Določitev sistema proteina C aktivnost z

Gen odgovoren za sintezo proteina C, je lokalizirana na kromosomu 2 (ql3-ql4). Glavna funkcija tega fiziološke antikoagulanta je glavni neencimskih inaktivacijo faktorjev strjevanja (FVa, FVIlla).

Video: Priprava za odstranjevanje strupov iz telesa

Bolniki s prirojenim pomanjkanjem proteina C, obstaja težnja periodično trombozo in tromboembolijo. Pomanjkanje proteina C se deduje avtosomno, homozigoti in dvojna heterozigoti umrli v zgodnjem otroštvu od tromboze.

Princip metode

Metoda temelji na oceni zmesi aPTT (razredčenega vzorca PBB, pomanjkanjem proteina C v plazmi, proteina C aktivatorja aPTT reagenta). Protein C se aktivira PRP testnem vzorcu reagent pripravimo Copperhead kačjega strupa iz Agkistrodon contortrix. Aktivirani protein C koagulacijski uničuje faktorjev Va in Vila, vsebovanega v mešanici preskusnega vzorca in dodamo s pomanjkanjem proteina C v plazmi, s čimer se podaljšuje za aPTT se vodi po dodatku kalcijevega klorida. Pri nizkih aktivnosti proteina C izrazimo nekoliko podaljšamo APTT. Kalibracija Razredčine vzorec BTP omogočajo krivuljo in za določitev aktivnosti proteina C.

Videoposnetek: dušikovi oksidi (NO)

Reagenti in oprema

• Protein C aktivator (Protac).
• APTT reagent.
• Pomanjkljiva pri proteina C v plazmi.
• Raztopino kalcijevega klorida (0,025 M).
• Puferna raztopina.
• PRP vzorec z znano aktivnostjo proteina C.
• Koagulometrska.

Vzorce krvi za raziskave

Za določitev aktivnosti proteina C se uporablja BTP.

Nadalje pripravimo primerki kalibracijske in testni vzorec razredčimo s pufrom v razmerju 1:10.

Vrednotenje rezultatov študije

Za izdelavo umeritvene krivulje zahteva PBB vzorec znano aktivnostjo proteina S. Za izdelavo umeritvene krivulje s pomočjo strjevanja čas v sekundah, dobljenega v študiji razredčenih vzorcev kalibracijskih z znano aktivnostjo proteina C.

Razlaga rezultatov ankete

Klinično sliko prirojenim pomanjkanjem proteina C prevladujejo periodičnega venske tromboze in tromboembolijo. Številni bolniki s kožna nekroza, splava, in drugi. Pri dojenčkih s pomanjkanjem proteina C se pogosto opazimo maligni purpura (purpuro fulminans).

Pridobljene pomanjkanje proteina C lahko zaradi nezadostne sinteze hepatocitov, povečane porabe zaradi motorja z notranjim zgorevanjem, zdravljenje s posrednimi antikoagulanti in druge. Nekateri bolniki z VA opazili precenitev njenega delovanja.

Vzroki napak

• Napake preanalytical fazo študije.
• Stik s heparinom preučevali kri iz venski kateter.

Druge analitične tehnike

Funkcionalno aktivnost amidolitični določi ali koagulacijskih postopki proteina C.

Video: D. Mavrodi Predavanje # 3 "Vloga sistemov izločanja tretje vrste beljakovin v ..."

Za določitev koncentracije proteina C z uporabo ELISA, vendar, če primerjamo rezultate imunološko in funkcionalne tehnike neusklajenost rezultate pri bolnikih z molekulsko anomalijami proteina C.

Beljakovine S aktivnost

Beljakovine S - vitamina K odvisne glikoprotein vključena kot ne-encimski kofaktor aktiviranega proteina C razgradnih proteolitični Va in Villa koagulacijskih faktorjev. Gen odgovoren za sintezo proteina S, ki je lociran na kromosomu 3 v humani položaju pll.l-qll.2. Proteina S v krvi, ki so v dveh različicah: kot proste protein (okoli 40%) in kot povezan s S4-komponente komplementa (približno 60%). Zmanjšanje proteina S aktivnost poveča tveganje za trombozo in tromboembolijo.

