Toksoplazminom imunomodulacija pri zdravljenju kronične toksoplazmoze

Toksoplazmoza - praživali zoonoza z latentno preimuschestvennohronicheskim nad teče z znaki porazheniyanervnoy sistemom, organih retikuloendotelijskega sistema, navzkrižno polosatoymuskulatury in organ vida.

Patogenov - Toxoplasma gondii - izvajalce vnutrikletochnyyparazit s kompleksnim življenjskega cikla v kateri sta moški in bolee300 vrste živali in ptic vmesni gostitelji.

Nujnost študija toksoplazmoza narekuje, predvsem veže ta patologije z imunsko pomanjkljivostjo (singularnostmi okužb z virusom HIV). Poleg tega opisuje vodne in užitno vspyshkizabolevaniya [7]. Glede na visoko stopnjo okužbe v populaciji (od 20 do 90% v različnih regijah po svetu) in polietiologichnostimmunodefitsitov (ki vključuje dolgotrajno glukokortikoid, citostatiki terapije ionizirajočega sevanja it.d.), je treba preučiti vzroke reaktivacijo latentnoprotekayuschego procesa.

Dokazano je, da se pretok znak določi toksoplazmoza sostoyaniemimmunnoy mikroorganizmov sistem [2]. Akutna toksoplazmoza (OT) razvije kot posledica primarne okužbe toksoplazmamineimmunnogo mikroorganizma [4]. Razvija pri sobni temperaturi reakcije kompleksprisposobitelnyh makro- in mikro-organizem zakanchivaetsyaformirovaniem nesterilnega imunost.

Dolgotrajna obstojnost sredstvom spremlja "plavajoči" koncentracij specifičnih protiteles, proizvedenih s klonom spominskih limfocitov antigen spetsificheskihV [1]. Ta faza bolezni nazyvaetsyahronicheskim toksoplazmoze (HT) in je naravni proces iskhodomostrogo.

Zadostno količino pomnilnika T- in klinične manifestacije celic obuslovlivaetotsutstvie bolezen B (latentno techenieHT). Vendar je v nekaterih primerih (1-5% okuženih) proiskhoditreaktivatsiya latentno infekcijo [3]. Ta kategorija vključuje "imunsko kompromitiranih" osebe, vključno s sekundarno imunske pomanjkljivosti (okužbo s HIV in iatrogeno - nenadzorovano antibiotik, citostatiki, glukokortikoidne terapije, itd).

Znano je, da je glavna vloga pri preprečevanju aktivacije latentnogoHT pripada celičnih komponent imunskega sistema. Vodilni preprečevanje zvenomv reaktivacije sinteze je pomembnejša kolichestvainterferona-gama (IFN-g) T limfociti preobčutljive Toxoplasma antigeni [5].

Od leta 1958, klinika za infekcijske bolezni RossiyskoyVoenno Medical Academy izvaja raziskave razlichnyhaspektov HT. vgrajeni AP Kazantsev (1961) Postopek spetsificheskoydesensibilizatsii toksoplazminom dosega rezistentnih remissiiu 90% bolnikov po enkratnem tečaja. Vendar pa je le posledniegody, priložnost za študij imunski sistemybolnyh kemoterapijo z ustreznimi imunoloških metod.

Namen študije

Znanstvena mehanizem utemeljitev toksoplazminom delovanja na ocenjevanju osnovaniikompleksnoy kliničnih laboratorijskih in immunologicheskogomonitoringa bolnikih s kronično toksoplazmozo.

