Laboratorijske metode raziskovanja. proteinurija

Video: laboratorijske študije: Hematologija

Vsebina

Video: laboratorijske študije: hematologija

Ledvic (res) proteinurija
Zunajledvičnega (false) proteinurija

Določitev beljakovin v urinu

Določitev dnevnega proteinurije
K = (x·-v) / 1000

Selektivni proteinurija
&beta2-mikroglobulin
Povprečne krvi in urina molekule
Neplazmennye (tkivo) uroproteiny
Študija encimov v krvi in urinu
Bence-jones proteina

Majhne količine beljakovin najdemo v dnevnem urinu zdravih posameznikov. Vendar pa take nizke koncentracije ni mogoče odkriti z običajnimi raziskovalnih metod. Izolacija večjih količin beljakovin, za katere običajni kvalitativni preizkusi za beljakovine v urinu postala pozitivna, v nadaljnjem besedilu proteinurijo. Razlikovati ledvic (pravo) in zunajledvičnega (lažno) proteinurije. V ledvic proteinurije proteina v urinu prodre neposredno iz krvi zaradi povečanja njenega filtriranje in zmanjšanje ledvične glomerulov tubularne reabsorpcije.

Ledvic (res) proteinurija

Ledvic (res), proteinurija je funkcionalna in ekološko. najpogosteje opazili po svojih vrstah med funkcionalno ledvično proteinurijo:

- fiziološke proteinurije dojenčki, ki izgine pri 4 do 10 dni po rojstvu, in prezgodaj rojenih poznejše;
- ortostatska albuminurija, ki je značilno za otroke, stare od 7-18 let in se pojavlja samo v navpičnem položaju telesa;
- prehodni (kap) albuminurija, ki so lahko vzrok za različne bolezni prebavil, hudo anemijo, opekline, poškodbe ali fizioloških dejavnikov težka vaja, hipotermija, močna čustva, obilje, beljakovinsko bogatih živil in drugih.

Organska (ledvično) proteinurije opazimo zaradi prehoda proteina iz krvnega obtoka skozi poškodovane porcij endotelijskih bolezni glomerulne ledvic (glomerulonefritis, nefrozo, nefroskleroza, amiloidoza, nefropatija noseča), motnje ledvičnega hemodinamskih (ledvično venske hipertenzije, hipoksija), trofičnih in strupene (vključno vključno z zdravili) učinki na glomerulnimi stene kapilar.

Zunajledvičnega (false) proteinurija

Zunajledvičnega (false) proteinurija pri kateri vir beljakovin v urinu je zmes levkocitov, eritrocitov, bakterijami, urotelijskim celic. opazili pri uroloških bolezni (urolitiazo, ledvična tuberkulozo, ledvic in sečil tumorjev, itd).

Določitev beljakovin v urinu

Večina kvalitativne in kvantitativne metode za določanje proteinov v urinu, ki temeljijo na koagulacijo obsega urina ali na vmesnik (in kisline urinu).

Dodatne kvalitativne metode določanja v bedka urina najbolj standardizirane testne s sulfosalicilno kislino in obročastim vzorca Geller.

Enotna preskus s sulfasalitsilovoy kislino poteka na naslednji način. Obe cevi sta zlijemo na 3 ml filtrirane urina. Eden od njih dodamo 6-8 kapljic raztopine 20% sulfasalitsilovoy kisline. Na temnem ozadju so primerjali obe cevi. Zamotnitev urin v epruveti z sulfasalitsilovoy kislino nakazuje prisotnost proteina. Preden je raziskava potrebna za določanje reakcije urina, in če je alkalna, nato nakisamo z 2-3 kapljic 10% -ne raztopine ocetne kisline.

Geller vzorca na podlagi dejstva, da se pojavi prisotnost proteina v urinu na vmesniku dušikove kisline in koagulacijo urina in se pojavi bel obroč. V epruveto zlijemo 2,1 ml 30% raztopine dušikove kisline in nežno plasteh na steno cevi je povsem enako količino filtrirane urina. Pojav belega obroča na meji dveh tekočin kaže na prisotnost beljakovin v urinu. Ne smemo pozabiti, da je včasih bele obroč, tvorjen z velikim številom urata, toda za razliko od proteina se zdi obroč rahlo nad mejo med obema tekočin in raztopimo s segrevanjem [Pletnev NG 1987].

