Fagocitne aktivnost dendritične celice. Immunophenotype dendritičnih celic

dendritične celice, izvedena iz kostnega mozga celic miši smo testirali glede na njihovo sposobnost fagocitozo. Fagocitne aktivnosti NS v različnih fazah diferenciacije, aktivira Immunovac-PE-4 ter klasično induktor Aco zorenja TNF-a, je bila ocenjena pri vpojnosti proti sevov S. aureus in S. typhimurium. Kot kontrolo smo uporabili makrofagov, ki so bili pripravljeni iz istih celic kostnega mozga z njihovim gojenjem z GM-CSF za 7 dni.
Nezrele dendritične celice bolj aktivno fagocitirane bakterije, za razliko od DC zdraviti Immunovac-VP-4, ACO in TNF-a.

Fagocitne aktivnosti makrofagov in dendritičnih celic so preučevali v dinamiki proti S. aureus in S. typhimurium.
Najbolj aktivni so makrofagi, jih fagocitne indeksa glede na S. aureus po 30 minutah inkubacije je bila 86,0 ± 4,8%, in je ostala na visoki ravni za opazovanje tri ure.

fagocitne dejavnost nezrele DC stimuliramo in imunomodulatorji mikrobnega izvora bili pomembno različni.
Ko dodamo k sreda kultiviranje TNF-a ali Immunovac-VI-4 (skupine 2 in 3), je bila fagocitne aktivnosti bistveno nižje, z dodatkom Immunovac-VP-4 indeksa fagocitne je nekoliko večja kot v primeru pod vplivom DC zorenja TNF-a. Pod vplivom SOA je pokazala tudi zmanjšanje fagocitozo so DC, vendar je njegova stopnja je bila višja od Immunovac-VP-4, kar lahko kaže na prisotnost v kulturi nezrelih so DC in makrofagov. Če primerjamo stopnjo fagocitoze S. aureus in S. ty-phimurium bilo ugotovljenih večjih razlik.

dobro verjetno, da višja aktivnost dendritične celice bakterije absorpcije stimulira Immunovac-VP-4 in Aco ekspresijskih zaradi Tollu podobnih receptorjev, DCS in makrofage, ki imajo afiniteto za patogenom, povezanim struktur bakterij. Po reakciji z bakterijskimi proizvodov, DC prenese v novo funkcionalno stanje, ki se odraža v zmanjšanju fagocitne aktivnosti in sposobnostjo močnejši predstavitev antigena v primerjavi z makrofagi.

študija immunophenotypic lastnosti dendritične celice na so različne faze zorenja izvedena z uporabo flyuorestseinizotiotsianat in PE-označenih monoklonskih protiteles podjetja, ZDA «Caltag».

Stopnja diferenciacije in zrele dendritične celice, izvira iz embrionalnih mišjih jetrnih celic določimo s spremembo v nivo ekspresije diferenciacije molekul CD34, CD38, CD40, CD80, CD86, CD83, F4 / 80, MHC, MHC II po 3 dni po dodatku k nezrele dendritične celice Immunovac-VP-4, bakterijski lizat K. pneumoniae ali TNF-a.

ugotovitve oddaja da TNF-a oz Immunovac-VP-4 v preučevanih koncentracijah stimulirane DC zorenje. Vendar sodeč po izražanju diferenciacije markerjev, TNF-a aktivirano DC zorenja v večji meri kot Immunovac-VP-4 in lizata K. pneumoniae. Koncentracija 25 ug / ml Immunovac-PE-4 je optimalna za indukcijo DK- zorenja pod temi pogoji je bila stopnja izražanja kostimulatornih molekul višja. Vendar pa izraz F4 / 80 molekul, DCS stimulirane Immunovac-VP-4 in lizata K. pneumoniae, ostala visoka (23,8 ± 2,6% in 21,2 ± 3,4%, v tem zaporedju) v primerjavi z DC, obdelamo s TNF-a (0,6 ± 0,2%).