Materiali in metode

V raziskavi je sodelovalo 70 bolnikov s kliničnimi manifestacijami obostreniyaHT (reaktivacijo latentne HT). Diagnozo naosnovanii prisotnost klinične obdobju zagonov isklyucheniyadrugih sindromoskhodnyh bolezni infitsirovannnostitoksoplazmami zaznavanje (prisotnost specifičnega Ig G k Toxoplasma, analiza vyyavlennyhimmunofermentnym) zamedlennogotipa izgovarja preobčutljivost antigenov od Toxoplasma Rezultati intradermalni probys toksoplazminom razredčimo 10-krat s 0,85% natrijevega hloridanatriya. [Toksoplazminom predstavlja kompleksen antigenov celične membrane naruzhnoypoverhnosti T. gondii (Sev RH) belkovoyprirody (t. N. SAG), pridobljen z vodo in etrom ekstrakcijo (Odessa obrata za proizvodnjo bakterijskih pripravkov).]

Vsi bolniki izmerjena količina CD-4 +, CD-8 + B-IgG + (monoklonalnymiantitelami z L.A.Kozhemyakinu s sod., 1987), Ig G, da Toxoplasma (test ELISA-sistemu "La Roche"), številka RTML z toksoplazmennymantigenom (George et Vaughan, 1962 Bulankovas modifikacija YI in sod, 1993.), "aktivna" interferona (v nadaljevanju - IFN-o), "aktivna" interferon gama (v nadaljnjem - IFN-g-o) in "aktivna" interferona-alfa (IFN nadaljnjem-ACP) biološka metoda. Takzheopredelyali skupna koncentracija IFNg(V nadaljevanju - IFNg-Družba) in interlevkin-4 (v nadaljevanju - IL-4) z ELISA ob uporabi običajnih komercialnih analizas preskusne Systems Ltd "beljakovina konturo" (Sankt Peterburg) in "citokin" (Sankt Peterburg). Chuvstvitelnostmetoda je 10 pg / ml. Poleg tega so bile (kontrolna skupina) preučila 10 bolnikov brez kliničnih znakov toksoplazmozav zgodovini (latentni obliki HT).

Vsi bolniki so razdeljeni v skupine po effektivnostyuterapii. Skupina 1 - 58 bolniki s prehodom latentnuyufazu bolezni (ciklični obrazci za simptomatsko kronično toksoplazmoze), skupina 2 - 12 bolnikih s ponavljajočimi zagonov HT za blizhayshegogoda po zdravljenju (za ponavljajočo oblik simptomatsko hronicheskogotoksoplazmoza). Kontrolna skupina - 10 klinično zdrave litss prisotnost Ig G na Toxoplasma (za primarno latentne bolezni) .Gruppy primerljiva v spolu, starosti, harakterupitaniya, socialni status, premorbid ozadje.

Preizkus pacientov je bila izvedena v dinamike akutno, neposredno po imunomodulacijo toksoplazminom (intradermalno na razredčevanjem z naraščajočo obscheydoze koncentracijo 0,3 ml nativne zdravila) in 4 tedne po okonchaniyakursa zdravljenja. V nobenem primeru ni bilo opaziti strani reaktsiyna toksoplazminom upravo. Podrobnosti o načinih uporabe zdravljenje s kemoterapijo toksoplazminav opisan v [1]. Znaki imunske celice, je koncentracija aktivne interferona raziskali tudi v 3-6 zdravljenje mesyatsevposle.

Statistična analiza rezultatov uporabite program "Statgraphics pro Win, ver. 3.0 "z uporabo enega ali mnogovariantnogoanaliza, analiza podskupin (podmnožice analiza), primerjavo obeh vzorcev (parametrične in neparametrični) in faktorja poshagovyyanaliz (p <0,05, F do vstopijo = 4).

Rezultati raziskav

Ugotovljeno je bilo, da je v obdobju poslabšanja (Tabela 1) pri bolnikih s pomembnimi spremembami HTnablyudayutsya immunologicheskihpokazateley preučevali (tabeli X - povprečna velikost, D - standartnoeotklonenie).

Tabela 1. Nekateri kazalniki imunskega stanja na bolnyhhronicheskim toksoplazmozo med akutno boleznijo

* - p<0,05, ** - p<0,01 (сравнение с контрольной группой).