Kvantitativnih metod se najpogosteje uporabljajo:

1) enotno Postopek Brandberg-Roberts-Stolnikova, ki temelji na obročasto vzorcu Geller;
2) fotoelektrokolorimetrichesky Postopek kvantitativno določanje beljakovin v urinu meglico tvorjen na adicijske sulfasalitsilovoy kisline;
3) Preskus biureta.

Protein Identification v urinu poenostavljenem pospešenem postopku izvedemo s kolorimetrično metodo z uporabo indikatorskega papirja, ki jo izdeluje «Lachema» (Slovaška), «Albuphan», «Ames» (Anglija), «Albustix», «Boehringer» (Nemčija), "Comburtest» in drugi. Postopek je potopljena v urinu specialni papirji traku impregnirane tetrabromfenolovym modro in citratnega pufra, ki spremeni barvo iz rumene v modro, odvisno od vsebnosti beljakovin v urinu. Približna koncentracija proteinov v preizkusnem urinu določimo s standardno lestvico. Da bi dobili pravilne rezultate, morajo biti izpolnjeni naslednji pogoji. urin pH je v 3,0-3,5- na preveč alkalnem urinu (pH 6,5) lažno pozitivni rezultati je mogoče računati, in ko preveč kisla urin (pH 3,0) - lažno negativen.

Papir mora biti v stiku s preiskovano urinu ni več, kot je določeno v navodilih, v nasprotnem primeru bo test dal lažno pozitivno reakcijo. Slednje je opaziti tudi, ko je vsebnost v urinu velike količine sluzi. Občutljivost različnih vrst papirja in serije se lahko razlikujejo, tako da je treba kvantitativna ocena proteina v urinu s to metodo obdelamo previdno. Določitev njenega zneska v dnevnem urinu z uporabo test papir ne more [Pletnev NG 1987]

Določitev dnevnega proteinurije

Obstaja več načinov za določanje količine beljakovin, sproščeno v urinu na dan. Najenostavnejši način je Brandberg -Robertsa-Stolnikova.

Metodologija. 5-10 ml temeljito premešano dnevnega urina zlijemo v cev in stene njenega previdno dodamo 30% raztopino dušikove kisline. V navzočnosti proteina v urinu v količini od 0,033% (t.j. 33 mg na 1 liter urina) v 2-3 minutah pojavi subtilne vendar razločno bel obroč. Na nižje koncentracije negativnega vzorca. Na je višja vsebnost beljakovin v urinu določimo s količino urina ponovi razredčitve z destilirano vodo, dokler dokler ni obroča. Končna cev, v kateri je obroč, ki še vedno vidna, bo koncentracija proteina biti 0,033%. 0,033 množenjem stopnjo razredčitve urina, je vsebnost beljakovin določi v 1 litru nerazredčenega urina v gramih. Nato je izračunana vsebnost beljakovin v dnevnem urinu v skladu s formulo:

K = (x·-V) / 1000

pri čemer je K - količina beljakovin v dnevnem urinu (g) - x - količina beljakovin v 1 liter urina (g) - V - količino urina na dan dodeljen (ml).

Običajno čez dan je urin sprosti od 27 do 150 mg (povprečna 40-80 mg) beljakovin.

S tem poskusom omogoča ugotavljanje le urina globa beljakovine (albumin). Natančnejše kvantitativne metode (kolorimetrična metoda po Kjeldahlu et al.) So precej zapletena in zahteva posebno opremo.

V ledvic proteinurije v albumin urina izstopa, ne samo, ampak tudi druge vrste beljakovin. Običajno proteinogramma ima naslednjo odstotek (S Seitz, 1953 idr.): Albumini - 20%, &alfa₁-globulin - 12% &alfa₂-globulin - 17% &gama - globulin - 43% &beta - globulin - 8%. Razmerje albumini za globulin razlikuje pri različnih boleznih ledvic, t.j. moten količinsko razmerje med proteinskimi frakcij.

Najpogostejša metod uroproteinov frakcionirni so naslednji: soljenje nevtralne soli, elektroforetsko frakcioniranje, imunoloških metod (reakciji po katerem Mancini radialni imunsko, imunoelektroforezni preizkus, pretsipitatsionny imunoelektroforezni), kromatografiji, gelsko filtracijo in ultracentrifugiranjem.