Raziskati, je bil tudi immunophenotype dendritičnih celic, izvedena iz kostnega mozga miši. Kot zorenje induktorji uporablja imunomodulatorji bakterijskega izvora - Immunovac-VP-4 GMDP, ASO, in kot kontrolo - lizata LPS in K. pneumoniae, in TNF-a.

Aktivacija celic preko Immunovac-VI-4 GMDP in vodi do zorenja celic. Poveča ekspresije kostimulatornih molekul, CD38 adhezijske molekule. Tako so koncentracije uporabljene Immunovac-PE-4 imelo različne učinke na raven MHC. Pri odmerku 25 ug / ml ekspresijo MHC sem, da 2,7-krat večja kot pri koncentraciji 50 ug / ml. MHC II izraz je visoka na obeh odmerkih in ni imela znatne razlike. GMDP povečana vsebnost DC izražanje MHC razreda II.

Uporaba lizat K. pneumoniae in LPS izboljšana raven izraza kostimulatornih molekul MHC molekule, ki predstavljajo antigenski I in II.

Pri uporabi ACO kot induktor DC zorenje dvojno podajo CD34 izraza je prišlo do precejšnjih sprememb v odvisnosti od odmerka. Njegova dinamika opazili samo pri najvišjih odmerkih. Pri uporabi ARF v dozi 0,3 / ml povečano CD80 vsebino EU, CD86, MHC-ekspresirajočih celic. Vendar pa je bila stopnja CD86 nižja kot pri drugih induktorjev zorenja. Izražanje označevalca F4 / 80 do DC stimulira Immunovac-VI-4 je lahko povezano s prisotnostjo bakterijskega LPS v vakcini. Ti rezultati potrjujejo sposobnost DCS pridobljenih predhodno zdravljeni z LPS, ne izražajo antigene samo zrele DC, ampak tudi receptorje za LPS.

naslednji poskusi Raziskovali smo izražanje teh označevalcev v kombinaciji immmunomodulyatorov mikrobnega izvora (IMMP) s TNF-a. Gojenje DC v prisotnosti GM-CSF in IL-4 z dodatkom na šesti dan 2,5 ng / ml TNF-a in IMMP DC zorenja stimulirana v večji meri kot TNF-a ter nižjo vzdrževalni odmerek pri kulturi makrofagov. Sam po sebi, TNF-a v koncentraciji 2,5 ng / ml (skupina 3) ni povzročil DC zorenja v primerjavi s kontrolo (skupina 2), je bila CD34 nezrele dvojno podajo 5-krat večja, F4 / 80 - 11,4-krat, to se kaže, da je velik interes v kulturi makrofagov. Ko pa koinkubatsii 2,5 ng / ml TNF-a izraz se pojavili pri imunomodulatorji povečanje CD38 adhezijsko molekulo, kostimulatorne molekule CD40, CD80, CD86 in MHC I in razreda II.

zlasti to velja za ASO, koinkubatsiya saj s TNF-a stimuliran izražanja površinskih markerjev specifičnih DC. S tem se zmanjša označevalec CD34, v primerjavi s nezrelem DC (skupina 1) za 3,4-krat, povečano ekspresijo adhezijskih molekul CD38 3,2-krat, kostimulatornih molekul CD40 38-krat, CD80 in CD86 skoraj 9-krat, MHC I 2 7 in MHC II 1,5-krat, raven makrofagne marker zmanjšal za 3,6-krat. Ob vstopu v kulturi, medij TNF-a oz Immunovac-VI-4 je najti tudi stimulacijo učinkom, ki izraža, da znatno poveča ekspresijo MHC I in II ter zmanjšano vsebnost F4 / 80 v primerjavi z delovanjem Immunovac-VI-4 v istem odmerku (tabela. 7). Podobne rezultate smo dobili s kombinacijo TNF-a (2,5 ng / ml) in GMDP, vendar z izrazom CD40, CD80, CD86 in MHC II je bil večji v primeru kombinacije TNF-a in Immunovac-VP-4.
ugotovitve oddaja, ki je uvod v gojitvenem mediju majhna količina TNF-a poveča potencial DC zorenja pod vplivom imunomodulatorji mikrobnega izvora.