Tako je kljub pomanjkanju zanesljivih bolnikov statistično razlichiyu s cikličnim potekom bolezni v primerjavi s ponavljajočim se sprva opazili izrazito višjo vsebnost CD-8 + neskolkobolshee števila limfocitov B, ki proizvajajo Ig G (v nadaljevanju - B-IgG +). povečali so tudi koncentracijo posebnega Ig G (v nadaljnjem Ig G Tox), IFN-o, IFN-ACTI IL-4. opozarja tudi na odsotnost FNg-dejanje, nižja koncentracija IFNg-Društvo ipokazatelya RTML.

V primerjavi z kazalnikov imunskega stanja z formeHT latentno obdobju poslabšanja (vklopa) med ciklično harakterizuetsyastatisticheski znatno povečanje količine CD-8 + FN--o (p<0,05), снижением количества B-Ig G+ (p<0,05), общегоIFN-g (p<0,01) и Ig G tox (p>0,05), а также ростоминдекса РТМЛ (на 15 %). У пациентов данной группы не обнаруживалсяв сыворотке крови активный IFN-g (как и при латентном токсоплазмозе).

Imunski sistem pri akutnih bolnikih sretsidiviruyuschim kemoterapijo je označen z manj številom vyrazhennymuvelicheniem CD-8 + (p<0,05) и активного IFN-акт (p>0,05),более заметным снижением количества B-Ig G+, Ig G tox, IFN--o (p<0,05), наличием в сыворотке IFN-g-dejanje, močno zmanjšanje IL-4 in RTML rasti 28%.

Tabela 2. Nekateri kazalniki imunskega stanja na bolnyhhronicheskim toksoplazmozo po toksoplazminom zdravljenja

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Tabela 3. Nekateri kazalniki imunskega statusa toksoplazmozo bolnyhhronicheskim 1 mesec po zdravljenju.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ).

Tabela 4. Nekateri kazalniki imunskega stanja na bolnyhhronicheskim toksoplazmoza 3-6 mesecev po zdravljenju.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Analiza podatkov v tabelah 2-4 je razvidno, da je skupaj s skupnimi skupinah bolnikov dlyaobeih HT spremeni imunski sistem nablyudalissuschestvennye preučevali razlike v dinamičnih kazalnikov narastayuschievo časa.

Takoj po imunomodulacijo v vseh patsientovnablyudali rasti IFNg-dejanje, IL-4 (boleevyrazhenny pod cikličnim potekom bolezni), zmanjšanje CD-4 + 8 + -iCD. Če pa ciklično potek CD-4 bolezni + snizhalisna 5%, in CD-8 + - 11%, ko ponavljanjem zaregistrirovanaobratnaya trend: CD-4 + se zmanjša za 25%, in CD-8 + - 10% .Ti spremembe je spremljal večsmerno dinamike IFN-g-Society: je njena koncentracija v HT poveča za 85% pritsiklicheskom in pri bolnikih zmanjšala za 38% z retsidiviruyuscheyformoy boleznijo.

V enem mesecu so bolniki študiral skupina dinamika pokazateleyIS pridobijo večjo razliko. V cikličnega bolezniprodolzhalsya toka jasno (40-120%) povečanja koncentracije IFN-g-IFN in delujejog-Družba, vozrastalokolichestvo CD-4 + na vrednost, ki presega obdobje poslabšanja, nablyudalosdalneyshee zmanjšanje števila CD-8 +, je pokazala zmanjšanje IL-4. V istem času, pri bolnikih z recidivno rast kemoterapijo CD-4 + spremlja izrazito povečanje CD-8 + (30%). Neznachitelnyyrost koncentracijo IFN-g seštevka (1%) teh bolnikov je bilo povezano z uvelicheniemkontsentratsii "aktivnih" oblike IFN (njihova vrednost poveča za 10%).

