Struktura aktivnih centrov protiteles. Študija aktivnih območij imunoglobulini

Hsia in Piette uporabo monovalentno in bivalentni spin-označenih hapteni DMF Raziskovali smo globino in heterogenost aktivnih območij kunčjega anti-DNP protitelesa. So proučevali odvisnost korelacije-spin označeni monovalentno DFT-hapten veže na aktivno mesto protiteles iz Ha + d 1Ds, V - dolžina hapten, d - razdalja med hapten in nalepke, ki se lahko spremeni s povečanjem ogljikovodikovo verigo med njimi.

Če spremenite Ha + d od 10 do 12 A Avtorji opaziti velik padec v primerjalno časovnim žigom, ki je nato spremenila le malo. To zmanjšanje je zato, ker Ha + d v zgornjem območju presega globino aktivnega mesta in nalepke, tako da postane prosto vrteti. Iz tega sledi, da je globina aktivnih straneh 10-12 A. Podobne rezultate smo dobili tudi pri poskusih z bivalentnih haptenov.

Ko dodamo k protitelo dvovalenten hapten presežno opazovanem ESR spektra močno imobiliziran s tvorbo dimerov ali trimerov protiteles. Najmanjša dolžina bivalentno hapten, pri čemer je sposobnost vezave dveh protiteles molekule še ostalo, je enaka 21 A. Očitno je najmanjša globina aktivne centra je 10,5 A.

dimenzije protiteles, aktivnih centrov, Zdi se, da so odvisni malo na specifičnosti vrste. Tako po enaki metodi dosledno povečanje Razdalja med DFT in spin etiketi, se je pokazalo, da je globina aktivnih centrov piščančjih anti-DFT protiteles in IgA mislomnyh mišje MOPC 315, ki ima visoko afiniteto do DNP je 10 ± 1 A Druga skupina avtorjev raziskovanje center Fv-fragmsnta beljakovin MOPC strukturo 315 s-spin označeni haptenov, je prišel do istega rezultata.

Tako podatki aktivnega globina protitelesa centri, pridobljen s spin etiketi, se dobro ujemajo z analizo X-ray.

-Spin označene hapteni smo uporabili (Willan SL, 1977..) za primerjalno študijo aktivnih območij naslednjih velikostih mislomnyh IgA proti DNP delovanja: MOPC 315, 460 in SIDS XRPC 25. Analiza imunskih kompleksov EPR spektri-spin označene DNP in nekaterih njegovih derivatov Glede na te hapteni stereokemijo privedla do naslednjih zaključkov. Globina aktivnih centrov treh IgA enake elemente (11 - 12), vendar obstajajo razlike v prečni smeri centrov na vhodu.

Za XRPC 25 Ta dimenzija je 7,5X8 A za MOPC 460>10X 11 X A "in za SIDS 315B>8h11A. Vsi trije proteini imajo mesta vezave lantanndov La III in GD III. Interakcija med teh območij in aktivnih centrov. MOPC 160 in razdalja 315 med kovino in N-O skupinski spin označeni hapten okoli 10 A, in XRPC - 25-20 A.

Magnetna jedrska resonanca (NMR) visoke ločljivosti (270 MHz) je ista skupina avtorjev uporablja za preučevanje aktivno mesto Fv-fragment MOPC 315 (Dower npr. A., 1977). Posebni izračuni možno določiti geometrijo aktivnega mesta v povezavi s haptenskega DNP, ki tvori Waalsovih interakcijo s štirimi centralnimi aromatskih aminokislin.

Ugotovljeno je bilo, da so trakovi iz spektra NMR, ustreza fenilalanina ali tirozin ostankov, razširijo v prisotnosti hapten. Najbolj verjetna razlaga za to - zmanjšanje mobilnosti ustreza ostanke, ki lahko niha s frekvenco okoli 104 Hz.