Uvedba uroproteinov metode frakcioniranje, ki temeljijo na proučevanju elektroforetsko mobilnost, variabilnosti molekulske mase, velikosti in oblike uroproteinov molekule, je mogoče razporediti specifični za določene študije vrste bolezni proteinurijo razmiki posamezne proteine plazme. Trenutno je opredeljena v urinu nad 40 plazemske proteine, vključno normalni urina plazemske proteine 31 [BERGGÅRD, 1970].

selektivni proteinurija

V zadnjih letih je pojem selektivnosti proteinurije. Leta 1955 so Hardwicke in Squire formuliramo pojem "selektivne" in "neselektivno" proteinurije, določanje, da je filtracija plazemskih proteinov v urinu ob določenem vzorcu: višja kot je molekulska masa proteina izloča v urin, manj potrditvi tal in nižja koncentracija v končni urin. Proteinurija ustreza tej vzorec selektiven, v nasprotju z neselektivno, ki je značilen za popačenj vzorce pridobljene.

Dokaz proteina v urinu z relativno visoko molekulsko maso kaže pomanjkanje selektivnosti ledvične filtra in izrazil poraz. V teh primerih govorimo o nizki selektivnosti proteinurijo. Zato trenutno razširjenih določitev proteinske frakcije urinu z uporabo tehnik elektroforeze škroba in poliakrilamidnem gelsko elektroforezo. Rezultate teh raziskovalnih metod je mogoče oceniti na selektivnosti proteinurije.

Po V.S.Mahlinoy (1975), najbolj upravičeno je ugotoviti selektivnost proteinurije s primerjavo razmiki 6-7 posamezne proteine krvni plazmi (albumin, traneferrina, &alfa₂ - makroglobulina, IgA, IgG, IgM) ob uporabi natančne in posebne količinske imunskih reakcijo radialno imunsko po Mancini in imunoelektroforezni preizkus pretsipitalnogo imunoelektroforezni. Stopnja selektivnosti opredeljujejo indeksom proteinurije selektivnosti, ki predstavlja razmerje med referenčno in primerjanih beljakovine (albumin).

Študij razdalje posameznih proteine plazme omogoča pridobitev zanesljive informacije o stanju filtracija kleti membran ledvičnih glomerulov. Povezava med naravo proteinov izloči v urinu in spremembe v glomerularni membran in se izrazi kot stalnica, ki uroproteinogramme lahko posredno soditi patofiziološke spremembe ledvic glomerulov. Običajno je povprečna velikost por glomerularne bazalne membrane je 2,9-4 ° NM A, lahko preskoči proteinov, ki imajo molekulsko maso do 10⁴ (Mioglobulin, kisla &alfa₁ - glikoprotein, imunoglobulinske lahke verige, Fc in Fab - fragmenti IgG, albumina in transferina).

Glomerulonefritis, nefrotski sindrom velikosti por narašča v glomerularni membrani in zato bazalna membrana postane prepustna za proteinskih molekul velikosti in mase (ceruloplazmina, haptoglobin, IgG, IgA in drugi.). V skrajnem ledvic glomerularne poškodbe v urinu pojavi ogromne molekule krvni plazmi beljakovine (&alfa₂-makroglobulina IgM in &beta₂-lipoproteinov).

Definiranje urina beljakovin spekter, lahko sklepamo, da je primarni lezije nekaterih delih nefron. Za glomerulonefritis, predvsem vplivajo glomerularni membrane značilna prisotnost v urinu srednjih in proteinov. Za pielonefritis, predvsem vplivajo na bazalno membrano cevkami značilnih krupnomolekulyarnyh odsotnosti in prisotnosti povečanih količin srednje in nizko beljakovin molekulsko maso.

&beta₂-mikroglobulin

Poleg znanih proteinov, kot so albumin, imunoglobulini, lipoproteinov. fibrinogen, transferin, urinu plazemske proteine mikroproteiny, vključno s kliničnimi kraji &beta₂-mikroglobulin odprt BERGGÅRD in Bearn leta 1968 z nizko molekulsko maso (relativna molekulska masa 1800), prosto prehaja skozi glomerulih ledvic in skoraj popolnoma reabsorbira v proksimalnih tubulih. To omogoča uporabo kvantitativne opredelitve &beta₂-mikroglobulin v krvi ali urina za določitev glomerularne filtracije in ledvični zmogljivosti resorpcijo za beljakovine v proksimalnem tubulih.

