Stabilizacija imunoglobulini haptenov. Odvisnost od konformacije protitelesa temperature

Obstajajo podatki iz različnih metode, kaže na povečanje stabilnosti protiteles in njihovih FAB-fragmentov, ki so posledica kompleksov s haptenov. Na primer, dodajanje teh poveča stabilnost hapten molekul denatiruyuschemu delovanja gvanidin hidroklorida (Cathou, Werner, 1970) in k delovanju kemotripsina (Grossberg npr. A., 1965).

IgM Prav tako stabilizirati posebne hapteni glede proteolize z subtilizina in kemotripsina (Ashman, Metzger, 1971). Pokazalo se je, da je znižanje občutljivosti za napad s proteazami IgM celoti zaradi spremembe lastnosti FAB-fragmentov. Po našem modelu, preusmerja komponento A ravnotežje hapten in B Fab-fragment tekme.

Zato, da pojasni praksa dovolj, da se omogoči zgornjih rezultatov, da je prosta energija bolj kompaktna konformacijska Nižji prosta energija konformacijska B (t. e. A-konformacijska stabilen kot B). Če je tako, potem povečanje stabilnosti beljakovin, ne bi smela biti odvisna od tega, kako ustrezno ravnotežje premik povzročil.

Dejansko se je izkazalo, da je premik Ravnotežje levo -Spinski označenih dimeri iz lahkih verig, ki posnemajo strukturo FAB-podenot z učinkovanjem 1.2 M NaCl in 0.75 M (NH4) AS04 povečuje stabilnost glede na temperaturo. Podoben premik v ravnovesju med konformerov A in B povzroča druge moti strukturo proteina in njenih hidracijo shell sredstev, kot natrijevega dodecilsulfata in temperaturo.

odvisnost podrejenega stanje IgG po drugih metodah zazna temperaturo. Na primer, G. Troitskii in sodelavci (1971) in J. F. Kiryuhin in sodelavci (1972) z optičnim rotacijskem disperzije opazili reverzibilne odvisna od pH konformacijske spremembe temperature prehoda od 27 ° do 38 °. Nato se je izkazalo, da je v nevtralnem pH območju temperature prehoda ni odvisna od izoelektrične točke IgG.

Vendar, ko pH, oddaljeni od izoelektrične točke, ko je molekula IgG postane dovolj velik lastne stroške, temperature konformacijske prehodi so popolnoma odsotna (Troitsky npr. a., 1973). V VP Zavyalova in osebja (Zavyalov npr. A., 1975) izvedena večplastno raziskave mielom konformacijo proteinov v odvisnosti od pH in temperature optičnih rotacijskem disperzije, krožno dikroizem spektroskopija moteče, elektrokemične jodiranje in diferenčne dinamične kalorimetrije.

Ugotovljeno je bilo, da je pri pH smo spremenili 6,0-6,5 razpoložljivost kromoforne skupine topil zmanjša. To je lahko zaradi sprememb v številu nabitih skupin v proteinu in zmanjšanje intermolekularne elektrostatične sile odbojem. Podoben pojav - zaščitni odsek tirozin in triptofan ostanke (pH 7,35- 0,01 M fosfatni pufer) -nablyudali z naraščajočo temperaturo od 25 do 35 ° C. To pride ob vezavi hapten dinitrofenil homologna kunčje protitelo (IgG) s.

Ti rezultati se lahko šteje za navedbo dejstva, da dvig temperature in nastanek specifičnih kompleksov z haptenov povečuje kompaktnost, ki je v skladu s številnimi del zgoraj navedenih.