Bolniki v obeh skupinah so opazili enosmerno dinamikakontsentratsy B-Ig G + in Ig G Tox (zmanjšanje števila limfocitov, produtsiruyuschihIg G in koncentracije specifičnih imunoglobulinov).

Posebej opazne so rezultati kompleksa (klinične in imunološke) pregledu pacientov v 3-6 mesecev po zdravljenju.

Raziskava Rezultati bolnikom očitne oblike HT cherez6 mesecih po poteku zdravljenja kažejo, da

1. Med kolesarjenjem potek bolezni (enkratni tečaj terapiiprivodit stabilno remisijo bolezni - prehoda bolezen vhronicheskuyu latentni obliki), je skoraj popolna klinicheskayaremissiya - izginejo pritožbe manifestacije poraz retikuloendotelialnoysistemy organi vrniti socialno prilagoditev bolnikov.
2. Dinamika klinične manifestacije kemoterapije neposredno povezana z rostomCD-4 +, FNg-dejanje (pozitivno) in vyrazhennymsnizheniem indeks RTML z toksoplazminom (negativno). RostuCD-4 + ustreza sorazmerno povečanje količin CD-8 +, poveča koncentracijo Ig G Tox. Večina študiral immunologicheskihpokazateley ne razlikuje od tistih v latentni obliki kemoterapije.
3. Ponavljanjem očitne oblike HT v teh pogojih obsledovaniyaharakterizuetsya zadrževanje disadaptative reakcije (zmanjšana delovna prostornina, izražena čustvena labilnost, obstajajo objektivni priznakiotsutstviya remisije), močno povečanje števila CD-8 + povtornymuvelicheniem indeks RTML antigeni Toxoplasma, snizheniemkontsentratsii Ig G TOX, nizke koncentracije aktivne interferona .

razprava

Študije so pokazale, da se imunski procesi, ki prispevajo k klinične manifestacije reaktivacija kemoterapijo razlik harakterizuyutsyaopredelennymi pri bolnikih z vztrajno polozhitelnymeffektom imunski in bolnikih z recidivno-oblike na dannoyklinicheskoy bolezni.

V povezavi s podatki, ki so na voljo na dan, literature, rezultati njihovih lastnih raziskav nam omogočajo, da ponudijo obyasnenienekotoryh manifestacije okužbe pridobili toksoplazmozo.

Znano je, da je glavna sestavina latentnogotoksoplazmoza preprečijo ponovno aktivacijo sinteza visoke ravni IFN-g, ki preprečuje razgradnjo cist. Ta yavlenieizucheno poskusi [6]. Izkazalo se je tudi, da ko latentnomtoksoplazmoze posebna CD-4 + izločajo tako FNg,in IL-4, kar je značilno za Th0 celic [9].

V nekaterih študijah je bilo eksperimentalno dokazano, da infitsirovaniemakrofagov Toxoplasma vodi do zmanjšanja ekspresije MHC-II molekulklassa in IFN-g-odvisnega predstavitev MHC-I, mozhetyavlyatsya da je eden od faktorjev, ki določajo obstojnosti vozbuditelya.Takzhe kaže, da reaktivacije latentne infekcije pri eksperimentevazhnaya vloga za predvajanje CD-8 +, ki se raztaplja infitsirovannuyukletku, vendar pa sami ne uniči Toxoplasma [4,8].

