrinogen (FEU mg / L).

Video: Mazanje prestave mlinček (LBM)

Ta lastnost je zelo pomemben dejavnik, saj je v različnih izvedbah predstavitev rezultatov raziskav pojavi koncentracija (mg / ml), in normalno območje in rezultati za določanje različnih merilnih enot razlikujeta za približno 2-krat. Pogosto zaradi pomanjkanja enotnih standardov, razlike v ozadju mnogih bolezenskih stanj (DIC, pljučno embolijo in številnih drugih), če uporabljajo različne možnosti za izražanje rezultatov razlikujeta za več kot 2-krat.

Formula za izračun rezultatov določitev koncentracije D-dimera v enotah SI: [nmol / L] = [ig / ml] x 5476. Najpogosteje uporabljena masa enote ustrezajo seboj, kot sledi: 250 ng / ml = 0,25 ug / ml = 0,25 mg / l = 250 g / l.

Normale koncentracijo D-dimera je treba določiti v vsakem laboratoriju z značilnostmi opreme in potrošnega materiala. Normalne ravni D-dimera, navedeni večina izdelovalcev manjša od 250 mg / l, manjša od 0,5 mg / l FEU. Ker je razpolovna doba D-dimera več kot 24 ur, njena višina je stabilen dovolj dolgo.

Vrednotenje rezultatov preskusov je treba opraviti ob upoštevanju opredelitev pravilnosti. Za nadzor kakovosti vsakega kontrolnih laboratorijev, predlaganih za uporabo materialov z enotami, ki jih priporoča proizvajalec.

Razlaga rezultatov ankete

Določitev koncentracije D-dimera se pogosto uporablja za odkrivanje tromboze in tromboembolijo. Posebnost tega indeksa v zvezi z trombotičnih motenj je omejena, ker je ta indeks poveča, in na številnih drugih bolezenskih stanj.

Kljub omejenim specifičnosti testa, je zelo visoka informacije tromboza vsebine in trombembolija ker test kaže zelo dobro negativno napovedno ravni, tj. E. rezultat negativen test je skoraj vedno priča o odsotnosti trombemboličnih procesov.

Visoke vrednosti D-dimera je treba razlagati ob upoštevanju rezultate drugih preskusov in kliničnih znakov bolezni. Ta indeks se uporablja tudi za ocenjevanje antitrombotične učinkovitosti zdravljenja.

Druge analitične tehnike Dodatno ELISA za določanje D-dimera znamke in drugih imunoloških tehnik (immunoturbidimetry, immunohemilyuminestsentsiya, lateks aglutinacijski immunochromatography, membrana imunodifuzije). Na trgu se pogosto zastopana semikvantitativno načine za določanje. Mnogi sodobni modeli avtomatskih in polavtomatskih koagulacije lahko količinsko raven D-dimera uporabo immunoturbidimetry.

Vzroki napak

• Neupoštevanje način za shranjevanje temperature.
• Kršitev pralnem postopku (za ročno pranje je treba oprati vsaj 3-4 krat). Po izpiranju z odtočno ploščo na filtrirni papir kot tekočina, običajno ostane v vdolbinice Po izpiranju lahko moti spodnji substrata in optični gostoti vzorca.
• Mešanje reagentov iz različnih sklopov.
• Kondenzacije znotraj vrtine. Da bi preprečili nastanek kondenza ne sme odpreti paket, do takrat, dokler se ne ogreje na sobno temperaturo.