Lastnosti protitelesca mRNA. Strukturo mRNA imunoglobulinov

v zvezi z dodelitvijo čisti pripravki mRNA pustimo, da se premikajo na neposredno preučevanje njihovih fizikalnih in kemijskih lastnosti in strukture. Takoj je bilo ugotovljeno, da v sedimentacijski konstantno, in s tem molekulsko maso in mere mRNA, ki kodirajo za H in L-vrednost predhodno precej nad pričakovano. MRNA sedimentacija konstante za H verige definirano gladka 12-17S (Namba, Hanaoka, 1969- Bernardini, Tonegawa, leta 1973 Cowan ea, 1976), in L-mRNA -12- 15S (Tonegawa, Baldi, leta 1973 Mach ea, leta 1973 Schechter ea, 1976).

oziroma Molekulske mase teh mRNA do 440 000 v primeru L-mRNA in ne 220.000, kot je preje mislili, in 650 000, in ne 400,000 H-mRNA. Število nukleotidov v mRNA L-1100-1250, in H-mRNA -1900.

To je enostavno izračunati, da za sintezo L-verige, ki sestoji iz 214 aminokislinskih ostankov zahteva le ~ 650 nukleotidov (m. A. 220,000). Za sintezo prekurzorja vsebuje dodatnih 20 NH2-terminalne in -COOH terminalne ostanke 25 aminokislinske potrebne za nadaljnjih 60 do 75 nukleotidov (m. A. 45.000). Skupaj sinteza prekurzor za L-veriga 785 nukleotidov zadostuje, tj. F. ~ 65% vseh razpoložljivih mRNA.

podobno za sintezo H-verige, sestavljen iz 450 aminokislin je potrebna nukleotidov 1350 in v H-mRNA, kot smo videli, je del 1900. Tako je število nukleotidov in dodatki v tem primeru 650. Ker so "neizkoriščena" 30% nukleotidov in kjer se nahajajo kakšna je njihova funkcija?

Študija strukture dveh mRNA, ki kodira L verigo (Brownlee e. a., leta 1973 Faust npr. a., 1974), in ena mRNA, ki kodira H verigo (Vegpag-dini, Tonegawa, 1973, 1974) so ​​pokazale, da 200 nukleotidov (m. . 65000) v teh mRNA predstavljal poliA sekvenco, ki se nahaja na 3`-terminalnem delu molekul. Njihova funkcija je še vedno nejasna. Očitno je samo to, ker večkrat nukleotidov najdenih pri vseh preiskanih kolikor je mRNA, ki kodira sintezo proteinov kot prosta in vezana polyribosomes (Rosenfeld npr. A., 1972), posebno glede na sintezo izločajo proteine ​​na splošno, in imunoglobulini so posebej nimajo.

Znano je, da poli-end To se pridruži molekule mRNA po zaključku njegovo sintezo. Predpostavlja se, da ima poliA stran vlogo pri prevozu mRNA iz jedra v citoplazmo, vendar pa prisotnost poli-faze v virusnem genomu se podvaja v citoplazmi kaže, da je treba večkrat nukleotidi biti, in druge funkcije. Možno je, da se mora poliA mesto spremeniti sekundarno in terciarno strukturo mRNA in povečati njihovo stabilnost ali se veže z mRNA poliribosomami- morda igrajo vlogo pri mRNA prevodu, čeprav ni jasno dokazano, (Rosenfeld e. A., 1972).
Tudi 200 nukleotidov, ki se nanašajo na skupno rabo poliA mesto v L-200 mRNA ostaja nukleotidov ne prenašajo in znane, kjer se nahaja.

L-mRNA tsepevoy iz MOPC so nedavno odkrili 41 celic v manjših količinah methylguanosine in N6-N7-methylguanosine ki se nahaja na 5` koncu in povezan s sosednjimi nukleotidov 5`, 5`-pirofosfatnega vezi. Zdaj je znano, da je prisotnost ostanka na metilguanidilovogo 5` koncu so potrebni za stabilizacijo in prevajanje mRNA pri evkariontih.

Videoposnetki: 44 - genetskega koda kodonoma trojčke); besede

podatki o dešifriranje mRNA strukturo so predhodni. Po avtorjev nenatančno določi dimenzije na 5` neprevedene regije, medtem ko so le pozni mRNA 194 nukleotidi sposobni "atribut" polje kodiran protein verigo, sestavljeno iz 75 aminokislin (od 214 v celotni L-veriga).

podobno delo Opravljena je bila z mRNA, ki kodira H verigo MOPC 21 (Cowan npr. a., 1976). Z uporabo ene izmed mutantov MOPC 21, sintezo H-verige CH1 domene izbrisa, daje dekodiranje 18 oligonukleotidov, ki vsebujejo podlage 202 in pripadajo tako N- in C-domene. H-mRNA so tudi odkrili in poliA- neprevedene nukleotidov.

Opozoriti je treba, da je osnovna vrednost Rezultati, proizvedena v teh poskusih je še v tem, da so končno rešili problem sinteze H- in L-tsepsy kot celoto, in združiti podatke o strukturi N- in C-domene na nivoju DNA Dejansko bi L-mRNA ne samo, da prepoznajo nukleotidnih sekvenc, ki kodirajo V- in C-domeno in pokazati, da so na isti molekuli, ampak tudi poudariti ostanki oligonukleotid kodiranja 105-108, t. e. spoj v V- in C-domene.
Kot smo videli že prej, so bili podobni rezultati, pridobljeni z uporabo drugega pristopa je tudi na molekularnem nivoju.

Poleg tega so v prid združitvi V- in C-genov na nivoju DNA in branje informacij že v kombinaciji s temi geni, kot en sam gen, poskusi kažejo, somatske hibridne celice, ki proizvajajo imunoglobuline razlikujejo v svojih V- in C-domen (Margulies e. a., od leta 1977 Milstein e. a., 1977) . V nobenem od teh poskusih nismo opazili tvorbe rekombinaptnyh molekule vsebujejo klinastega regijo kodiranega z enim partnerjem in regijo C kodira drugi.