HT ostrenje mehanizem se lahko predstavi na naslednji obrazom.Na razvoju ozadje imunosupresijo znižano koncentracijo IFNg(Kot posledica neposrednih zaviralnim učinkom ali sinteze rezultateistoscheniya). Zmanjšana IFN-g povzroči spetsificheskihTh0 preoblikovanjem v Th2, ki vodi na vrh citolizo celic infitsirovannyhtoksoplazmami (psevdociste). Dohodnega ekstracelularno prostranstvoparazity delno lizirali specifičnih protiteles v prisutstviekomplementa. Del patogenov izpostavljeni fagocitozo, nosyaschemunezavershenny značaja. Znotraj tvori patogena sobstvennuyuobolochku celic, zavira delovanje antigen predstavitev in s tem ustvarja pogoje za njeno ohranitev, saj se je tudi v celicah sluchaelizisa je še vedno živ. Ta proces je podprt zaschet kronično pomanjkanje IFNg. Možni reverzibilnost pogoji imunske pomanjkljivosti spontane remisije, če koncentracija FNg Povečanje bo iimmunny odziv izvajajo Th1-type. V primeru uglubleniyaimmunodefitsita je (AIDS) Th1 nadzor popolnoma izgubila, zaščita funktsiyunespetsificheskoy prevzemajo nevtrofilcev in odziv aktiviruetsyaTh2. Kot rezultat, razvoj poliklonsko aktivacijo hyperproduction nespecifičnih protiteles B-limfotsitovs, ki vodi k razvoju generalizatsiiinfektsii parazitskih sepso (meningoencefalitisa, abscesov, pljučnica, hepatitis, miokarditis, itd).

V večini primerov (90%) toksoplazminom služi kot spetsificheskogoimmunomodulyatora, katerega mehanizem delovanja je verjetno svyazans aktivacija proizvajajo IFN-g posebno CD-4 +. V tem mehanizmasvidetelstvuyut spodbuja rast CD-4 + in koncentracijah IFNg,in odsotnost pomembnih dinamike humoralnega zvenaimmuniteta. Antigen je intradermalno dajanje verjetno sorbiruetsyana antigen predstavljajoče celice kože, obdelanih in predstavlyaetsyaya-celice pomagalke, ki se odzivajo na it generacije IFN-g dopolnitelnogokolichestva. Po drugi strani pa, IFNgstimulirane Th0 preoblikovanje v Th1. Tako prekraschaetsyatsitoliz okuženih celic z psevdociste že oblikovane, in v odsotnosti le-ti nameščeni intracelularno toksoplazmyunichtozhayutsya aktivirana IFNg makrofagov.

Približno 10% primerov ne pride v uvodu toksoplazminom krazvitiyu stabilne remisije. Relativno visoka začetna urovniIFN-g (Vključno z aktivnimi IFN-g), lahko odraz dejstva, da ti pacienti otsutstvuettochka njene aplikacije (ne izraža receptor). Snizheniekolichestva CD-4 + in IFNg dopolnitelnoyantigennoy na bremenu ozadju, poznejša rast CD-8 + hronicheskihvirusnyh tipični za okužbo (npr kronični virusni hepatitis). Vendar pa v tem primeru je nepopolna značaj Citolizo in mikrobitsidnayaaktivnost makrofagov, verjetno ne poveča.

Sposobnost imunskih celic za sintezo IFN-g pod vplivom specifičnih antigenov stimulyatsiiopredelyaet in napovedujejo nadaljnji potek kemoterapije. Izkazalo se je, da uvseh brez izjeme, bolnike s cikličnim potekom bolezni, 4 tedne po zdravljenju, na ravni celotne toksoplazminom FNgpreseglo izvirnik, medtem ko je v ponavljajočih se HTV v tem času koncentracijo celotnega FNgzmanjšala 80% bolnikov.

