Glavni pristopi za prenatalno diagnostiko genskih bolezni. Neposredno diagnoza genetske nepravilnosti.

Metode molekularne diagnostike - glavni izdelek in glavno orodje analizo strukture, t.j. Zaporedje nukleotidov v molekuli DNA - osnovna genom (dedno aparati) oseba. Prva faza grand International dešifriranja molekularno strukturo programa za raziskave DNK človeškega o je bila končana leta 2000, ki ustvarja "osnutek človeškega genoma." V tem delu smo se omejili na opisom osnovnih načel metode, ki temeljijo na DNK. Podrobneje s tehniko molekulskih študijah so na voljo v posebnih monografij in učbenikov.

Diagnostične metode na osnovi DNA, namenjen prepoznavanje mutacije ali molekulsko mutant kromosom CE verižne reakcije s polimerazo sinteze DNA (PCR). Zgodovinsko prej metoda popivnamo Južna hibridizacija se trenutno uporablja veliko manj pogosto, čeprav se uporabljajo za identifikacijo nekaterih mutacij, predvsem dinamičnih mutacij ", ki vodijo do širitve bolezni (sindrom Fragile-X, miotonicheskayadistrofiya, Huntingtonova bolezen, število nevrodegenerativnih bolezni) in hemofilija A, in nekaterih drugih bolezni.

Predlagana je metoda PCR Leta 1983 je ameriški učenjak Curry Mullis dodeljenega za to odkritje Nobelove nagrade leta 1993, postopke za sintetiziranje selektivno omogoča (pomnožimo) vitro relativno majhnih segmentov DNA in dolžino od nekaj deset do več kilobazami, pri čemer se šablonske DNA iz katerega koli vsebuje Ojačano zaporedje.

potrebno Pogoj za PCR je poznavanje nukleotidnega zaporedja pomnoženega DNA regije, kot je specifična izbira mestu izvede s hibridizacijo s šablonsko DNA z dvema primerjema sintetiziranega umetno - oligonukleotidnih zaporedij DNA, običajno z dolžino 15 do 30 bp komplementarne 3`-terminalov pomnoženega odseka v smislu in antisense verigo DNK, oz. Razdalja med primerji določa dolžino sintetiziranih molekul. Podrobnosti o tehniko produkcije PCR lahko najdete v priročnikih.

PCR metoda Postal je glavni v molekularni diagnostiki dednih bolezni. Razvita in se pogosto uporablja v praksi, različne variante te metode za hitro in učinkovito prepoznavanje mutacije, študijo DNA polimorfizmov, ki se uporabljajo za molekularno označevanje mutiranih kromosomov.

Trenutno obstajata dva osnovna pristopa k prenatalno diagnostiko, kot tudi na splošno diagnosticiranje genetskih bolezni:
- direktna diagnoza temelji na takojšnjo identifikacijo mutacij v določenem genu;
- posredno (posredne) diagnostika, ki temelji na označevanju mutirane gena (včasih imenovana oznako "pacient" kromosom nosi mutantni gen) z uporabo molekularnih markerjev.

Neposredno diagnoza genetske nepravilnosti

Z direktno diagnozo Identifikacija mutacij v genu. Prednosti metode - visoka (blizu 100%) diagnostično natančnost, možnost PD in informativne analize (primernosti za molekularno diagnostiko) družin in prepoznavanje heterozigotnih nosilcev v odsotnosti pacienta otrok.

ob brez večjih genske mutacije To zahteva podrobno molekulsko analizo (skeniranje) primarno strukturo gena za odkrivanje mutacij, ki jih je mogoče pripisati pomanjkljivosti metode.

Osnova vsake monogenskih bolezni so kršitve funkcije genov, različnih mutacij v svojih pomenskih delov, in sicer povzročajo, gensko sekvenco, ki kodira sintezo proteinov (cDNA). Vrsta in mutacija spektre, kot njihove fenotipske izražanja (resnost bolezni) so specifične za vsak gen, ki je v veliki meri odvisna od edinstvenih značilnosti njene primarne strukture (nukleotidna zaporedja).

Znano je tudi, da je pogostost drugačen mutacije vsak gen je drugačen. Pogoste so "višje" mutacije, diagnostična vrednost, ki je še posebej visoka, in "male" (ena občasna), registracije izjemno redki. Za mnoge od genov, ki so odgovorni za dedne bolezni, mutacije spektri so dobro raziskana in razvita optimalne algoritme za njihovo identifikacijo. Na primer, pozitiven na gen za cistično fibrozo je delF508 mutacija, ki jo najdemo v skoraj 50% vseh mutiranih kromosomov pri CF bolnikih v Rusija genske fenilalanina - to R408W mutacija odkrita Y45% bolnikov s fenilketonurijo iz Rusije, za gen distrofinski označena z dovolj veliko delecijami, zabeležili pri 60% kromosomov X pri bolnikih z Duchennove mišične distrofije, itd

več podrobnosti Algoritmi za molekularno diagnostiko različne monogenske bolezni, so navedeni v posebnih vodilih, ocene.