Koncentracijo proteina v plazmi in urinu je bila določena z radioimunsko uporabo standardnega niza "Phade-bas &beta₂-mikroiest »(družba" Pharmasia ", Švedska). Pri zdravih posameznikih serumu vsebuje povprečno 1,7 mg / l (razpon 0,6 do 3 mg / liter) v urinu - povprečno 81 mg / l (največ 250 mg / l) &beta₂-mikroglobulin. Presežek urin v svojem zgornjem 1000 ug / l - patološki fenomen. vsebina &beta₂-mikroglobulin v krvi zvišanje bolezni, povezanih z motnjami stopnjo glomerulne filtracije, zlasti pri akutnih in kroničnih glomerulonefritis, policistične bolezni ledvic, nefroskleroza, diabetična nefropatija, akutno ledvično odpovedjo.

koncentracija &beta₂-mikroglobulin v urinu se pri boleznih, povezanih z motnjami pri delovanju reabsorbtsionnoy tubule, kar vodi do povečanja njenega izločanja v urinu v 10-50 krat, zlasti v pielonefritisa, kronične odpovedi ledvic, gnojni zastrupitve et al povečala. Značilno je, cistitis nasprotju ne pielonefritisa Opaženo zvišanje koncentracije &beta₂-mikroglobulin v urinu, ki se lahko uporabljajo za diferencialno diagnozo te bolezni. Vendar pa je pri razlagi rezultatov študije je treba upoštevati, da je vsako povečanje temperature vedno spremlja povečanje izločanja &beta₂-mikroglobulin v urinu.

Povprečne krvi in urina molekule

Povprečna molekula (SM), drugače imenovani beljakovinske toksine so snovi z molekulsko maso 500-5000 daltonov. Njihova telesna struktura ni znana. Struktura SP je sestavljena iz vsaj 30 peptidov: oksitocin, vazopresin, angiotenzin, glukagon, adrenokortikotropni hormon (ACTH), itd prekomernega kopičenja SP opazimo z zmanjšanim delovanjem ledvic in vsebine v krvi velikega števila deformiranih proteinov in njihovih metabolitov .. Imajo raznoliko biološko aktivnost in nevrotoksičnost sekundarni imunosupresivno, sekundarni anemija, inhibira biosintezo eritropoeze beljakovin in inhibira aktivnost številnih encimov, ki motijo fazo vnetje.

Stopnja SM v testu krvi in presejalni urin je določena, in tudi s spektrofotometrijo v območju ultravijolične valovne dolžine 254 in 280 mm spektrofotometer CI-8B in dinamični spektrometrijo z računalniško obdelavo pri 220-335 nm valovnimi dolžinami v isti firme Beckman spektrometru . Med normalno prejemanje vsebin CM kri v višini 0,24 ± 0,02 USL. enote, in v urinu -. 0312 ± 0,09 konv. u
Kot običajno življenjsko organizma izdelka, se odstranijo iz običajnega ponoči z glomerularno filtracijo na 0,5% - 5% po drugi izkoriščena. Vse frakcije sm izpostavljeni tubulno reabsorpcijo.

Neplazmennye (tkivo) uroproteiny

Poleg proteinov krvne plazme lahko v urinu se neplazmennye (tkiv) proteine. Po Buxbaum in Franklin (1970), neplazmennye beljakovine predstavljajo približno 2/3 vseh urina in biocolloids uroproteinov pomemben del na patološko proteinurije. Tkivo beljakovine spadajo neposredno v urinu iz so ledvice ali organov anatomsko povezana z urinarnega trakta ali padec od drugih organov in tkiv v krvi, in od tod preko kleti membrane ledvice glomerulnimi - v urinu. V slednjem primeru je izločanje proteina pri odstranitvi urinu tkiva pojavi analogno plazemske proteine različnih molekulskih mas. Sestava neplazmennyh uroproteinov zelo raznolika. Med njimi glikoproteini, hormoni, antigeni, encimi (encimi).