Princip metode

Funkcionalne tehnike temeljijo na registrirana resnost podaljškom zmes za strjevanje proteina S pomanjkanjem plazmi in plazmi raziskovali pri uporabi dajemo v aktiviranega proteina C. Preskus sistem za oceno časa strjevanja v podobnem testnem sistemu proizvajalci uporabljajo različne strjevanjem stimulanse (Russell gad strupa, APTT reagent aktivirani koagulacijski faktor IX ali al.). Pri normalnem vsebnost proteinov je pod vplivom aktivirani protein C povzroči znatno podaljšamo čas strjevanja (zaradi uničenja neencimatskimi koagulacijskih faktorjev) ker pomanjkanjem proteina S izrazimo mnogo šibkejše (zaradi neučinkovite uničevanje neencimatskimi dejavnikov aktivirani protein C).

Reagenti in oprema

• pomanjkljiva plazemski protein S.
• Aktivacijski reagent (fosfolipidov, Russell gad venom ali drugih aktivatorjev, heparina nevtralizacijsko sredstvo, itd).
• Aktiviranega proteina C.
• Raztopino kalcijevega klorida (0,025 M).
• Puferna raztopina.
• PRP vzorec z znano vsebnostjo proteina S.
• Koagulometrska.

Vzorce krvi za študijo za določitev aktivnosti proteina S pomočjo PPP.

Nato zmes pripravimo in raziskali BTP pufer raztopina Vzorce smo razredčili 1:10.

Metode določanja

Potek določanja S aktivnost proteina bistveno razlikuje s pomočjo reagentov in opreme različnih proizvajalcev, tako da je treba tožbo zaporedje laboratorij zdravnik strogo v skladu z navodili v kompletu reagenta in ga prilagoditi obstoječih laboratorijev v Koagulometrska.

Vrednotenje rezultatov študije

Čas študija koagulacijski razredčene PRP vzorcev z znano koncentracijo proteina S omogoča gradnjo kalibracijske krivulje za določitev aktivnosti tega fiziološke antikoagulacijskega odstotkov normalnega.

Pri zdravih ljudeh, aktivnost proteina S v območju 60-130%.

Razlaga rezultatov ankete

Prirojeno pomanjkanje proteina S - redka okvara antikoagulant hemostazo. Prvi opis pomanjkanjem proteina S smo uvedli v 1984 NR Schwarz et al. Klinična slika bolezni prevladujejo ponavljajoče se flebotromboza in tromboembolijo. Tako kot mnoge druge okvare antikoagulantni hemostazo, se ta patologija prenaša avtosomnem. Za razlikovanje med tremi vrstami prirojenim pomanjkanjem proteina S.

Možnosti prirojeno pomanjkanje proteina S

• Tip: metoda sem Koalicija: Snizhen- Brezplačna beljakovin S: beljakovin Skupaj Snizhen- S: zmanjšana.
• Tip: metoda II Koalicija: Snizhen- Brezplačna beljakovin S: Normalizacija celotnega proteina S: Norm.
• Tip: Metoda III Koalicija: Snizhen- Brezplačna beljakovin S: beljakovin Skupaj Snizhen- S: Norm.

Tipa I je značilna nizko vsebnostjo proteinov S pomočjo njegovega imunološkega določanje različnih izvedbah ter zmanjša njegovo funkcionalno aktivnost. V vrsti pomanjkljivost II opazili zmanjšanje v funkcionalno aktivnost pa skupaj in prosti S proteinska frakcija ne krši. Tip III kaže kombinirano znižanje funkcionalno aktivnost prosti proteina S in njegove frakcije. Tako, da prepoznajo vrsto pomanjkanjem proteina S, je potrebno uporabiti koagulacije in imunoloških metod za njihovo določitev.

V klinični praksi lahko je veliko bolj pogosta pridobili pomanjkanje proteina S. omejeno aktivnosti proteina S je na voljo v nefrotskega sindroma, nosečnosti, estrogensko terapijo, L-asparaginaza, in drugi. Pri dojenčkih s pomanjkanjem proteina S opazili maligni purpura (purpure fulminans).

Vzroki napak

• Heparin z venski kateter.
• Hemoliza v testnem vzorcu krvi.
• Nepravilno dozirna citrata pri jemanju krvi.

Druge analizne postopke precej razširjena metoda, ki temelji na uporabi ELISA za določanje prostega proteina S in S4 povezan s komponento komplementa. opisana tudi (vendar ne na trgu) funkcionalno metodo določanja tega antikoagulant, ki temelji na uporabi kromogenih substratov.