Vsebnost kisline Oftalmologija-glutaminska v vlažno komoro, pri bolnikih s primarnim odprtega zakotja

Mnogi avtorji glutamat postane neurotoxiceffect na mrežnici celice ganglijev. Možno je, da ima glutamicacid povečanje koncentracije v očesnih tkivih s primarno odprto angleglaucoma (POAG) pomembno vlogo pri vidnega živca glaucomaatrophy patogenezo.

Vodna humor 10 bolnikov z POAG so bili sprejeti med cataractextraction in pregledati. Količine glutaminsko kislino weredetermined s kromatografsko metodo.

koncentracija glutaminske kisline v vodnih telesnih nadzora groupwas 28,6 ± 1,6 MKG / ml in v skupini s POAG - 84,9 ± 28,7 MKG / ml.The razlika ni bila statistično zanesljiva. Tako obstaja atendency za glutaminsko kislino povečanje koncentracije v oči withPOAG.

PPerforman raziskave poslednihlet pomembno vplivajo na predstavitev patogenezo optičnega živca glaukomatoznoyatrofii - glavkomu optične nevropatije.

Ugotovljeno je bilo, da je značilna manifestacija nevropatija glaukomatoznoyopticheskoy apoptoze - smrt debla kletoksetchatki. Quigley [6] meni, da poškodovano vsledstvievysokogo IOP aksona s mrežnice ganglijskih celic ni mogoče ugotoviti dostatochnoyinformatsii, ki vodi do aktivacije mehanizma naravne gibelikletki. Morda so ti procesi aktivira nedostatochnostyukrovotoka žil v očesu pri zvišani IOP. Izkazalo se je, chtoodnovremenno s tem obstaja znatno povečanje soderzhaniyaglutaminovoy kisline (glutamat) v steklovino bolnikov pervichnoyotkrytougolnoy glavkom (POAG). Glutamat je glavni neyromediatoromTsNS in očesne mrežnice. Hkrati povečuje glutamatavyshe fiziološke koncentracije pri mrežnici povzroča blokada mezhneyronalnoyperedachi živčne impulze in združimo s selektivnimi apoptozomganglioznyh mrežnice celic zaradi nevrotoksičnih učinkov glutamata [5]. Brooks D.E. s sod. [7] najdemo v pasjih očeh z glavkom eksperimentalnovyzvannoy povečana vsebnost vitreal glutamata, triptofan in nizko vsebnostjo glicina v primerjavi z kontrolem.Po po mnenju avtorjev visoka koncentracija glutamata toksičen dlyagangliev mrežnice ishemična mehanizem izkaže motnje, ki se pojavljajo v celicah mrežnice.

Sama ideja o nevrotoksićnim učinek glutamata na nervnuyutkan, zlasti mrežnice celice ganglijev, zaimstvovanaiz nevrološke prakso. Nevrologi 20 let znacheniebolshim dajejo koncentracije oddajnika v razvoj takšnih bolezni, kot so Alzheimerjeva bolezen, multipla skleroza, demenca, amiotroficheskiybokovoy skleroza in druge [4]. Povečane ravni glutamatav steklovino bolnikih z glavkomom smrt debla kletoksetchatki pod njegovim vplivom v poskusih na podganah dovoljeno E.B.Dreyer sod. [6] kaže, da je mehanizem njihovega mesta in gibeliimeet POAG. Vendar pa je vzrok za znotrajceličnih ne vypuskaglutamata povsem jasno. E.B. Dreyer sod. [6] menijo, da morda visok očesni tlak povzroča vyhoduglutamata v znotrajcelični prostor, induciranje celične smrti, ki je toksičen za celice ganglijev. Drugi verjetne prichinoygibeli celice, po mnenju avtorjev, je neuspeh encimskih sistemov, ki so odgovorni za uničenje živčnih iz sinapse po vyhodaego. Težava potrditve te poglede zaklyuchaetsyav, da je zelo težko, da preveri dejstva, na "živo" oko, vendar ni dvoma, da velika koncentracija gutamata toksichnydlya živčnega tkiva.

Glede na zgoraj navedeno, je bil namen naše raziskave obnaruzhenieglutamata pri bolnikih z POAG.

Materiali in metode

Eksperimentalna skupina je bila sestavljena iz 10 bolnikov z POAG (6 moških, 4 ženske, povprečna starost - 74 let), ki zabiralaskamernaya vlage v ekstrakapsularne ekstrakcijo kataraktys antiglaukomatoznyh komponento. 8 bolnikov je razvilo stadieyPOUG 2 z bolj napredno. Kontrolno skupino bolnyeso senilne katarakta - 14 bolnikov (11 moških, 3 ženske, povprečna starost - 68 let). Glavne in kontrolne skupine bylisopostavimy starost in sorodne telesne bolezni.

Osnova metode, ki jo Bode opisano in čaka metode punca kolichestvennogoopredeleniya aminokislinski derivati ​​v obliki bakrovega z ningidridinomposle njihovo kromatografskega ločevanja na papirju s to spremembo [1].

1. Priprava vzorcev za analizo. Obseg vzorcev kamernoyzhidkosti od 0,1-0,2 ml smo stehtali na analitski tehtnici in uparimo do suhega na vodni kopeli pri 40 ° C v stekleni mikroplošče z uporabo plavajočega stojalo. Suhi ostanek raztopimo v 0,05 mldistillirovannoy vodo.