Tkivo beljakovine v urinu z uporabo običajnih metod proteinske kemije (ultracentrifugiranjem gelsko kromatografijo, elektroforezo, različnih izvedbah), specifična odzivov hormonov in encimov in imunoloških metod. Slednji omogoča tudi določitev koncentracije neplazmennogo uroproteina je v urinu in v nekaterih primerih za identifikacijo tkiv struktur, ki so postali vir njegovega videza. Osnovna metoda za odkrivanje proteina v urinu neplazmennogo analiza imunsko z antiserumi dobljeno z imunizacijo poskusnih živali in ljudi urinu prepustna (adsorbirana), v enem od naslednjih proteine plazme.

Študija encimov v krvi in urinu

Ko je proces bolezen opazili v globino poškodbe vitalnih celic, s sproščanjem znotrajceličnih encimov skupaj v okolje fluida telesa. Enzimodiagnostika temelji na opredelitvi številnih encimov, izoliranih iz celic poškodovanih organov in ni značilne za serum.
Raziskovalne nefron ljudi in živali, ki so pokazale, da nekateri deli imajo visoko encimsko diferenciacijo, ki je tesno povezana s funkcijami, ki jih vsak oddelek izvedli. V glomerula ledvičnih Vsebuje relativno majhno število različnih encimov.

Ledvične tubule celice, zlasti proksimalno vsebuje največje število encimov. Njihova visoka aktivnost je opaziti v zanko HENLE, ravnih cevkami in zbiranje kanale. Spremembe v aktivnosti določenih encimov v različnih bolezni ledvic odvisna od postopka narava, resnost in lokalizacije. so opazili so pred morfoloških sprememb na ledvicah. Ker vsebnosti različnih encimov jasno lokaliziranih v nefron lahko definicija določenega encima v urinu prispevajo k topično diagnozo patološkega procesa v ledvicah (ledvicnih telescih, tubuli, skorje in medulla), diferencialno diagnozo ledvičnih bolezni in za določitev dinamike (dušenje in poslabšanje) postopek v ledvicah parenhima.

Dolžina razlika diagnosticiranje bolezni urogenitalnega sistema se uporablja za določitev aktivnosti v krvi in urinu naslednjih encimov: laktat dehidrogenaze (LDH), levcin-aminopeptidaze (LAP), kislinsko fosfatazo (AP), alkalna fosfataza (ALP), &beta -. glukuronidaza, glutaminska-oksaloacetat transaminaze (GSCHT), aldolaza transamidinase itd encimske aktivnosti v serumu in urinu določimo z biokemijskimi, spektrofotometrično, kromatografski, fluorimetrično in kemiluminiscenčnih metod.

Enzimuriya v ledvične bolezni je bolj izrazit in naravno, kot enzimemiya. To je še posebej močno izražena v akutni fazi bolezni (akutni pielonefritis, travma, tumorskega razpada, infarktov ledvic, itd). V teh bolezni odkritih transamidinase visoko aktivnost, LDH, alkalne fosfataze in KF, hialuronidazo, krog in nespecifičnih encimov, kot so GSCHT, katalaze [Polyantseva LR 1972].

Selektivna lokalizacija encimov v nefron ob odkrivanju trebušnega in alkalne fosfataze v urinu lahko z gotovostjo rečemo akutnih in kroničnih bolezni ledvic (akutna ledvična odpoved, ledvična tubularna nekroza, kronični glomerulonefritis) [Shemetov VD 1968]. Po A.A.Karelina in L.R.Polyantsevoy (1965) transamidinase vsebuje le dva organa - ledvic in trebušne slinavke. To je mitohondrijska encim in ledvic pri normalnem krvi in urina, manjka. V različnih bolezni ledvic transamidinase pojavi v krvi in urinu ter lezij trebušne slinavke - le v krvi.

Diferencialni preizkus pri diagnosticiranju glomerulonefritisa in pielonefritis Krotkiewski (1963) meni aktivnost alkalne fosfataze v urinu, povečanje kar je bolj tipično za pielonefritisa in diabetične glomeruloskleroze kot za akutne in kronične nefritis. Povečanje dinamike amilazemiya pa lahko zmanjšanje amylasuria kažejo nefroskleroza in ledvic brazgotinjenje, LAP ima največjo vrednost v patoloških sprememb glomerulov in zvitih cevk za ledvice, ker je njegova koncentracija v teh regijah nefron višje [Shepotinovsky VP et al., 1980]. Priporočena HD za diagnosticiranje lupus nefritis &beta - glukuronidaza in CF [Privalenko MN et al., 1974].