Očitno je, da ima interferon pomembno vlogo v procesu reaktivatsiilatentnogo toksoplazmozo je. Mehanizem recidivov kemoterapije, verjetno težje, kot je razvidno iz korelacije dinamike kliničnih kazalcev proyavleniys RTML z toksoplazemskih antigeni. RTML yavlyaetsyaintegrativnym indeks odraža immunokompetentnyhkletok interakcijo s citokini, ki jih jim ob mnogoobraznymiodno- in večsmerno biološke učinke. Jasno bolniki polozhitelnayadinamika s stabilno boleznijo v prehod remissiyui ponovnem pojavu akutnih simptomov v drugih kategoriipatsientov časovno sovpadajo s očitne razlike pokazatelyaRTML. Po 3-6 mesecev po zdravljenju je sensibilizatsiisnizhaetsya v prvo skupino in povečanjem v drugem.

ugotovitve

1. V patogenezo akutnega poslabšanja kroničnega toksoplazmoza chelovekaodnim od vodilnih dejavnikov je zmanjšanje ravni IFN-g in s tem povezano aktivacijo Th2 odziva.
2. V 90% dodatni antigen obremenitve z vnutrikozhnomvvedenii toksoplazminom vodi do stimulacije IFNg,Mikrobicidni aktiviranje mehanizmov makrofagov prenehanje tsitotoksicheskiheffektov, obnoviti toleranca in preoblikovanje zabolevaniyav latentni obliki hrbet vklopom Th1 odziva.
3. Bistveno manjša (10%) specifičnih antigenov nagruzkane povzroča vklopom Th1 odziva, ki je lahko svyazanos genetskih defektov, kot IFN-g proizvodnjo in mehanizmov za njegovo izvajanje biologicheskiheffektov.
4. Toksoplazminom (Toxoplasma antigen kompleks) je spetsificheskimimmunomodulyatorom, glavni mehanizem delovanja je stimulacija sinteze svyazanso IFN-g proliferacijo antigensko specifične prvega tipa T-helperov1.

Reference

1. Lobzin JV, Bulankov Yu Kazantsev AP, Vasiliev V.V.Hronichesky toksoplazmoza: racionalna terapija. / Rossiyskiemeditsinskie svinca. Znanstvena revija za klinitsistov.- 1997. - N 2.- t 2 -. Z. 67-69
2. Beazley D.M., Egerman R., S. Toksoplazmoza // Semin. Perinatol.-1998. -Vol. 22, № 4.-P. 332-8.
3. Bossi P., Caumes E., Astagneau P., Li T. S., Pariz L., MengualX., Katlama C., Bricaire F. caractéristiques epidemiologiquesdes toxoplasmoses cerebrales chez 399 bolnikov infectes Parle VIH suivis entre 1983 et 1994 / Rev. Med. Interne.-1998 maj--Vol.19, №5. -P. 313-7
4. Darrel O., Ho-jen, Alex W.L. Joss. Human toksoplazmoza. -New-York: University Press, 1992. - 432 str.
5. Denkers E.Y., Gazzinelli retenzijski Ureditev in delovanje T-celic-mediatedimmunity med okužbo s Toxoplasma gondii / Clin. Microbiol.Rev. -1998. -Vol. 11, №4. -P. 569-88
6. Hunter C.A., Subauste C.S., Remington J.S. Vloga cytokinesin toksoplazmozo / Bioterapija. -1994., -Vol.7, №№3-4. -P. 237-47
7. Isaac-Renton J., Bowie W.R., Kralj A., Irwin G.S., Ong C.S., Fung č.p., Shokeir M.O., Dubey J.P. Odkrivanje Toxoplasma gondii oocist v pitno vodo / Appl.Environ. Microbiol. -1998. -Vol.64, №6. -P. 2278-80
8. Luder C.G., Lang T., Beuerle B., bruto U. padajoče-regulationof MHC razreda molekule II in nezmožnost za povečanje aktivnosti klasi molekule mišje makrofagov po okužbi s Toxoplasma gondii / Clin. Exp. Immunol. -1998., Vol. 112, №2. -P. 308-16
9. Prigione I., Facchetti P., Ghiotto F., Tasso P., Pistoia V.Toxoplasma gondii-specifične celične klone CD4 + T iz zdravih, latentno okuženih ljudeh prikaže Th0 profil sekrecije citokinov / Eur. J.Immunol. -1995. -Vol. 25, №5. -P. 1298-305