2. Pridobivanje dimenzijskim kromatograma zhidkostiglaza komoro. 20 l dobljene raztopine v predelih 5 L s pomočjo avtomatske pipete nanesemo na kromatografsko bumagumarki "hitro" velikosti 2 x 27 cm. Postopek kromatografijo provodyatniskhodyaschim dvakrat, najprej v eni smeri smesirastvoriteley J, nato dvakrat zmes II. Zmes I: n-butilovyyspirt, ledocet, destilirano vodo (4: 1: 5). Zmes II: n-butil alkohola, ledoctu, distillirovannayavoda (40: 15: 5). Po vsakem prenosu bumaguvysushivayut topila v zraku, nato pa postavi v kromatografsko topila kameru.Vremya prehod v eno smer 7 ur. Vysushennuyuhromatogrammu potopljen nekaj sekund v 0,5% raztopini ningidrinav acetonom, osušimo ter tako postala bolj jasna po dneh poetomuopredelenie kvantifikacijo aminokislin v nekaj minutah v zraku pri 50 ° C za razvoj amino okraski.Pyatna ipodogrevayut 10 minut v peči, da se poleg provoditna dan.

3. Kvantitativno določanje glutaminske kisline v kamernoyzhidkosti očesu. Škrlatne pege ustrezajo glutaminovoykislote izrezali, jih narežemo na majhne koščke in damo v mikrocevke ki vsebuje 0,25 ml alkoholno raztopino bakrovega sulfata. Fioletovayaokraska postane oranžno-rdeče obrazovaniyamednogo dobljene amino derivat s ninhidrin. Črpanje Prodolzhayutv eno uro pri sobni temperaturi. Intensivnostokraski izmerjena na photoelectrocolorimeter Humalyzer 2000 pridline valovni dolžini 505 nm pri microcuvettes nabumagu proti kontrolnim vzorcem. Izračuni temeljijo na vsebnosti aminokislin poteka kalibrovochnomugrafiku dobljeno iz standardnih raztopin glutaminsko kislino.

4. Gradnja kalibracijske krivulje. Gotovyatrastvory glutaminske kisline 0,001 M, 0,00075 M, 0,0005 M, 0,000375M, 0,00025 M. V članku nanese 20 ul raztopine. Proizvodyatpo Izračun formule:

K = (Ci x 5 x 10^-2) / V

A - koncentracija glutaminske kisline v komori vlage (ug / ml) -C - Vsebina je glutaminska kislina na voljo na kalibrovochnomugrafiku (ug / ml) - V - volumen vzorca (ml).

Rezultati in razprava

Vsebnost Glutamat vlage v komori kontrolnoygruppe je bil 28,6 ± 1,6 ug / ml, pri POAG - 84,9 ± 28,7 mikrogramov / ml (razlika ni statistično pomembna, str>0,05).

Čeprav se mi ne dobimo in statistično pomembne razlike vsoderzhanii glutamatnih POAG bolnikov in starost katarakta odnakoimeetsya jasen trend v smeri večje koncentracije vlage neyromediatorav bolnikov komora POAG. V 5 od 10 bolnikov z POAG soderzhanieglutamata je v komori vlage bistveno višje kot v kontrolnoygruppe in so se gibala od 37,6 pg / ml do 260.3 mikrogramov / ml.

Pri bolnikih z senilne katarakte glutaminovoykisloty maksimalna koncentracija je samo 33 mg / ml.

Sodelovanje določenih nevrotransmiterjev v uredbe oftalmotonusapokazano v A. delavcev Myagkova [2,3], ki se je izkazalo vliyanieopioidnyh peptide za povečanje očesnega tlaka, ki deluje elektricheskimikolebaniyami in kemičnih dražljajev na amygdaloid kompleks.V podatkov dobljeni rezultat ne more strinjati z gipotezoyusileniya apoptozo mrežnice ganglijskih celic v POAG vsledstvienakopleniya njej glutaminsko kislino. Vendar pa ta gipotezatrebuet nadaljnje študije.

Študije so pokazale, prvič v vlago zbornice glutaminovuyukislotu pri bolnikih z POAG. Vsebina glutamatau bolnikov POAG kot v kontrolni skupini.

1. Medicinski laboratorijsko tehnologijo in diagnostika: Meditsinskielaboratornye tehnologija. Sklicevanje na 2 obsega / Ed. A.M.Karpischenko // določitev micromethod prostih aminokislin v syvorotkekrovi uporabi papirno kromatografijo. V.2. - St Petersburg, "Intermedika", 1999. - S. 106-109

2. Mehka AV Vpliv preluknjati očesne učinke z električno in kemično stimulacije mindalevidnogokompleksa povzročajo: Avoref. DISS. na soisk. znanstveniki. korak. cand. med. nauk.- Kazan, 1997-1921.

3. Mehka AV Sodelovanje opioidnih peptidov v centralnem tlaka regulyatsiivnutriglaznogo in hidrodinamičnih oči // Proc. Dokladov7sezda ophthalmologists Rusija. - M., 2000.- S.175-176.

4. Plyahin IV Biokemijski podaljšamo do kletochnoysmerti. // medregionalno zbirke znanstveno. Dela / Biochemistry narubezhe XXI stoletja. - 2000.- Ryazan. - S.173-177.

5. Shamshinova AM Zueva MV, Tsapenko IV, Yakovlev AA Neyrofiziologicheskieosobennosti retina in možni klinični elektroretinografija .// Vestn. Oftalmol. - 1996.- №2.- S.52-55.

6. Dogodki za glavkom v dokumentu // slackinc.com), očesno kirurgijo News International Edition, 15. december 1996

7. Vitreousbody koncentracija glutamata pri psih glavkoma / Brooks D.E., Garcia G.A., Dreyer E.B. sploh // Am. J. Vet. Res. - 1997.- Vol.58, N8.- P.864-867