Temeljna načela citogenetski prenatalno diagnostiko.

trenutno problem citogenetski diagnostika

Prednosti in slabosti citogenetski analizi pri uporabi različnih metod pridobivanja kromosomske pripravke iz fetalnih vzorcev materiala so prikazani v tabeli.

Uporaba v večini centrov kompleks citogenetski in molekularne citogenetski diagnostične metode, ki zagotavlja najbolj popolne informacije o kariotip ploda v različnih fazah razvoja ploda.

Video: Citogenetske študije. Biopsija horionskega resic o neodgovorjenih splava

Ko je pred rojstvom kariotip To je treba upoštevati načela analize kromosomov drog mednarodno sprejetih kliničnih citogenetske in Ministrstvo za zdravje odobrene, kakor tudi pravil mednarodnega carnotite nomenklature opisuje.

Značilnosti analizo citogenetični celic različne fetalni izvor plodovnici celice Celice AF predstavljajo več vrst različnega izvora:
- celice amnijske membrane (pravzaprav amniociti)
- plodu epitelne celice (povrhnjica, gastrointestinalnih, urogenitalnega in respiratornega trakta, ustna votlina sluznice).

Video: Parent Club (2015/11/25 - Part 1)

Kvalitativna in kvantitativna sestava AF celice, in koncentracija živih celic ima individualno raznolikost in so odvisne od stopnje razvoja. Optimalna za citogenetski raziskave je plodovnica epitelij - aktivno bolj razširjeni mobilni klon specifično za določeno kulturo. Medtem natančna identifikacija tipov celic, ki lahko mitotićnih oddelkov in klonoobrazovaniyu pod in vitro celični kulturi, zelo težkih.

Najpogosteje za gojenje Rabljeni amnionskih celice, pridobljene v obdobju 15-18 tednov nosečnosti. Uporaba za ta namen amniociti prej (12-14 tednov nosečnosti) ali kasneje (po 20 tednih nosečnosti) Izrazi, je načeloma mogoče, ampak kot pravilo, močno otežuje in podaljšuje diagnostični proces, povečuje število neuspelih poskusov.

Standardni kultiviranje celice AF vsebuje naslednje korake: določanje kulturo, subkulturo, hipotonično obdelavo in fiksiranje. Kljub široki uporabi celičnih kultur AF na svetu, že običajna praksa za pripravke kromosomskih ne obstajajo. Za gojenje celic AF uporabite dva glavna pristopa različne metode za izdelavo kolonije in metod fiksiranja.

Video: nova generacija zaporedja: načela, možnosti in pričakovanja - Maria Logacheva

1. Bučko-metoda-celične kulture Bolniki v vzmetenja in fiksacija enoplastni kulturi po tripsinizacija. Test izvedemo pri dveh od treh kultur (10 metafaz na vzorec). Če so vsi metafazne plošče opazili enako kariotip, je diagnoza ugotovljena. V primeru enega samega metafazo z odklonskim kariotip (strukturne ali numerične) smo analizirali rezervno tretjo kulture. Če je ena in ista kromosomskih aberacij določi več metafazo iz ene steklenice, ne temveč potrjen v drugih steklenic, z diagnozo "psevdomozaitsizm". V primeru ene in iste kromosomskih nepravilnosti v več kot eno steklenico, je diagnoza nastavljena "pravi Mozaicizem".

2. Postopek in situ - gojenje in fiksacija celic na krovnih v petrijevke ali posebne steklenice - diapozitive. Analizo smo izvedli na metafaznih plošče treh posodah za kulture (skupaj 10 kolonij analizirali). Ko detektiranje abnormalna klon analizirani vsekultury. Kromosomske aberacije opazili le eno skodelico, kaže "psevdomozaitsizme", več kot ena - "pravih mozaigshzme".

standardni postopek kultiviranje amniociti od prejema vzorcu desno navzgor kariotip v povprečju traja 14-21 dni. Slabosti so visoki stroški gojilne juhe in opreme, ki je pomembna za domače laboratorijev ter visoko (do 2%), verjetnost onesnaženja vzorca materinih celic.

V zadnjih letih se je razvil nov pristop k Analiza kromosom od gojenih celic. «Pipett» Metoda temelji na izolacijo mikromanipulyatsionnoy metafaznyhiprometafaznyhkletokiz nesuspenzionnyh rastline zaradi ihmorfologicheskim funkcije in slabitev zaradi podlage. Dodatne hipotonična zdravljenje in fiksacija se izvajajo na posameznih celicah. Ta metoda zmanjšuje obdobje kulture za neskolkihdney in, najbolj pomembno, zmanjša tveganje za diagnostiko napak, ki sta jih Mozaicizem povzroča, in onesnaženje vzorca. prometaphase Priprava in metafazne plošče na ta način lahko katerega koli primarnega in transplantiranih pridelkov. Na žalost, drage opreme in delovne sile preprečujejo široko sprejetje te progresivne metode v klinični praksi.