Pri ocenjevanju enzimurii vlogo pri diagnosticiranju bolezni ledvic je treba upoštevati naslednje določbe. Encimi, pri čemer inherentno beljakovine z majhno molekulsko maso lahko gre skozi intaktno glomerula, ki določa tako imenovano fiziološko enzimuriyu. Med temi encimi stalno določi v urinu &alfa - amilaze (relativna molekulska masa 45 Ltd.) in uropepsin (relativna molekulska masa 38.000).

Skupaj z encimi z nizko molekulsko maso v urinu zdravih posameznikih najdemo v majhnih koncentracijah in drugih encimov: laktat dehidrogenazo, aspartat in alanin aminotransferaze, alkalne fosfataze, in KF, maltaze, aldolaza, lipaze, proteaze in različne peptidaze, sulphatase, katalaza, ribonukleazo, peroksidaza [King, Boyce 1963].

Visoko molekulsko encime, ki imajo relativno molekulsko maso več kot 70000-100000, po Richterich (1958) in Hess (1962), lahko prodre v urinu samo v nasprotju z glomerularne prepustnost filtra. Običajno encim vsebnost v urinu ne izključuje patološkega procesa v ledvicah s sečnice okluziji. Ko epzimurii možno izhodne encimi ne samo iz ledvic samih, temveč tudi iz drugih parenhimskih organih, sluznicah celic sečnega trakta, prostate in urina oblikovani elementi z hematurija ali leukocyturia.

Večina encimov, ki niso posebej v odnosu do ledvice, zato od koder encimov najdemo zdrave in bolne v urinu, je težko določiti. Vendar se stopnja enzimurii celo dolžino nespecifičnih encimov, ko je bolezen ledvic višji od normalnega ali tiste, ki se pojavi pri bolezni drugih organov. Za več dragocene informacije lahko zagotovijo celovito študijo o dinamiki številnih encimov, zlasti organa specifične, kot so transaminaze.

Pri obravnavanju vprašanja ledvičnega izvora encima v urinu pomaga študij izoencimov pri ugotavljanju frakcij tipične obravnavanega organa. Izoencima - to encima z delovanjem izogenske (katalizirajo isto reakcijo), vendar heterogeni kemijske sestave in drugih lastnosti. Vsak material ima lastnosti za njeno izoencima spektra. Koristen izoencimov separacijske tehnike so elektroforezo škrobni in poliakrilamidnem gelu in ionsko izmenjalno kromatografijo.

Bence-Jones proteina

V diseminiranim plazmocitomom in makroglobulinemije Waldenstromovo v urinu zazna beljakovin Bence Jones. Postopek za detekcijo omenjenega proteina v urinu temelji na termopretsipitatsii reakciji. Prej uporabljene metode, s katerimi se raztapljanje proteina ocenjevali pri temperaturi 100 ° C in ponovnim obarjanjem in nato s hlajenjem, nezanesljivi, ker niso vsi proteinski telesa Bence Jones imajo ustrezne lastnosti.

Bolj zanesljivo detekcijo paraprotein z njenim obarjanjem pri temperaturi 40 -60 ° C Vendar je pri teh pogojih nanašanja ne more biti preveč kisla (pH < 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН > 6,5) моче, при низкой ОПМ и низкой концентрации белка Бенс-Джонса. Наиболее благоприятные условия для его осаждения обеспечивает методика, предложенная Patnem: 4 мл профильтрованной мочи смешивают с 1 мл 2 М ацетатного буфера рН 4,9 и согревают 15 мин на водяной бане при температуре 56 °С. При наличии белка Бенс-Джонса в течение первых 2 мин появляется выраженный осадок.

Ko se koncentracija proteina Bence Jones manj kot 3 g / l vzorca negativen, v praksi pa je zelo redka, saj njegova koncentracija v urinu je na splošno bolj pomembna. Na testu z vreliščem ni mogoče popolnoma zanesti. Z gotovostjo je mogoče odkriti v urinu metodi imuno-elektroforetsko pomočjo posebne serume proti težkih in lahkih imunoglobulinov verig.

NA Lopatkin

Zdieľať na sociálnych sieťach:

Príbuzný